Voolutsütomeetria: definitsioon


Patoloogiaaruandes sõna “Voog” Tavaliselt viitab see laboratoorsele testile, mida nimetatakse voolutsütomeetriaSeda testi kasutatakse üksikute rakkude analüüsimiseks vere-, luuüdi- või lümfisõlmvõi muud kehavedelikku või kude. Voolutsütomeetria võimaldab patoloogidel uurida rakkude paljusid erinevaid omadusi, näiteks nende suurust, kuju ja ekspresseeritavaid valke, lastes need läbi masina, mis kasutab iga raku analüüsimiseks lasereid ja detektoreid.

Voolutsütomeetria on eriti oluline verevähi, sealhulgas leukeemia ja lümfoomi diagnoosimisel ja jälgimisel, samuti immuunsüsteemi häirete hindamisel, siirdamise jälgimisel ja teatud tüüpi infektsioonide korral.

Miks tehakse voolutsütomeetriat?

Voolutsütomeetria on mitmekülgne meetod, mis annab proovis olevate rakkude kohta üksikasjalikku teavet. Seda saab kasutada järgmistel eesmärkidel:

  • Rakkude loendamine ja klassifitseerimine – Voolutsütomeetria abil saab mõõta proovis olevate rakkude arvu ja tüüpi. Samuti saab selle abil hinnata rakkude suurust ja sisemist keerukust. Teatud ebaküpsed rakud, näiteks blastid, võivad aga vajada täiendavat tõlgendamist ja neid ei loendata alati ainult selle meetodi abil täpselt.

  • Biomarkerite tuvastamine – Test tuvastab rakkude pinnal või sees olevaid spetsiifilisi valke. Need valgud, mida nimetatakse markeriteks, aitavad määrata rakkude tüüpi ja funktsiooni ning on paljude haiguste diagnoosimisel olulised.

  • Haiguse diagnoosimine ja jälgimine – Voolutsütomeetriat kasutatakse tavaliselt leukeemia ja lümfoomi diagnoosimiseks, samuti retsidiivide või ravivastuse jälgimiseks. Seda saab kasutada ka immuunpuudulikkuse ja teatud infektsioonide, näiteks HIV, hindamisel.

  • Immunofenotüüpimine – See viitab voolutsütomeetria kasutamisele raku identiteedi määramiseks, tuginedes selle ekspresseeritavatele valkudele. See on ülioluline erinevat tüüpi valgeliblede tuvastamiseks, eriti verevähi diagnoosimisel ja klassifitseerimisel.

Kuidas voolutsütomeetriat tehakse?

Voolutsütomeetria hõlmab tavaliselt järgmisi samme:

  1. Proovi ettevalmistamine – Rakkude proov – tavaliselt verest, luuüdist või koest – kogutakse ja töödeldakse vedelaks suspensiooniks. Seejärel töödeldakse rakke fluorestseeruvate antikehadega, mis on spetsiaalsed molekulid, mis seonduvad spetsiifiliste valkudega rakkude pinnal või sees. Need antikehad helendavad laseriga kokkupuutel, võimaldades neid tuvastada.
  2. Proovi käivitamine –  Värvitud proov asetatakse voolutsütomeetriks nimetatavasse masinasse. Masin kasutab vedelikusüsteemi, et saata rakud ükshaaval läbi laserkiire. Iga raku läbimisel toimub laseriga interaktsioon.
  3. Tuvastamine ja analüüs –  Laseri ja rakkude vaheline interaktsioon põhjustab valguse hajumist ning fluorestseeruvad markerid kiirgavad värvilist valgust. Spetsiaalsed detektorid mõõdavad seda valgust ja saadavad teabe arvutisse. Seejärel kuvatakse andmed diagrammidel ja graafikutel (näiteks hajuvusdiagrammidel ja histogrammidel), mis näitavad esinevate rakkude tüüpe ja arvu.

Voolutsütomeetria abil saab analüüsida tuhandeid kuni miljoneid rakke vaid mõne minutiga.

Kuidas patoloogiaaruandes tulemusi kirjeldatakse?

Voolutsütomeetria aruanne sisaldab mitut osa, mis aitavad tulemusi selgitada:

  • Näidisinfo – Sisaldab testitud proovi tüüpi (nt veri, luuüdi, lümfisõlm), selle kogumise aega ja kõiki asjakohaseid kliinilisi üksikasju.

  • Metoodika – Lühike kirjeldus testi läbiviimise kohta, sh kuidas rakke töödeldi ja milliseid antikehi või fluorestseeruvaid värvaineid kasutati.

  • Markerite paneel – Nimekiri spetsiifilistest valkudest (nn markeritest), mida rakkude peal või sees testiti. Need markerid on märgistatud nimedega nagu CD3, CD19 või CD45 ja aitavad tuvastada erinevat tüüpi rakke, näiteks T-rakke, B-rakke või blaste.

  • Tulemused – Selles osas kirjeldatakse tuvastatud rakupopulatsioone ja iga rakutüübi hulka. Tulemused võidakse esitada protsentides või absoluutarvudes ning need sisaldavad üksikasju selle kohta, milliseid markereid ekspresseeriti. Näiteks võib aruandes väita, et rakkude rühm on CD19-positiivne, mis viitab sellele, et tegemist on B-rakkudega.

  • Tõlgendus – Patoloog selgitab leide. See võib sisaldada diagnoosi (näiteks teatud tüüpi leukeemia või lümfoom), kommentaari selle kohta, kas esineb haiguse kordumise märke, või soovitust täiendavate uuringute tegemiseks.

  • Graafika – Mõned aruanded sisaldavad hajuvusdiagramme või histogramme, mis näitavad rakkude jaotust valimis. Need pildid aitavad visualiseerida, kuidas rakud rühmitati ja tuvastati.

proovi voolutsütomeetria tulemused

Miks on voolutsütomeetria oluline?

Voolutsütomeetria annab teavet, mis tavaliste värvimistega ei pruugi olla nähtav, näiteks hematoksüliin ja eosiin (H&E)See võimaldab patoloogidel tuvastada rakutüüpe, täpsemalt klassifitseerida vähki ja tuvastada minimaalset jääkhaigust, mis teiste meetoditega ei pruugi olla nähtav. See on tänapäeva vähidiagnostikas, eriti hematoloogiliste (vere)vähkide puhul, kriitilise tähtsusega tööriist.

Arstile esitatavad küsimused

  • Miks minu puhul voolutsütomeetriat tehti?

  • Mis tüüpi rakke proovist leiti?

  • Kas tulemused viitavad konkreetsele diagnoosile?

  • Kas tulemuste põhjal on vaja täiendavaid uuringuid?

  • Kuidas need leiud minu raviplaani mõjutavad?

A+ A A-