امونوهیسټو کیمیا (IHC)

Immunohistochemistry (IHC) په پراخه کچه کارول شوي لابراتوار ازموینه ده چې د انټي باډي کارول پکې شامل دي ترڅو د نسجونو برخو کې په حجرو کې ځانګړي انټيجن (پروټین) کشف کړي. رنځپوهان دا ازموینه د نسج په بیلابیلو برخو کې د ځانګړي پروټینونو توزیع او ځایی کولو لپاره کاروي ، پدې توګه ارزښتناک تشخیصي ، پروګنوسټیک او وړاندوینې معلومات چمتو کوي.

امونوهیسټو کیمیا څنګه کار کوي؟

د امونوهیسټو کیمیا تر شا اصل د انټي باډي او د هغې انټيجن ترمینځ د ځانګړي پابند تړاو پراساس دی. انټي باډي د نسج په نمونه کې د ګټو ځانګړي پروټین په نښه کولو او تړلو لپاره ډیزاین شوی. یوځل چې تړل کیږي، دا تعامل د کشف سیسټم په کارولو سره لیدل کیږي، د رنګ یا فلوروسینټ سیګنال په پایله کې چې د مایکروسکوپ لاندې لیدل کیدی شي.

هغه ګامونه چې د امونوهیسټو کیمیا په برخه کې دخیل دي

1. د نمونې چمتو کول: د نسج نمونې راټولیږي، ډیری وختونه له لارې بایپسی یا جراحي ریسیکشن، او بیا د نسج جوړښت ساتلو لپاره ټاکل شوی. فارملین یو عام استعمال شوی فکسوینټ دی. نسج د پارافین موم کې ځای په ځای شوی ترڅو د برخې کولو اسانتیا ولري.
2. برخه کول: د پارافین سرایت شوي نسج بلاک د مایکروټوم په کارولو سره په نریو برخو (عموما 4-5 مایکرو میتر ضخامت) کې پرې شوی. دا برخې د داغونو لپاره د مایکروسکوپ سلایډونو کې ایښودل شوي.
3. Deparaffinization او rehydration: سلایډونه د پارافین د لیرې کولو او نسجونو بیا هایډریټ کولو لپاره درملنه کیږي، په ځانګړې توګه د xylene (یا بدیلونو) په کارولو سره د درجه بندي الکولونو په تعقیب.
4. د انټيجن ترلاسه کول: ډیری انټيجنونه د تنظیم کولو پروسې په جریان کې ماسک شوي. د انټيجن بیرته ترلاسه کولو کې د تودوخې یا انزایمونو سره د برخو درملنه شامله ده ترڅو دا انټيجنیک سایټونه افشا کړي، دوی انټي باډیز ته د لاسرسي وړ کوي.
5. بلاک کول: غیر مشخص پابند ځایونه د پروټین محلول په کارولو سره بند شوي ترڅو لومړني انټي باډي په غیر مشخص ډول پابند نه کړي ، کوم چې کولی شي د غلط مثبت پایلو لامل شي.
6. لومړني انټي باډي انکیوبیشن: سلایډ د لومړني انټي باډي سره مینځل کیږي کوم چې د سود انټيجن سره مشخص وي. دا ګام انټي باډي ته اجازه ورکوي چې په نسج کې خپل هدف انټيجن سره وتړي.
7. کشف: وروسته له دې چې هر ډول غیر محدود لومړني انټي باډي له مینځه یوسي، یو ثانوي انټي باډي اضافه کیږي. دا انټي باډي د انزایم (لکه هارسرریډش پیرو آکسیډیز یا الکلین فاسفیتس) یا فلوروسینټ لیبل سره یوځای کیږي او د لومړني انټي باډي سره تړلو لپاره ډیزاین شوی. د ثانوي انټي باډي شتون بیا د رنګ میټریک عکس العمل له لارې لیدل کیږي (د انزایم - کنججیټ شوي انټي باډیزونو په حالت کې) یا فلوروسینس (د فلوروسینټ لیبل شوي انټي باډي په حالت کې). د Colorimetric کشف لپاره، یو سبسټریټ اضافه کیږي چې انزایم د انټيجن-انټي باډي تعامل په ځای کې په ښکاره، رنګ شوي محصول بدلوي.
8. کاونټرسټینینګ: د نسج جوړښت د لید د لوړولو لپاره، یو نرم کاونټرسټین (د مثال په توګه، هیماتوکسیلین) په عموم ډول په سلایډ، داغونو حجرو باندې تطبیق کیږي. نیوکلی د یو متضاد رنګ سره.
9. ایښودل او لیدل: سلایډ د پوښ پوښل شوي، او داغ شوي نسج د رڼا یا فلوروسینټ مایکروسکوپ لاندې معاینه کیږي. د داغونو ځایی کول، شدت او نمونه په نسج کې د انټيجن شتون او ویش په اړه بصیرت وړاندې کوي.

غوښتنلیکونه

Immunohistochemistry د سرطان د حجرو د ډول او اصلیت د پیژندلو، د ساري ناروغیو تشخیص، او د ورته ورته شرایطو ترمنځ توپیر لپاره د تشخیصي رنځپوهنې وسیله ده.

د نسجونو په پیچلي جوړښت کې د پروټینونو پیژندلو لپاره د دې وړتیا له لارې، امیونوهیسټ کیمیا په رنځپوهنه کې یو اړین وسیله ګرځیدلې، د پام وړ تشخیص، پروګنوسټیک، او د نښه شوي درملنې پراختیا اغیزه کوي.

