Fluoreszcencia in situ hibridizáció (FISH)

29. augusztus 2023.

A fluoreszcencia in situ hibridizáció (FISH) egy laboratóriumi vizsgálat, amelyet a patológiában használnak a kromoszómák specifikus DNS-szekvenciáinak jelenlétének vagy hiányának kimutatására és lokalizálására. Fluoreszcens szondák használatával működik, amelyek csak a kromoszóma azon részeihez kötődnek, amelyek megegyeznek a szondával, vagy azzal komplementerek. Általában a rák és bizonyos genetikai szindrómák diagnosztizálására használják.

Hogyan működik a fluoreszcencia in situ hibridizáció?

1. Szonda előkészítése: A fluoreszcens próbát úgy tervezték meg, hogy illeszkedjen a kérdéses DNS-szekvenciához. Ezt a szondát ezután fluoreszcens festékkel jelöljük. Különböző szondák különböző színezékekkel jelölhetők fel, hogy egyszerre több célpontot is detektálhassanak.
2. Minta-előkészítés: A mintában lévő DNS (például vérmintából, biopsziából vagy szövetmetszetből származó sejtek) denaturálódik, ami azt jelenti, hogy felmelegítik, hogy a kétszálú DNS-t egyetlen szálra szétválasszák.
3. Hibridizáció: A fluoreszcensen jelölt szondát a mintára visszük fel, ahol megkeresi és megköti (hibridizálja) a genomon belüli komplementer DNS-szekvenciáját.
4. Mosás: A hibridizáció után a mintát mossuk, hogy eltávolítsuk a felesleges próbát, amely nem kötődött a cél-DNS-hez. Ez a lépés segít csökkenteni a háttérjelet és javítani az észlelés specifitását.
5. Kimutatás: A mintát fluoreszcens mikroszkóp alatt vizsgáljuk. Azok a próbák, amelyek specifikus DNS-szekvenciákhoz kötődtek, fluoreszkálnak, és elhelyezkedésük láthatóvá és elemezhetővé válik.

Miért végzik el ezt a tesztet?

Az in situ fluoreszcencia hibridizáció azon képessége, hogy pontos genetikai információt biztosít a sejtszinten, felbecsülhetetlen eszközzé teszi a rákos megbetegedések és a genetikai betegségek diagnosztizálásában és kezelésében.

• Kromoszóma-rendellenességek kimutatása: A FISH képes azonosítani a különféle genetikai betegségekhez és állapotokhoz kapcsolódó specifikus genetikai mutációkat, deléciókat, duplikációkat és transzlokációkat, beleértve a rákot is. Például széles körben használják a Philadelphia kromoszóma kimutatására krónikus mieloid leukémiában (CML), amely egy specifikus transzlokáció a 9. és 22. kromoszómák között.
• Rákdiagnózis és prognózis: Bizonyos típusú rákfajtákra jellemző genetikai változások azonosításával a FISH segít a betegség diagnosztizálásában, prognózisának meghatározásában és a megfelelő terápiák kiválasztásában. Például észlelésre használják HER2/neu mellrák amplifikációja, ami befolyásolhatja a kezelési döntéseket.
• Genetikai betegségek: A FISH-t genetikai állapotok, például Down-szindróma diagnosztizálására használják a 21-es kromoszóma egy extra másolatának kimutatásával.

A cikkről

Az orvosok azért írták ezt a cikket, hogy segítsenek elolvasni és megérteni a patológiai jelentést. Kapcsolatfelvétel ha kérdése van ezzel a cikkel vagy patológiai jelentésével kapcsolatban. A patológiai jelentés teljes körű bemutatásához olvassa el ezt a cikket.

Egyéb hasznos források

A patológia atlasza