蛍光 in situ ハイブリダイゼーション (FISH) は、染色体上の特定の DNA 配列の有無を検出して位置を特定するために病理学で使用される臨床検査です。これは、プローブと一致するか相補的な染色体の部分にのみ結合する蛍光プローブを使用することで機能します。がんや特定の遺伝性症候群の診断によく使用されます。
蛍光insituハイブリダイゼーションはどのように機能しますか?
プローブの準備: 蛍光プローブは、目的の特定の DNA 配列に一致するように設計されています。次に、このプローブは蛍光色素で標識されます。異なるプローブを異なる色素で標識して、複数のターゲットを同時に検出できます。
サンプルの前処理: サンプル中の DNA (血液サンプル、生検、または組織切片からの細胞など) は変性しています。これは、二本鎖 DNA を一本鎖に分離するために加熱されることを意味します。
ハイブリダイゼーション: 蛍光標識されたプローブがサンプルに適用され、そこでゲノム内の相補的な DNA 配列を探し出して結合 (ハイブリダイズ) します。
洗浄: ハイブリダイゼーション後、サンプルを洗浄して、ターゲット DNA に結合していない余分なプローブを除去します。このステップは、バックグラウンドシグナルを低減し、検出の特異性を向上させるのに役立ちます。
検出: サンプルは蛍光顕微鏡で検査されます。特定の DNA 配列に結合したプローブは蛍光を発し、その位置を視覚化して分析できます。
このテストはなぜ行われるのでしょうか?
細胞レベルで正確な遺伝情報を提供する蛍光 in situ ハイブリダイゼーションの能力により、蛍光 in situ ハイブリダイゼーションは癌や遺伝性疾患の診断と管理において非常に貴重なツールとなります。