Citometrie în flux: Definiție

Într-un raport de patologie, cuvântul "curgere" se referă de obicei la un test de laborator numit citometrie în fluxAcest test este utilizat pentru a analiza celule individuale dintr-o probă de sânge, măduvă osoasă, ganglionilor limfatici... sau alte fluide sau țesuturi corporale. Citometria în flux permite patologilor să examineze multe caracteristici diferite ale celulelor, cum ar fi dimensiunea, forma și proteinele pe care le exprimă, prin trecerea lor printr-un aparat care utilizează lasere și detectoare pentru a analiza fiecare celulă.

Citometria în flux este deosebit de importantă în diagnosticarea și monitorizarea cancerelor de sânge, inclusiv leucemia și limfomul, precum și în evaluarea tulburărilor sistemului imunitar, monitorizarea transplanturilor și anumite tipuri de infecții.

De ce se efectuează citometria în flux?

Citometria în flux este o tehnică versatilă care oferă informații detaliate despre celulele dintr-o probă. Poate fi utilizată în următoarele scopuri:

• Numărarea și clasificarea celulelor – Citometria în flux poate măsura numărul și tipurile de celule dintr-o probă. De asemenea, poate evalua dimensiunea celulelor și complexitatea internă. Cu toate acestea, anumite celule imature, cum ar fi blaștii, pot necesita interpretări suplimentare și nu sunt întotdeauna numărate cu precizie folosind doar această metodă.

• Detectarea biomarkerului – Testul identifică proteine specifice de pe suprafața sau din interiorul celulelor. Aceste proteine, cunoscute sub numele de markeri, ajută la determinarea tipului și funcției celulelor și sunt esențiale în diagnosticarea multor boli.

• Diagnosticarea și monitorizarea bolilor – Citometria în flux este utilizată în mod obișnuit pentru a ajuta la diagnosticarea leucemiei și a limfomului, precum și pentru monitorizarea recidivelor sau a răspunsului la tratament. De asemenea, poate fi utilizată în evaluarea deficiențelor imune și a anumitor infecții, cum ar fi HIV.

• Imunofenotiparea – Aceasta se referă la utilizarea citometriei în flux pentru a determina identitatea unei celule pe baza proteinelor pe care le exprimă. Acest lucru este crucial pentru identificarea diferitelor tipuri de leucocite, în special în diagnosticarea și clasificarea cancerelor de sânge.

Cum se efectuează citometria în flux?

Citometria în flux implică de obicei următorii pași:

1. Pregătirea probei – O probă de celule — de obicei din sânge, măduvă osoasă sau țesut — este colectată și procesată într-o suspensie lichidă. Celulele sunt apoi tratate cu anticorpi fluorescenți, care sunt molecule speciale care se leagă de proteine specifice de pe sau din interiorul celulelor. Acești anticorpi strălucesc atunci când sunt expuși la un laser, făcând posibilă detectarea lor.
2. Rularea eșantionului –  Proba colorată este plasată într-un aparat numit citometru de flux. Aparatul folosește un sistem fluid pentru a trimite celulele una câte una printr-un fascicul laser. Pe măsură ce fiecare celulă trece prin el, aceasta interacționează cu laserul.
3. Detectare și analiză –  Interacțiunea dintre laser și celule determină împrăștierea luminii, iar markerii fluorescenți emit lumină colorată. Detectorii speciali măsoară această lumină și trimit informațiile către un computer. Datele sunt apoi afișate în diagrame și grafice (cum ar fi diagrame de dispersie și histograme) care arată tipurile și numărul de celule prezente.

Citometria în flux poate analiza mii până la milioane de celule în doar câteva minute.

Cum sunt descrise rezultatele într-un raport de patologie?

Un raport de citometrie în flux include mai multe secțiuni care ajută la explicarea constatărilor:

• Informații eșantion – Include tipul de probă testată (de exemplu, sânge, măduvă osoasă, ganglion limfatic), momentul recoltării și orice detalii clinice relevante.

• Metodologie – O scurtă descriere a modului în care a fost efectuat testul, inclusiv modul în care au fost procesate celulele și ce anticorpi sau coloranți fluorescenți au fost utilizați.

• Panou de marcaje – O listă a proteinelor specifice (numite markeri) care au fost testate pe sau în interiorul celulelor. Acești markeri sunt etichetați cu denumiri precum CD3, CD19 sau CD45 și ajută la identificarea diferitelor tipuri de celule, cum ar fi celulele T, celulele B sau blaștii.

• REZULTATE – Această secțiune descrie populațiile de celule detectate și cantitățile prezente din fiecare. Rezultatele pot fi raportate ca procente sau număr absolut și vor include detalii despre markerii exprimați. De exemplu, raportul poate preciza că un grup de celule este CD19-pozitiv, ceea ce ar sugera că sunt celule B.

• Interpretare – Patologul explică constatările. Acestea pot include un diagnostic (cum ar fi un anumit tip de leucemie sau limfom), un comentariu privind existența vreunei dovezi de recurență a bolii sau o recomandare pentru teste suplimentare.

• Grafică – Unele rapoarte includ diagrame de dispersie sau histograme pentru a arăta distribuția celulelor în probă. Aceste imagini ajută la vizualizarea modului în care celulele au fost grupate și identificate.

De ce este importantă citometria în flux?

Citometria în flux oferă informații care pot să nu fie vizibile cu colorațiile obișnuite, cum ar fi hematoxilină și eozină (H&E)Permite patologilor să identifice tipurile de celule, să clasifice cancerele mai precis și să detecteze boala reziduală minimă care ar putea să nu fie vizibilă cu alte metode. Este un instrument esențial în diagnosticarea modernă a cancerului, în special pentru cancerele hematologice (de sânge).

Întrebări de adresat medicului dumneavoastră

• De ce s-a efectuat citometria în flux în cazul meu?

• Ce tipuri de celule au fost găsite în probă?

• Rezultatele sugerează un diagnostic specific?

• Voi avea nevoie de teste suplimentare pe baza rezultatelor?

• Cum vor afecta aceste constatări planul meu de tratament?