Fluorescenční in situ hybridizace (FISH)

Srpna 29, 2023

Fluorescenční in situ hybridizace (FISH) je laboratorní test používaný v patologii k detekci a lokalizaci přítomnosti nebo nepřítomnosti specifických sekvencí DNA na chromozomech. Funguje tak, že využívá fluorescenční sondy, které se vážou pouze na ty části chromozomu, které odpovídají sondě nebo jsou k ní komplementární. Běžně se používá při diagnostice rakoviny a některých genetických syndromů.

Jak funguje fluorescenční hybridizace in situ?

1. Příprava sondy: Fluorescenční sonda je navržena tak, aby odpovídala specifické požadované sekvenci DNA. Tato sonda je poté označena fluorescenčním barvivem. Různé sondy mohou být označeny různými barvivy pro detekci více cílů současně.
2. Příprava vzorku: DNA ve vzorku (jako jsou buňky ze vzorku krve, biopsie nebo tkáňové řezy) je denaturována, což znamená, že je zahřátá, aby se dvouvláknová DNA oddělila na jednovláknová.
3. Hybridizace: Fluorescenčně značená sonda se aplikuje na vzorek, kde vyhledá a naváže (hybridizuje) svou komplementární sekvenci DNA v genomu.
4. Promytí: Po hybridizaci se vzorek promyje, aby se odstranila jakákoli přebytečná sonda, která se nenavázala na svou cílovou DNA. Tento krok pomáhá snížit signál pozadí a zlepšit specifičnost detekce.
5. Detekce: Vzorek se zkoumá pod fluorescenčním mikroskopem. Sondy, které se navázaly na specifické sekvence DNA, budou fluoreskovat a jejich umístění může být vizualizováno a analyzováno.

Proč se tento test provádí?

Schopnost fluorescenční in situ hybridizace poskytovat přesné genetické informace na buněčné úrovni z ní činí neocenitelný nástroj v diagnostice a léčbě rakoviny a genetických onemocnění.

• Detekce chromozomálních abnormalit: FISH dokáže identifikovat specifické genetické mutace, delece, duplikace a translokace spojené s různými genetickými chorobami a stavy, včetně rakoviny. Například se široce používá k detekci chromozomu Philadelphia u chronické myeloidní leukémie (CML), což je specifická translokace mezi chromozomy 9 a 22.
• Diagnostika a prognóza rakoviny: Identifikací genetických změn specifických pro určité typy rakoviny pomáhá FISH při diagnostice nemoci, stanovení její prognózy a výběru vhodných terapií. Používá se například k detekci HER2/neu amplifikace u rakoviny prsu, která může ovlivnit rozhodnutí o léčbě.
• Genetická onemocnění: FISH se používá při diagnostice genetických stavů, jako je Downův syndrom, detekcí přítomnosti další kopie chromozomu 21.

O tomto článku

Lékaři napsali tento článek, aby vám pomohl přečíst a porozumět vaší patologické zprávě. Kontakt pokud máte dotazy k tomuto článku nebo k vaší zprávě o patologii. Úplný úvod do zprávy o patologii najdete v článku tento článek.

Další užitečné zdroje

Atlas patologie