Immunoistochimica (IHC): definizione

L'immunoistochimica (spesso abbreviata in IHC) è un test di laboratorio utilizzato dai patologi per rilevare proteine ​​specifiche, note anche come antigeni, all'interno delle cellule di un campione di tessuto. Evidenziando queste proteine, i patologi possono comprendere meglio i tipi di cellule presenti, la loro origine e il loro comportamento. Queste informazioni consentono ai medici di formulare diagnosi accurate, prevedere la progressione di una malattia e selezionare i trattamenti più efficaci.

Come funziona l'immunoistochimica?

L'immunoistochimica utilizza sostanze chimiche specializzate note come anticorpi. Questi anticorpi sono in grado di riconoscere e legarsi a proteine ​​specifiche all'interno del campione di tessuto. Una volta che un anticorpo si lega alla proteina bersaglio, i patologi possono renderla visibile al microscopio aggiungendo un colorante o un marcatore fluorescente. Ciò consente di visualizzare facilmente la posizione della proteina all'interno delle cellule.

Quali sono le fasi dell'immunoistochimica?

1. Preparazione del campione : Innanzitutto, i campioni di tessuto vengono ottenuti tramite biopsia o intervento chirurgico. Per conservarli, i campioni vengono trattati con una soluzione speciale, solitamente formalina, e poi inclusi in una sostanza cerosa chiamata paraffina.

2. Sezionamento : Il tessuto conservato viene tagliato in fette molto sottili (circa 4-5 micrometri di spessore) e posto su vetrini da microscopio, dove viene preparato per la colorazione.

3. Deparaffinazione e reidratazione : la cera (paraffina) viene rimossa mediante l'utilizzo di sostanze chimiche specifiche, consentendo così una colorazione efficace del tessuto.

4. Recupero degli antigeni : Talvolta, durante la preparazione dei tessuti, le proteine ​​(antigeni) vengono nascoste. I patologi trattano il tessuto con il calore o con enzimi specifici per riportare alla luce queste proteine, rendendole più facilmente individuabili dagli anticorpi.

5. Blocco : Per garantire che gli anticorpi si leghino solo alle proteine ​​a cui sono destinati, i patologi utilizzano soluzioni proteiche speciali per bloccare altri siti di legame indesiderati.

6. Incubazione con anticorpo primario : i vetrini vengono ricoperti con un anticorpo primario che si lega specificamente alla proteina di interesse.

7. Rilevamento : Dopo aver rimosso l'eccesso di anticorpo primario mediante lavaggio, viene applicato un anticorpo secondario. Questo secondo anticorpo si lega all'anticorpo primario e trasporta un enzima o un marcatore fluorescente. Una volta attivato, produce colore o luce fluorescente, rivelando l'esatta posizione della proteina bersaglio.

8. Colorazione di contrasto : per aiutare i patologi a visualizzare chiaramente la struttura del tessuto, viene aggiunta una leggera colorazione di fondo (spesso ematossilina, che colora di blu i nuclei cellulari).

9. Montaggio e visualizzazione : Infine, i vetrini vengono coperti con un sottile vetrino coprioggetti ed esaminati al microscopio. I patologi annotano le caratteristiche, l'intensità e la localizzazione della colorazione per interpretare i risultati.

Perché l'immunoistochimica è importante?

L'immunoistochimica è estremamente preziosa perché aiuta i patologi a diagnosticare le malattie in modo accurato. Può distinguere diversi tipi di cellule tumorali, identificare infezioni e differenziare malattie che appaiono simili al microscopio. Inoltre, identificando proteine ​​specifiche, i medici possono determinare le opzioni terapeutiche più efficaci, comprese le terapie mirate.

Cosa significano i diversi modelli di colorazione?

Quando i patologi esaminano i vetrini di immunoistochimica, esaminano attentamente la distribuzione delle proteine ​​all'interno delle cellule. Esistono tre modelli principali: espressione nucleare, espressione citoplasmatica ed espressione membranosa. Ciascuno di essi è spiegato più dettagliatamente di seguito.

Espressione nucleare

L'espressione nucleare (nota anche come reattività nucleare) si riferisce alla colorazione presente nel nucleo della cellula, dove è immagazzinato il materiale genetico, come il DNA. Le proteine ​​presenti nel nucleo sono spesso coinvolte nella regolazione della crescita e del comportamento cellulare. Ad esempio, il recettore degli estrogeni (ER) , una proteina importante nelle decisioni terapeutiche relative al tumore al seno, appare come una colorazione nucleare. L'identificazione della colorazione nucleare aiuta i medici a diagnosticare alcuni tumori e a determinare i trattamenti più appropriati, come la terapia ormonale.

Espressione citoplasmatica

L'espressione citoplasmatica (nota anche come reattività citoplasmatica) si verifica nel citoplasma , la regione che circonda il nucleo cellulare e che contiene numerose strutture ed enzimi importanti. Le proteine ​​presenti nel citoplasma svolgono in genere un ruolo nel metabolismo, forniscono supporto strutturale o facilitano la segnalazione interna. Un esempio di colorazione citoplasmatica è la presenza di citocheratine , proteine ​​che si trovano nelle cellule che rivestono molte parti del corpo. Questo tipo di colorazione aiuta a identificare l'origine delle cellule, a diagnosticare specifici tipi di cancro o a rilevare infezioni.

Espressione membranosa

L'espressione di membrana (nota anche come reattività di membrana) evidenzia le proteine ​​situate sulla superficie o sulla membrana cellulare, che consentono alle cellule di comunicare tra loro e con l'ambiente circostante. Un esempio ben noto è la proteina HER2 , presente in alcuni tumori al seno, caratterizzata da un particolare pattern di colorazione di membrana. L'identificazione delle proteine ​​di membrana è fondamentale perché può guidare le terapie mirate, aiutando i medici a selezionare trattamenti specifici per il tipo di tumore di ciascun paziente.

La comprensione di questi modelli di espressione aiuta i patologi a fornire diagnosi accurate, a prevedere meglio la progressione delle malattie e a consigliare trattamenti efficaci.