אימונוהיסטוכימיה (לעתים קרובות מקוצר כ-IHC) היא בדיקת מעבדה ש... פתולוגים משמשים לגילוי חלבונים ספציפיים, המכונים גם אנטיגנים, בתוך תאים בדגימת רקמה. על ידי הדגשת חלבונים אלה, פתולוגים יכולים להבין טוב יותר את סוגי התאים הקיימים, מקורם והתנהגותם. מידע זה מאפשר לרופאים לבצע אבחנות מדויקות, לחזות את התקדמות המחלה ולבחור את הטיפולים היעילים ביותר.
איך עובדת אימונוהיסטוכימיה?
אימונוהיסטוכימיה משתמשת בכימיקלים מיוחדים המכונים נוגדנים. נוגדנים אלה יכולים לזהות ולהיקשר לחלבונים ספציפיים בתוך דגימת הרקמה. ברגע שנוגדן נקשר לחלבון המטרה שלו, פתולוגים ניתן להפוך אותו לגלוי תחת מיקרוסקופ על ידי הוספת צבע או סמן פלואורסצנטי. זה מקל על הדמיית מיקום החלבון בתוך התאים.
מהם השלבים הכרוכים באימונוהיסטוכימיה?
-
הכנת דוגמאותראשית, דגימות רקמה נלקחות באמצעות ביופסיה או ניתוח. כדי לשמר אותן, דגימות מטופלות בתמיסה מיוחדת, בדרך כלל פורמלין, ולאחר מכן משובצות בחומר דמוי שעווה הנקרא פרפין.
-
חתךהרקמה המשומרת נחתכת לפרוסות דקות מאוד (בעובי של כ-4-5 מיקרומטר) ומונחת על שקופיות מיקרוסקופ מזכוכית, שם היא מוכנה לצביעה.
-
דה-פרפיניזציה והידרציההשעווה (פרפין) מוסרת באמצעות כימיקלים מיוחדים, המאפשרים צביעה יעילה של הרקמה.
-
אחזור אנטיגןלעיתים, חלבונים (אנטיגנים) נסתרים במהלך הכנת הרקמה. פתולוגים מטפלים ברקמה בחום או באנזימים מיוחדים כדי לחשוף מחדש את החלבונים הללו, מה שמקל על נוגדנים למצוא אותם.
-
חסימתכדי להבטיח שהנוגדנים יתחברו רק לחלבונים המיועדים להם, פתולוגים משתמשים בתמיסות חלבון מיוחדות כדי לחסום אתרי קישור לא רצויים אחרים.
-
דגירת נוגדנים ראשונייםהשקופיות מכוסות בנוגדן ראשוני שמתחבר באופן ספציפי לחלבון הרצוי.
-
איתורלאחר שטיפת עודפי הנוגדן הראשוני, מורחים נוגדן משני. נוגדן שני זה נדבק לנוגדן הראשוני ונושא אנזים או סמן פלואורסצנטי. כאשר הוא מופעל, הוא מייצר צבע או אור פלואורסצנטי, וחושף את המיקום המדויק של חלבון המטרה.
-
צביעה נגדיתכדי לעזור לפתולוגים לראות את מבנה הרקמה בבירור, צביעת רקע עדינה (לעתים קרובות המטוקסילין, אשר צובע את התאים) גרעינים כחול) נוסף.
-
הרכבה והדמיהלבסוף, השקופיות מכוסות במכסה דק ונבדקות תחת מיקרוסקופ. פתולוגים מציינים את דפוסי הצביעה, עוצמתה ומיקוםה כדי לפרש את התוצאות.
מדוע אימונוהיסטוכימיה חשובה?
אימונוהיסטוכימיה היא בעלת ערך רב משום שהיא מסייעת לפתולוגים לאבחן מחלות במדויק. היא יכולה להבחין בין סוגים שונים של תאי סרטן, לזהות זיהומים ולהבדיל בין מחלות שנראות דומות תחת המיקרוסקופ. בנוסף, על ידי זיהוי חלבונים ספציפיים, רופאים יכולים לקבוע את אפשרויות הטיפול היעילות ביותר, כולל טיפולים ממוקדים.
מה המשמעות של דפוסי צביעה שונים?
כאשר פתולוגים בוחנים שקופיות אימונוהיסטוכימיה, הם בוחנים מקרוב את פיזור החלבונים בתוך התאים. ישנם שלושה דפוסים עיקריים: ביטוי גרעיני, ביטוי ציטופלזמי וביטוי קרומי. כל אחד מהם מוסבר ביתר פירוט בהמשך.
ביטוי גרעיני
ביטוי גרעיני (הידוע גם כתגובתיות גרעינית) מתייחס לצביעה הממוקמת ב גרעין של התא, שם מאוחסן חומר גנטי, כגון DNA. חלבונים הנמצאים בגרעין התא מעורבים לעתים קרובות בוויסות גדילת תאים והתנהגותם. לדוגמה, ה קולטן לאסטרוגן (ER), חלבון חשוב בהחלטות טיפול בסרטן השד, מופיע כצביעה גרעינית. זיהוי צביעה גרעינית מסייע לרופאים לאבחן סוגי סרטן מסוימים ולקבוע טיפולים מתאימים, כגון טיפול הורמונלי.
ביטוי ציטופלזמי
ביטוי ציטופלזמי (הידוע גם כתגובתיות ציטופלזמית) מתרחש ב ציטופלזמה, האזור סביב התא גרעין שמכיל מבנים ואנזימים חשובים רבים. חלבונים הנמצאים כאן בדרך כלל ממלאים תפקיד בחילוף החומרים, מספקים תמיכה מבנית או מקלים על איתות פנימי. דוגמה לצביעה ציטופלזמית היא נוכחות של ציטוקרטינים—חלבונים הנמצאים בתאים המצפים חלקים רבים בגוף. סוג זה של צביעה מסייע בזיהוי מקור התאים, באבחון סוגים ספציפיים של סרטן או בזיהוי זיהומים.
ביטוי קרומי
ביטוי קרומי (הידוע גם כתגובתיות ממברנלית) מדגיש חלבונים הממוקמים על פני התא או על קרום התא, מה שעוזר לתאים לתקשר זה עם זה ועם סביבתם. דוגמה ידועה היא HER2 חלבון מסוגים מסוימים של סרטן השד, המאופיין בדפוס צביעה קרומי ייחודי. זיהוי חלבונים קרומיים הוא קריטי משום שהוא יכול להנחות טיפולים ממוקדים, ולסייע לרופאים לבחור טיפולים המותאמים לסוג הסרטן הספציפי של המטופלת.
הבנת דפוסי ביטוי אלה עוזרת לפתולוגים לספק אבחנות מדויקות, לחזות טוב יותר כיצד מחלות עשויות להתקדם ולהמליץ על טיפולים יעילים.
אנו גאים לשתף פעולה עם:
