Hibridização in situ fluorescente (FISH)

29 de agosto de 2023

A hibridização in situ por fluorescência (FISH) é um teste laboratorial usado em patologia para detectar e localizar a presença ou ausência de sequências específicas de DNA nos cromossomos. Funciona usando sondas fluorescentes que se ligam apenas às partes do cromossomo que correspondem ou são complementares à sonda. É comumente usado no diagnóstico de câncer e de certas síndromes genéticas.

Como funciona a hibridização in situ de fluorescência?

1. Preparação da sonda: Uma sonda fluorescente é projetada para corresponder à sequência específica de DNA de interesse. Esta sonda é então marcada com um corante fluorescente. Diferentes sondas podem ser marcadas com diferentes corantes para detectar múltiplos alvos simultaneamente.
2. Preparação da amostra: O DNA da amostra (como células de uma amostra de sangue, uma biópsia ou seções de tecido) é desnaturado, o que significa que é aquecido para separar o DNA de fita dupla em fitas simples.
3. Hibridização: A sonda marcada com fluorescência é aplicada à amostra, onde procura e se liga (hibridiza) à sua sequência de DNA complementar dentro do genoma.
4. Lavagem: Após a hibridização, a amostra é lavada para remover qualquer excesso de sonda que não se ligou ao seu DNA alvo. Esta etapa ajuda a reduzir o sinal de fundo e a melhorar a especificidade da detecção.
5. Detecção: A amostra é examinada sob um microscópio de fluorescência. As sondas que se ligaram a sequências específicas de DNA apresentarão fluorescência e sua localização poderá ser visualizada e analisada.

Por que esse teste é realizado?

A capacidade da hibridização fluorescente in situ de fornecer informações genéticas precisas no nível celular a torna uma ferramenta inestimável no diagnóstico e tratamento de cânceres e doenças genéticas.

• Detecção de anomalias cromossômicas: O FISH pode identificar mutações genéticas específicas, deleções, duplicações e translocações associadas a várias doenças e condições genéticas, incluindo câncer. Por exemplo, é amplamente utilizado para detectar o cromossomo Filadélfia na leucemia mieloide crônica (LMC), uma translocação específica entre os cromossomos 9 e 22.
• Diagnóstico e prognóstico do cancro: Ao identificar alterações genéticas específicas de certos tipos de cancro, o FISH ajuda no diagnóstico da doença, na determinação do seu prognóstico e na seleção de terapias adequadas. Por exemplo, é usado para detectar HER2/neu amplificação no câncer de mama, o que pode influenciar as decisões de tratamento.
• Doenças genéticas: O FISH é utilizado no diagnóstico de doenças genéticas, como a síndrome de Down, ao detectar a presença de uma cópia extra do cromossomo 21.

Sobre este artigo

Os médicos escreveram este artigo para ajudá-lo a ler e compreender seu relatório patológico. Contacte-nos se você tiver dúvidas sobre este artigo ou sobre seu relatório de patologia. Para uma introdução completa ao seu relatório de patologia, leia Este artigo.

Outros recursos úteis

Atlas de patologia