इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी): परिभाषा

इम्युनोहिस्टोकैमिस्ट्री (अक्सर IHC के रूप में संक्षिप्त) एक प्रयोगशाला परीक्षण है पैथोलॉजिस्ट ऊतक के नमूने में कोशिकाओं के भीतर विशिष्ट प्रोटीन, जिन्हें एंटीजन भी कहा जाता है, का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। इन प्रोटीनों को उजागर करके, पैथोलॉजिस्ट मौजूद कोशिकाओं के प्रकार, उनकी उत्पत्ति और उनके व्यवहार के बारे में बेहतर समझ हासिल कर सकते हैं। यह जानकारी डॉक्टरों को सटीक निदान करने, बीमारी की प्रगति की भविष्यवाणी करने और सबसे प्रभावी उपचारों का चयन करने में सक्षम बनाती है।

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री कैसे काम करती है?

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में एंटीबॉडी नामक विशेष रसायनों का उपयोग किया जाता है। ये एंटीबॉडी ऊतक के नमूने में विशिष्ट प्रोटीन को पहचान सकते हैं और उनसे जुड़ सकते हैं। एक बार जब एंटीबॉडी अपने लक्षित प्रोटीन से जुड़ जाती है, पैथोलॉजिस्ट डाई या फ्लोरोसेंट मार्कर जोड़कर इसे माइक्रोस्कोप के नीचे दृश्यमान बनाया जा सकता है। इससे कोशिकाओं के भीतर प्रोटीन के स्थान को देखना आसान हो जाता है।

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में क्या चरण शामिल हैं?

1. नमूना तैयार करनासबसे पहले, ऊतक के नमूने एक के माध्यम से प्राप्त किए जाते हैं बीओप्सी या सर्जरी। उन्हें संरक्षित करने के लिए, नमूनों को एक विशेष घोल, आमतौर पर फॉर्मेलिन, के साथ उपचारित किया जाता है और फिर पैराफिन नामक मोम जैसे पदार्थ में एम्बेड किया जाता है।

2. सेक्शनिंगसंरक्षित ऊतक को बहुत पतले टुकड़ों (लगभग 4-5 माइक्रोमीटर मोटे) में काटा जाता है और कांच के माइक्रोस्कोप स्लाइडों पर रखा जाता है, जहां इसे अभिरंजन के लिए तैयार किया जाता है।

3. डिपैराफिनाइजेशन और पुनर्जलीकरणमोम (पैराफिन) को विशेष रसायनों का उपयोग करके हटाया जाता है, जिससे ऊतक को प्रभावी ढंग से रंगा जा सकता है।

4. एंटीजन पुनर्प्राप्ति: कभी-कभी, ऊतक तैयार करने के दौरान प्रोटीन (एंटीजन) छिप जाते हैं। पैथोलॉजिस्ट इन प्रोटीनों को फिर से उजागर करने के लिए ऊतक को गर्मी या विशेष एंजाइमों के साथ उपचारित करते हैं, जिससे एंटीबॉडी के लिए उन्हें ढूंढना आसान हो जाता है।

5. अवरूध्दयह सुनिश्चित करने के लिए कि एंटीबॉडी केवल अपने इच्छित प्रोटीन से ही जुड़ें, पैथोलॉजिस्ट अन्य अवांछित बंधन स्थलों को अवरुद्ध करने के लिए विशेष प्रोटीन समाधान का उपयोग करते हैं।

6. प्राथमिक एंटीबॉडी इन्क्यूबेशनस्लाइडों को एक प्राथमिक एंटीबॉडी से ढका जाता है जो विशेष रूप से इच्छित प्रोटीन से जुड़ती है।

7. खोज: किसी भी अतिरिक्त प्राथमिक एंटीबॉडी को धोने के बाद, एक द्वितीयक एंटीबॉडी लगाया जाता है। यह दूसरा एंटीबॉडी प्राथमिक एंटीबॉडी से चिपक जाता है और या तो एक एंजाइम या एक फ्लोरोसेंट मार्कर ले जाता है। सक्रिय होने पर, यह रंग या फ्लोरोसेंट प्रकाश उत्पन्न करता है, जो लक्ष्य प्रोटीन के सटीक स्थान को प्रकट करता है।

8. काउंटरस्टेनिंग: पैथोलॉजिस्ट को ऊतक संरचना को स्पष्ट रूप से देखने में मदद करने के लिए, एक हल्का पृष्ठभूमि दाग (अक्सर हेमाटोक्सिलिन, जो कोशिका को रंग देता है) नाभिक नीला) जोड़ा गया है।

9. माउंटिंग और विज़ुअलाइज़ेशनअंत में, स्लाइड को एक पतली कवरस्लिप से ढक दिया जाता है और माइक्रोस्कोप से जांच की जाती है। पैथोलॉजिस्ट परिणामों की व्याख्या करने के लिए धुंधलापन के पैटर्न, तीव्रता और स्थान को नोट करते हैं।

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री क्यों महत्वपूर्ण है?

