Fluorescences in situ hibridizācija (FISH)

Augusts 29, 2023

Fluorescences in situ hibridizācija (FISH) ir laboratorijas tests, ko izmanto patoloģijā, lai noteiktu un lokalizētu specifisku DNS sekvenču esamību vai neesamību hromosomās. Tas darbojas, izmantojot fluorescējošas zondes, kas saistās tikai ar tām hromosomas daļām, kas atbilst zondei vai ir tai komplementāras. To parasti izmanto vēža un noteiktu ģenētisku sindromu diagnostikā.

Kā darbojas fluorescences in situ hibridizācija?

1. Zondes sagatavošana: Fluorescējošā zonde ir izstrādāta, lai atbilstu konkrētajai interesējošo DNS secībai. Pēc tam šī zonde tiek marķēta ar fluorescējošu krāsu. Dažādas zondes var marķēt ar dažādām krāsvielām, lai vienlaikus noteiktu vairākus mērķus.
2. Parauga sagatavošana: DNS paraugā (piemēram, šūnas no asins parauga, biopsijas vai audu sekcijām) tiek denaturēta, kas nozīmē, ka tā tiek uzkarsēta, lai divpavedienu DNS sadalītu atsevišķās virknēs.
3. Hibridizācija: fluorescējoši marķētā zonde tiek uzklāta uz parauga, kur tā meklē un saistās (hibridizējas) ar savu komplementāro DNS sekvenci genomā.
4. Mazgāšana: pēc hibridizācijas paraugu mazgā, lai noņemtu lieko zondi, kas nav saistījusies ar mērķa DNS. Šis solis palīdz samazināt fona signālu un uzlabot noteikšanas specifiku.
5. Atklāšana: paraugu pārbauda ar fluorescences mikroskopu. Zondes, kas ir saistītas ar noteiktām DNS sekvencēm, fluorescēs, un to atrašanās vietu var vizualizēt un analizēt.

Kāpēc šī pārbaude tiek veikta?

Fluorescences in situ hibridizācijas spēja nodrošināt precīzu ģenētisko informāciju šūnu līmenī padara to par nenovērtējamu līdzekli vēža un ģenētisko slimību diagnostikā un ārstēšanā.

• Hromosomu anomāliju noteikšana: FISH var identificēt specifiskas ģenētiskas mutācijas, dzēšanas, dublēšanās un translokācijas, kas saistītas ar dažādām ģenētiskām slimībām un stāvokļiem, tostarp vēzi. Piemēram, to plaši izmanto, lai noteiktu Filadelfijas hromosomu hroniskas mieloleikozes (CML) gadījumā, kas ir specifiska translokācija starp 9. un 22. hromosomu.
• Vēža diagnostika un prognozes: identificējot ģenētiskās izmaiņas, kas raksturīgas noteiktiem vēža veidiem, FISH palīdz diagnosticēt slimību, noteikt tās prognozi un izvēlēties atbilstošu terapiju. Piemēram, to izmanto, lai noteiktu HER2/neu krūts vēža pastiprināšanās, kas var ietekmēt ārstēšanas lēmumus.
• Ģenētiskās slimības: FISH izmanto ģenētisko stāvokļu, piemēram, Dauna sindroma, diagnostikā, nosakot 21. hromosomas papildu kopijas klātbūtni.

Par šo rakstu

Ārsti uzrakstīja šo rakstu, lai palīdzētu jums izlasīt un izprast jūsu patoloģijas ziņojumu. Sazināties ar mums ja jums ir jautājumi par šo rakstu vai jūsu patoloģijas ziņojumu. Lai iegūtu pilnīgu ievadu patoloģijas ziņojumā, izlasiet šis raksts.

Citi noderīgi resursi

Patoloģijas atlants