په امونوهیسټو کیمیا کې د بیان نمونې

په امونوهیسټو کیمیا کې، د داغونو نمونې - اټومي، سایټوپلاسمیک، او جھلی - د حجرې په مختلفو برخو کې د انټيجن (پروټین) ځایی کولو ته اشاره کوي. هره نمونه د پروټین فعالیت او د پروټین څرګندولو حجرو ډول کې ارزښتناکه لید وړاندې کوي.

اټومي بیان

اټومي څرګندونې هغه وخت رامینځته کیږي کله چې د IHC داغ حجرې ته ځای په ځای شي نیوکلیوس، چیرې چې د DNA او RNA ترکیب واقع کیږي ، او ډیری تنظیمي پروټینونه موقعیت لري. د پروټینونو مثالونه چې اټومي بیان ښیي د لیږد فکتورونه، اټومي رسیدونکي، او پروټینونه شامل دي چې د DNA نقل او ترمیم کې ښکیل دي. د مثال په توګه، د سینې سرطان حجرو کې د ایسټروجن ریسیپټر (ER) اټومي داغ ښیې ځکه چې دا د لیږد فاکتور په توګه کار کوي چې د جین بیان تنظیموي.

اټومي داغونه د ناروغیو په تشخیص کې د پام وړ دي چې د جین بیان یا د حجرو دورې مقرراتو کې بدلونونه پکې شامل دي. دا په ځانګړي ډول په سرطانونو کې مهم دی چیرې چې د اټومي پروټینونو شتون یا نشتوالی ، لکه د هورمون ریسیپټرې کولی شي د درملنې پریکړې لارښود کړي.

سایتوپلازمیک اظهار

د سایټوپلاسمیک څرګندونه لیدل کیږي کله چې داغ په ټوله برخه کې توزیع کیږي سایتوپلازم، د حجرې هغه برخه چې شاوخوا شاوخوا ده نیوکلیوس او مختلف ارګانیلز او سایټوسکلیټون لري.
د پروټینونو مثالونه چې د سایټوپلاسمیک څرګندونه ښیي د انزایمونو، ساختماني پروټینونو، او ځینې سیګنال مالیکولونه شامل دي. یو مثال پکې شامل دی cytokeratins، کوم چې د اپیتیلیل حجرو په سایتوپلازم کې موندل شوي منځمهاله فلامینټ پروټینونه دي.

د سایټوپلاسمیک داغونه د حجرو پیژندلو کې مرسته کوي کوم چې ځانګړي پروټینونه تولیدوي چې په میټابولیزم ، سیګنال یا حجرو جوړښت کې دخیل دي. دا معلومات د تومورونو د تشخیص او طبقه بندي کولو، د میټابولیک ناروغیو د پوهیدو، او د ساري ناروغیو پیژندلو لپاره خورا مهم کیدی شي.

د غشا څرګندونه

Membranous expression هغه داغونو ته اشاره کوي چې د حجرې غشا ته ځای پر ځای شوي وي، هغه حد چې حجره له خپل بهرني چاپیریال څخه جلا کوي او د نورو حجرو او بهر حجرو میټرکس سره اړیکه منځګړیتوب کوي. د پروټینونو مثالونه چې د غشا څرګندونه ښیي د جھلی ریسیپټرې، ټرانسپورټرونه، او د حجرو د چپکولو مالیکولونه شامل دي. یو مشهور مثال دی HER2/neu د سینې په ځینو سرطانونو کې ډیر فشار، چیرې چې د HER2 پروټین د غشا د داغونو نمونې په توګه کشف شوي.

د غشا داغونه په ځانګړي ډول د حجرو د پیژندلو لپاره خورا مهم دي چې د حجرو څخه بهر سیګنالونو ته غبرګون ښیې یا د حجرو حجرو یا سیل میټریکس تعامل کې ښکیل دي. په آنکولوژي کې، د ځانګړو جھلی پروټینونو شتون کولی شي د تومور تیري او د هدفي درملنې لپاره د هغې حساسیت په ګوته کړي.

د بیان د دې نمونو پوهیدل په تشخیصي رنځپوهنه کې د معافیتي کیمیا په پلي کولو کې بنسټیز دي. دا رنځپوهانو ته وړتیا ورکوي چې دقیق تشخیص وکړي ، د ناروغیو رنځ فزیولوژي پوهه کړي ، او د درملنې ستراتیژیو خبر کړي. د مثال په توګه، د شتون ټاکل ER (اټومی بیان) او هیککسومکس د سینې د سرطان په حجرو کې د هورمون درملنې او هدف شوي درملنې په اړه پریکړه کولو لپاره په ترتیب سره (د غشا څرګندونه) خورا مهم دي.

عام امونوهیسټو کیمیکل مارکرونه

CD34

Cytokeratin 7 (CK7)

Cytokeratin 20 (CK20)

ډیسمین

د اسټروجن ریسیپټر (ER)

GATA-3

کی-۸۴

MIB-1

p16

p63

p53

p40

پروجیسټرون ریسیپټر (PR)

S100

SOX-10

TTF-1

د دې مقالې په اړه

ډاکټرانو دا مقاله لیکلې ترڅو تاسو سره ستاسو د رنځپوهنې راپور لوستلو او پوهیدو کې مرسته وکړي. مونږ سره اریکه ونیسی که تاسو د دې مقالې یا ستاسو د رنځپوهنې راپور په اړه پوښتنې لرئ. ستاسو د رنځپوهنې راپور بشپړ پیژندنې لپاره، ولولئ دا ماده.

نورې ګټورې سرچینې

د رنځپوهنې اتلس