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री अत्यंत मूल्यवान है क्योंकि यह रोगविज्ञानियों को रोगों का सटीक निदान करने में मदद करती है। यह विभिन्न प्रकार की कैंसर कोशिकाओं के बीच अंतर कर सकता है, संक्रमणों की पहचान कर सकता है, और माइक्रोस्कोप के नीचे समान दिखने वाली बीमारियों को अलग कर सकता है। इसके अतिरिक्त, विशिष्ट प्रोटीन की पहचान करके, डॉक्टर लक्षित उपचारों सहित सबसे प्रभावी उपचार विकल्पों का निर्धारण कर सकते हैं।

विभिन्न रंगाई पैटर्न का क्या अर्थ है?

जब पैथोलॉजिस्ट इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री स्लाइड की जांच करते हैं, तो वे कोशिकाओं के भीतर प्रोटीन के वितरण की बारीकी से जांच करते हैं। तीन मुख्य पैटर्न हैं: न्यूक्लियर एक्सप्रेशन, साइटोप्लाज्मिक एक्सप्रेशन और मेम्ब्रेनस एक्सप्रेशन। प्रत्येक को नीचे अधिक विस्तार से समझाया गया है।

परमाणु अभिव्यक्ति

परमाणु अभिव्यक्ति (जिसे परमाणु प्रतिक्रियाशीलता के रूप में भी जाना जाता है) उस धुंधलापन को संदर्भित करता है जो स्थित होता है नाभिक कोशिका का वह भाग, जहाँ आनुवंशिक पदार्थ, जैसे कि डीएनए, संग्रहित होता है। नाभिक में पाए जाने वाले प्रोटीन अक्सर कोशिका वृद्धि और व्यवहार को विनियमित करने में शामिल होते हैं। उदाहरण के लिए, एस्ट्रोजन रिसेप्टर (ईआर)स्तन कैंसर के उपचार के निर्णयों में महत्वपूर्ण प्रोटीन, न्यूक्लियर स्टेनिंग के रूप में दिखाई देता है। न्यूक्लियर स्टेनिंग की पहचान करने से डॉक्टरों को कुछ कैंसर का निदान करने और हार्मोन थेरेपी जैसे उचित उपचार निर्धारित करने में मदद मिलती है।

कोशिकाद्रव्यी अभिव्यक्ति

साइटोप्लाज्मिक अभिव्यक्ति (जिसे साइटोप्लाज्मिक प्रतिक्रियाशीलता भी कहा जाता है) में होता है कोशिका द्रव्य, कोशिका के आस-पास का क्षेत्र नाभिक जिसमें कई महत्वपूर्ण संरचनाएं और एंजाइम होते हैं। यहां पाए जाने वाले प्रोटीन आमतौर पर चयापचय में भूमिका निभाते हैं, संरचनात्मक सहायता प्रदान करते हैं, या आंतरिक संकेतन की सुविधा प्रदान करते हैं। साइटोप्लाज्मिक धुंधलापन का एक उदाहरण इसकी उपस्थिति है साइटोकैटिन्स—शरीर के कई हिस्सों की कोशिकाओं में पाए जाने वाले प्रोटीन। इस प्रकार के धुंधलापन से कोशिकाओं की उत्पत्ति की पहचान करने, विशिष्ट प्रकार के कैंसर का निदान करने या संक्रमण का पता लगाने में मदद मिलती है।

झिल्लीदार अभिव्यक्ति

झिल्ली अभिव्यक्ति (जिसे झिल्ली प्रतिक्रियाशीलता के रूप में भी जाना जाता है) कोशिका की सतह या झिल्ली पर स्थित प्रोटीन को उजागर करती है, जो कोशिकाओं को एक दूसरे और उनके आस-पास के वातावरण के साथ संवाद करने में मदद करती है। एक प्रसिद्ध उदाहरण है HER2 कुछ स्तन कैंसर में प्रोटीन, जो एक विशिष्ट झिल्लीदार धुंधला पैटर्न द्वारा चिह्नित होता है। झिल्लीदार प्रोटीन की पहचान करना महत्वपूर्ण है क्योंकि यह लक्षित उपचारों का मार्गदर्शन कर सकता है, जिससे डॉक्टरों को रोगी के विशिष्ट प्रकार के कैंसर के अनुरूप उपचार चुनने में मदद मिलती है।

अभिव्यक्ति के इन पैटर्नों को समझने से रोगविज्ञानियों को सटीक निदान करने, रोग की प्रगति का बेहतर पूर्वानुमान लगाने तथा प्रभावी उपचार सुझाने में मदद मिलती है।