الكيمياء الهيستولوجية المناعية (IHC)



الكيمياء المناعية (IHC) هي اختبار معملي يستخدم على نطاق واسع ويتضمن استخدام الأجسام المضادة للكشف عن مستضدات محددة (بروتينات) في الخلايا داخل أقسام الأنسجة. يستخدم علماء الأمراض هذا الاختبار لمعرفة توزيع وتوطين بروتينات معينة داخل أجزاء مختلفة من الأنسجة، وبالتالي توفير معلومات تشخيصية وتنبؤية وتنبؤية قيمة.

كيف تعمل الكيمياء المناعية؟

يعتمد المبدأ الكامن وراء الكيمياء المناعية على تقارب الارتباط المحدد بين الجسم المضاد ومستضده. تم تصميم الجسم المضاد لاستهداف بروتين محدد محل الاهتمام داخل عينة الأنسجة والارتباط به. بمجرد الارتباط، يتم تصور هذا التفاعل باستخدام نظام الكشف، مما يؤدي إلى ظهور إشارة ملونة أو فلورسنت يمكن رؤيتها تحت المجهر.

الخطوات المتبعة في الكيمياء المناعية

  1. تحضير العينة: يتم جمع عينات الأنسجة، غالبًا من خلال خزعة أو جراحي استئصالثم يتم تثبيتها للحفاظ على بنية الأنسجة. الفورمالين هو مثبت شائع الاستخدام. يتم تضمين الأنسجة في شمع البارافين لتسهيل عملية التقسيم.
  2. التقسيم: يتم تقطيع كتلة الأنسجة المضمنة بالبرافين إلى أقسام رفيعة (عادة بسمك 4-5 ميكرومتر) باستخدام مشراح. يتم وضع هذه الأقسام على شرائح المجهر لتلوينها.
  3. إزالة البارافين والإماهة: تتم معالجة الشرائح لإزالة البارافين وإعادة ترطيب الأنسجة، عادةً باستخدام الزيلين (أو البدائل) متبوعًا بالكحوليات المتدرجة.
  4. استرجاع المستضد: يتم إخفاء العديد من المستضدات أثناء عملية التثبيت. يتضمن استرجاع المستضد معالجة المقاطع بالحرارة أو الإنزيمات لكشف مواقع المستضدات هذه، مما يجعلها في متناول الأجسام المضادة.
  5. الحجب: يتم حجب مواقع الارتباط غير المحددة باستخدام محلول بروتيني لمنع الجسم المضاد الأولي من الارتباط بشكل غير محدد، مما قد يؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة.
  6. حضانة الجسم المضاد الأولي: يتم تحضين الشريحة بجسم مضاد أولي خاص بالمستضد محل الاهتمام. تسمح هذه الخطوة للجسم المضاد بالارتباط بالمستضد المستهدف في الأنسجة.
  7. الكشف: بعد غسل أي جسم مضاد أولي غير منضم، يتم إضافة جسم مضاد ثانوي. يرتبط هذا الجسم المضاد بإنزيم (مثل بيروكسيداز الفجل الحار أو الفوسفاتيز القلوي) أو علامة الفلورسنت وهو مصمم للارتباط بالجسم المضاد الأولي. يتم بعد ذلك تصور وجود الجسم المضاد الثانوي من خلال تفاعل قياس الألوان (في حالة الأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم) أو التألق (في حالة الأجسام المضادة ذات العلامات الفلورية). للكشف اللوني، تتم إضافة ركيزة يحولها الإنزيم إلى منتج ملون مرئي في موقع تفاعل الجسم المضاد مع المستضد.
  8. التلوين المضاد: لتعزيز تصور بنية الأنسجة، يتم عادةً تطبيق صبغة مضادة خفيفة (مثل الهيماتوكسيلين) على الشريحة، وصبغ الخلية نوى مع لون متباين.
  9. التركيب والتصور: يتم تغطية الشريحة بغطاء، ويتم فحص الأنسجة الملونة تحت المجهر الضوئي أو الفلوريسنت. يوفر توطين وكثافة ونمط التلوين نظرة ثاقبة على وجود المستضد وتوزيعه داخل الأنسجة.

التطبيقات

تلعب الكيمياء المناعية دورًا أساسيًا في علم الأمراض التشخيصي لتحديد نوع وأصل الخلايا السرطانية، وتشخيص الأمراض المعدية، والتمييز بين الحالات المتشابهة.

من خلال قدرتها على تحديد البروتينات على وجه التحديد داخل البنية المعقدة للأنسجة، أصبحت الكيمياء المناعية أداة لا غنى عنها في علم الأمراض، مما يؤثر بشكل كبير على التشخيص والتشخيص وتطوير العلاجات المستهدفة.

