Citometrie în flux

Martie 4, 2023

În patologie, „flux” se referă adesea la citometria în flux, un test de laborator utilizat pentru analiza caracteristicilor fizice și chimice ale fluidelor și țesuturilor corporale, cum ar fi sângele și măduva osoasă. Acest test permite analiza simultană a caracteristicilor fizice și/sau chimice multiple ale celulelor individuale care curg printr-un aparat de detectare optic și/sau electronic. Acest test este utilizat în mod obișnuit în diagnosticarea și monitorizarea cancerelor de sânge, cum ar fi limfom și leucemie, deși poate fi folosit și pentru o varietate de alte afecțiuni.

De ce se efectuează citometria în flux?

• Numărarea celulelor: Citometria în flux este utilizată pentru numărarea și analiza caracteristicilor fizice ale celulelor, cum ar fi dimensiunea și complexitatea. Unele tipuri de celule precum explozii nu poate fi numărat folosind acest test.
• Detectarea biomarkerilor: Tehnica identifică și cuantifică biomarkeri specifici de la suprafață sau în interiorul celulelor, ceea ce este crucial pentru diagnosticarea bolilor.
• Diagnosticul și monitorizarea bolii: este esențială în diagnosticarea cancerelor de sânge, a deficiențelor imune și a bolilor infecțioase prin analiza proprietăților celulelor sanguine. Fluxul este, de asemenea, utilizat pentru a monitoriza efectele tratamentului și pentru a căuta boli recurente.
• Imunofenotiparea: Acesta este procesul de identificare a prezenței și cantităților anumitor tipuri de celule dintr-o probă, esențial pentru diagnosticarea unor tipuri specifice de leucemie și limfom, precum și monitorizarea bolilor infecțioase precum HIV.

Cum se efectuează citometria în flux?

1. Pregătirea probei: O probă care conține celule, cum ar fi sânge, măduvă osoasă sau lizate tisulare, este preparată prin suspendarea celulelor într-o soluție tampon. Celulele pot fi colorate cu coloranți fluorescenți sau anticorpi marcați cu markeri fluorescenți care se leagă la componente sau markeri specifici celulari.
2. Executarea probei: Proba pregătită este plasată în citometrul de flux. Aparatul folosește un sistem fluidic pentru a trage proba într-un flux de fluid îngust, concentrat hidrodinamic. Celulele sunt aliniate astfel încât să treacă pe rând prin fasciculul laser.
3. Detectare: pe măsură ce celulele trec prin laser, ele împrăștie lumina, iar markerii fluorescenți sunt excitați și emit lumină la diferite lungimi de undă. Detectoarele captează această lumină (atât fluorescență împrăștiată, cât și emisă) și o convertesc în semnale electrice.
4. Analiză: Datele colectate de citometrul de flux sunt analizate cu ajutorul unui software specializat. Proprietățile fiecărei celule pot fi vizualizate în diagrame sau histograme, permițând analiza a mii până la milioane de celule într-o perioadă scurtă.

Cum sunt descrise rezultatele acestui test într-un raport de patologie?

Rezultatele citometriei în flux într-un raport de patologie sunt de obicei descrise într-o manieră detaliată și structurată, concentrându-se pe caracteristicile specifice și populațiile de celule analizate în timpul testului. Conținutul și formatul raportului pot varia în funcție de scopul testului, de tipul de specimen analizat și de boala sau starea specifică investigată. Cu toate acestea, majoritatea rapoartelor de citometrie în flux vor include următoarele elemente cheie:

• Informații despre eșantion: detalii despre proba testată, inclusiv tipul eșantionului (de exemplu, sânge, măduvă osoasă, țesut ganglionilor limfatici), data recoltării și orice informații relevante despre pacient.
• Metodologie: O scurtă descriere a metodei de citometrie în flux utilizată, inclusiv informații despre prepararea celulelor, protocoalele de colorare și tipurile de markeri fluorescenți (anticorpi) aplicați.
• Panou de markeri: O listă a markerilor specifici de suprafață celulară (antigene) și/sau markerilor intracelulari testați, împreună cu etichetele fluorescente utilizate. Această secțiune oferă o perspectivă asupra obiectivelor analizei, care sunt esențiale pentru identificarea populațiilor de celule specifice.
• Rezultate: Aceasta este secțiunea de bază a raportului, prezentând constatările din analiza citometriei în flux. Rezultatele sunt adesea raportate ca procente sau numere absolute de celule care exprimă markeri specifici, indicând prezența și proporția diferitelor tipuri de celule în eșantion. De exemplu, în contextul leucemiei sau limfomului, raportul ar detalia imunofenotipul celulelor maligne, cum ar fi CD19+ Celulele B or CD3+ Celule Tși proporția acestora față de întreaga populație celulară analizată.
• Interpretare: Patologul oferă o interpretare a rezultatelor, explicând ce înseamnă constatările în contextul prezentării clinice a pacientului și al altor constatări de laborator. Această secțiune poate include un diagnostic (de exemplu, identificarea unui anumit tip de leucemie), informații de prognostic și recomandări pentru teste sau tratament ulterioare.
• Grafice: Unele rapoarte pot include histograme sau diagrame de dispersie care reprezintă vizual datele obținute din analiza citometriei în flux. Aceste ajutoare vizuale pot ajuta la ilustrarea distribuției și a caracteristicilor populațiilor de celule analizate.

Despre acest articol

Medicii au scris acest articol pentru a vă ajuta să citiți și să înțelegeți raportul dumneavoastră de patologie. Contactează-ne dacă aveți întrebări despre acest articol sau raportul dumneavoastră de patologie. Pentru o introducere completă a raportului dumneavoastră de patologie, citiți acest articol.

Alte resurse utile

Atlas de patologie