Áramlási citometria

Március 4, 2023

A patológiában az „áramlás” gyakran utal az áramlási citometriára, egy olyan laboratóriumi vizsgálatra, amelyet a testnedvek és szövetek, például a vér és a csontvelő fizikai és kémiai jellemzőinek elemzésére használnak. Ez a vizsgálat lehetővé teszi az optikai és/vagy elektronikus érzékelőberendezésen átfolyó egyes cellák több fizikai és/vagy kémiai jellemzőjének egyidejű elemzését. Ezt a tesztet gyakran használják olyan vérrákok diagnosztizálására és monitorozására, mint pl lymphoma és leukémia, bár számos más állapot esetén is alkalmazható.

Miért végeznek áramlási citometriát?

• Sejtszámlálás: Az áramlási citometriát a sejtek fizikai jellemzőinek, például méretének és összetettségének a számlálására és elemzésére használják. Egyes sejttípusok, mint pl robbantásban nem számolható ezzel a teszttel.
• Biomarkerek kimutatása: A technika azonosítja és mennyiségileg meghatározza a sejtek felszínén vagy belsejében lévő specifikus biomarkereket, ami döntő fontosságú a betegségek diagnosztizálásában.
• Betegségek diagnosztizálása és monitorozása: A vérrákok, az immunhiányos betegségek és a fertőző betegségek diagnosztizálásában segít a vérsejtek tulajdonságainak elemzésével. A Flow-t a kezelés hatásainak nyomon követésére és a visszatérő betegségek keresésére is használják.
• Immunfenotipizálás: Ez a folyamat bizonyos sejttípusok jelenlétének és mennyiségének azonosítására a mintában, ami elengedhetetlen bizonyos típusú leukémia és lymphoma, valamint a fertőző betegségek, például a HIV megfigyelése.

Hogyan történik az áramlási citometria?

1. Minta-előkészítés: A sejteket, például vért, csontvelőt vagy szöveti lizátumokat tartalmazó mintát a sejtek pufferoldatban való szuszpendálásával készítik. A sejteket meg lehet festeni fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens markerekkel megjelölt antitestekkel, amelyek specifikus sejtkomponensekhez vagy markerekhez kötődnek.
2. A minta futtatása: Az előkészített mintát az áramlási citométerbe helyezzük. A gép egy fluid rendszert használ, hogy a mintát egy keskeny, hidrodinamikailag fókuszált folyadékáramba szívja. A cellák úgy vannak elrendezve, hogy egyenként áthaladjanak a lézersugáron.
3. Észlelés: Amikor a sejtek áthaladnak a lézeren, szétszórják a fényt, és a fluoreszcens markerek gerjesztődnek, és különböző hullámhosszúságú fényt bocsátanak ki. A detektorok rögzítik ezt a fényt (a szórt és a kibocsátott fluoreszcenciát egyaránt), és elektromos jelekké alakítják.
4. Elemzés: Az áramlási citométerrel gyűjtött adatokat speciális szoftver segítségével elemzik. Az egyes cellák tulajdonságai diagramokban vagy hisztogramokban jeleníthetők meg, ami lehetővé teszi több ezer vagy több millió sejt elemzését rövid időn belül.

Hogyan írják le ennek a vizsgálatnak az eredményeit a patológiai jelentés?

A patológiai jelentésben az áramlási citometria eredményeit jellemzően részletesen és strukturáltan írják le, a vizsgálat során elemzett sejtek sajátos jellemzőire és populációira összpontosítva. A jelentés tartalma és formátuma a vizsgálat céljától, az elemzett minta típusától és a vizsgált betegségtől vagy állapottól függően változhat. A legtöbb áramlási citometriai jelentés azonban a következő kulcselemeket tartalmazza:

• Mintainformáció: Részletek a vizsgált mintáról, beleértve a minta típusát (pl. vér, csontvelő, nyirokcsomószövet), a gyűjtés dátumát és a betegre vonatkozó bármely információt.
• Módszertan: Az alkalmazott áramlási citometriai módszer rövid leírása, beleértve a sejt-előkészítéssel, a festési protokollokkal és az alkalmazott fluoreszcens markerek (antitestek) típusával kapcsolatos információkat.
• Markerek panel: A vizsgált specifikus sejtfelszíni markerek (antigének) és/vagy intracelluláris markerek listája, valamint a használt fluoreszcens jelölések. Ez a rész betekintést nyújt az elemzés céljaiba, amelyek kritikusak bizonyos sejtpopulációk azonosításához.
• Eredmények: Ez a jelentés központi része, amely bemutatja az áramlási citometriás elemzés eredményeit. Az eredményeket gyakran a specifikus markereket expresszáló sejtek százalékában vagy abszolút számában adják meg, jelezve a különböző sejttípusok jelenlétét és arányát a mintán belül. Például a leukémia vagy limfóma összefüggésében a jelentés részletezi a rosszindulatú sejtek immunfenotípusát, mint pl. CD19+ B sejtek or CD3+ T-sejtekés arányuk a teljes elemzett sejtpopulációhoz viszonyítva.
• Értelmezés: A patológus értelmezi az eredményeket, elmagyarázza, mit jelentenek a leletek a páciens klinikai megjelenése és egyéb laboratóriumi leletek összefüggésében. Ez a rész tartalmazhat diagnózist (pl. a leukémia egy bizonyos típusának azonosítását), prognosztikai információkat, valamint további vizsgálatokra vagy kezelésre vonatkozó ajánlásokat.
• Grafika: Egyes jelentések hisztogramokat vagy szórásdiagramokat tartalmazhatnak, amelyek vizuálisan reprezentálják az áramlási citometriai elemzésből nyert adatokat. Ezek a vizuális segédeszközök segíthetnek szemléltetni az elemzett sejtpopulációk eloszlását és jellemzőit.

A cikkről

Az orvosok azért írták ezt a cikket, hogy segítsenek elolvasni és megérteni a patológiai jelentést. Kapcsolatfelvétel ha kérdése van ezzel a cikkel vagy patológiai jelentésével kapcsolatban. A patológiai jelentés teljes körű bemutatásához olvassa el ezt a cikket.

Egyéb hasznos források

A patológia atlasza