أنماط التعبير في الكيمياء المناعية

في الكيمياء المناعية، تشير أنماط الصبغ - النووية والسيتوبلازمية والغشائية - إلى توطين المستضد (البروتين) داخل أجزاء مختلفة من الخلية. يوفر كل نمط رؤى قيمة حول وظيفة البروتين ونوع الخلية التي تعبر عن البروتين.

التعبير النووي

يحدث التعبير النووي عندما يتم ترجمة تلطيخ IHC إلى الخلية نواة، حيث يحدث تخليق الحمض النووي الريبوزي (DNA) والحمض النووي الريبي (RNA)، ويوجد العديد من البروتينات التنظيمية. تشمل أمثلة البروتينات التي تظهر التعبير النووي عوامل النسخ والمستقبلات النووية والبروتينات المشاركة في تكرار الحمض النووي وإصلاحه. على سبيل المثال، يُظهر مستقبل هرمون الاستروجين (ER) في خلايا سرطان الثدي تلطيخًا نوويًا لأنه يعمل كعامل نسخ ينظم التعبير الجيني.

التعبير النووي المناعي

يعد التلوين النووي مهمًا في تشخيص الأمراض التي تنطوي على تغييرات في التعبير الجيني أو تنظيم دورة الخلية. وهو مهم بشكل خاص في حالات السرطان حيث يمكن لوجود أو عدم وجود البروتينات النووية، مثل مستقبلات الهرمون، أن يوجه قرارات العلاج.

التعبير السيتوبلازمي

ويلاحظ التعبير السيتوبلازمي عندما يتم توزيع تلطيخ في جميع أنحاء السيتوبلازم، الجزء من الخلية الذي يحيط نواة ويحتوي على عضيات مختلفة والهيكل الخلوي.
تشمل أمثلة البروتينات التي تظهر التعبير السيتوبلازمي الإنزيمات والبروتينات الهيكلية وبعض جزيئات الإشارة. يتضمن المثال السيتوكيراتين، وهي بروتينات خيوط وسيطة موجودة في سيتوبلازم الخلايا الظهارية.

التعبير السيتوبلازمي في الكيمياء المناعية

يساعد تلوين السيتوبلازم في تحديد الخلايا التي تنتج بروتينات معينة تشارك في عملية التمثيل الغذائي، أو الإشارة، أو البنية الخلوية. يمكن أن تكون هذه المعلومات حاسمة لتشخيص وتصنيف الأورام، وفهم الأمراض الأيضية، وتحديد العوامل المعدية.

التعبير الغشائي

يشير التعبير الغشائي إلى تلطيخ موضعي على غشاء الخلية، وهو الحد الذي يفصل الخلية عن بيئتها الخارجية ويتوسط التواصل مع الخلايا الأخرى والمصفوفة خارج الخلية. تتضمن أمثلة البروتينات التي تظهر تعبيرًا غشائيًا المستقبلات الغشائية والناقلات وجزيئات التصاق الخلايا. ومن الأمثلة المعروفة HER2 / neu الإفراط في التعبير في بعض أنواع سرطان الثدي، حيث يتم الكشف عن بروتين HER2 كنمط تلطيخ غشائي.

التعبير الغشائي المناعي

يعد التلوين الغشائي مهمًا بشكل خاص لتحديد الخلايا التي تستجيب للإشارات خارج الخلية أو المشاركة في تفاعلات الخلية أو مصفوفة الخلية. في علم الأورام، يمكن أن يشير وجود بروتينات غشائية معينة إلى مدى عدوانية الورم وقابليته للعلاجات المستهدفة.

يعد فهم أنماط التعبير هذه أمرًا أساسيًا في تطبيق الكيمياء المناعية في علم الأمراض التشخيصي. فهو يمكّن علماء الأمراض من إجراء تشخيصات دقيقة وفهم الفيزيولوجيا المرضية للأمراض وإبلاغ استراتيجيات العلاج. على سبيل المثال، تحديد وجود ER (التعبير النووي) و HER2 (التعبير الغشائي) في خلايا سرطان الثدي أمر بالغ الأهمية لاتخاذ قرار بشأن العلاج الهرموني والعلاج الموجه، على التوالي.

العلامات المناعية الكيميائية الشائعة

CD34
سيتوكراتين 7 (CK7)
سيتوكراتين 20 (CK20)
ديزمين
مستقبلات هرمون الاستروجين (ER)
جاتا 3
كي 67
MIB-1
p16
p63
p53
p40
مستقبلات البروجسترون (PR)
S100
سوكس-10
تي تي إف-1

حول هذا المقال

كتب الأطباء هذه المقالة لمساعدتك على قراءة وفهم تقرير الحالة المرضية الخاص بك. تواصل معنا إذا كانت لديك أسئلة حول هذه المقالة أو تقرير علم الأمراض الخاص بك. للحصول على مقدمة كاملة لتقرير علم الأمراض الخاص بك، اقرأ هذا المقال.

موارد مفيدة أخرى

أطلس علم الأمراض
A+ A A-