צוות מילון הפתולוגיה
אפריל 5, 2023
הכלאה במקום (ISH) היא בדיקת מעבדה המשמשת לראות חומר גנטי, כגון DNA או RNA, בתוך תאים או רקמות. הוא נפוץ בשימוש ברפואה כדי לזהות ולהמחיש גנים או תוצרי גנים ספציפיים וכדי לזהות גורמים זיהומיים כגון וירוסים.
ISH כרוך בשימוש בחתיכת חומר גנטי קטנה מסומנת (בדיקה של חומצת גרעין) המשלימה (הפוכה) לחומר הגנטי היעד. ניתן לשלב את הגשש עם סוגים שונים של תוויות, כגון צבעים פלורסנטים, איזוטופים רדיואקטיביים או אנזימים, המאפשרים לראות את הגשש בתוך תאים.
על מנת לבצע ISH, דגימת רקמה מקובעת ומעובדת תחילה לשימור המבנה שלה והכנתה להכלאה. לאחר מכן מודגרת הרקמה עם הבדיקה המסומנת, המתחברת (כלאה) לחומר הגנטי היעד אם הוא קיים. לאחר מכן שוטפים את שאריות הבדיקה, ושאר שילובי הבדיקה והמטרה מזוהים באחת מכמה שיטות.
ישנם מספר סוגים שונים של טכניקות ISH, כולל פלואורסצנטי הכלאה באתרו (FISH), הכלאה כרומוגני באתרו (CISH), והכלאה של RNA באתרו (ISH-RNA). FISH ו-CISH משתמשים בתוויות ניאון או כרומוגניות, בהתאמה, כדי להמחיש את מיקומו של החומר הגנטי היעד, בעוד ש-ISH-RNA מזהה באופן ספציפי מולקולות RNA בתוך תאים או רקמות.