Imunohistochimie (IHC): Definiție


imunohistochimie (adesea prescurtat IHC) este un test de laborator care patologi utilizate pentru a detecta proteine ​​specifice, cunoscute și sub numele de antigene, din celulele dintr-o probă de țesut. Prin evidențierea acestor proteine, patologii pot obține o mai bună înțelegere a tipurilor de celule prezente, a originii și a comportamentului lor. Aceste informații le permit medicilor să pună diagnostice precise, să prezică progresia unei boli și să selecteze cele mai eficiente tratamente.

Cum funcționează imunohistochimia?

Imunohistochimia utilizează substanțe chimice specializate cunoscute sub numele de anticorpi. Acești anticorpi pot recunoaște și se pot lega de proteine ​​specifice din proba de țesut. Odată ce un anticorp se leagă de proteina sa țintă, patologi o poate face vizibilă la microscop prin adăugarea unui colorant sau a unui marker fluorescent. Acest lucru facilitează vizualizarea locației proteinei în celule.

Care sunt etapele implicate în imunohistochimie?

  1. pregătirea unei mostreÎn primul rând, probele de țesut sunt obținute printr-o biopsie sau intervenții chirurgicale. Pentru a le conserva, specimenele sunt tratate cu o soluție specială, de obicei formalină, și apoi încorporate într-o substanță asemănătoare cerii numită parafină.

  2. SecționareaȚesutul conservat este tăiat în felii foarte subțiri (cu grosimea de aproximativ 4-5 micrometri) și plasat pe lame de microscop din sticlă, unde este pregătit pentru colorare.

  3. Deparafinizare și rehidratareCeara (parafina) este îndepărtată folosind substanțe chimice speciale, permițând colorarea eficientă a țesutului.

  4. Recuperarea antigenuluiUneori, proteinele (antigenele) se ascund în timpul preparării țesuturilor. Patologii tratează țesutul cu căldură sau enzime speciale pentru a reexpune aceste proteine, ceea ce le face mai ușor de găsit de către anticorpi.

  5. BlocareaPentru a se asigura că anticorpii se atașează doar de proteinele pentru care sunt destinați, patologii folosesc soluții proteice speciale pentru a bloca alte situsuri de legare nedorite.

  6. Incubarea anticorpilor primariLamele sunt acoperite cu un anticorp primar care se atașează specific de proteina de interes.

  7. DetectareDupă spălarea oricărui exces de anticorp primar, se aplică un anticorp secundar. Acest al doilea anticorp se lipește de anticorpul primar și conține fie o enzimă, fie un marker fluorescent. Când este activat, produce culoare sau lumină fluorescentă, dezvăluind locația exactă a proteinei țintă.

  8. ContracolorareaPentru a ajuta patologii să vadă clar structura țesutului, se utilizează o colorare de fundal ușoară (adesea hematoxilină, care colorează celulele). nuclee albastru).

  9. Montare și vizualizareÎn final, lamele sunt acoperite cu o lamelă subțire și examinate la microscop. Patologii notează modelele, intensitatea și locația colorării pentru a interpreta rezultatele.

De ce este importantă imunohistochimia?

Imunohistochimia este extrem de valoroasă deoarece ajută patologii să diagnosticheze cu precizie bolile. Aceasta poate distinge între diferite tipuri de celule canceroase, poate identifica infecțiile și poate diferenția bolile care arată similar la microscop. În plus, prin identificarea proteinelor specifice, medicii pot determina cele mai eficiente opțiuni de tratament, inclusiv terapii țintite.

Ce înseamnă diferite modele de colorare?

Când patologii examinează lamele imunohistochimice, aceștia examinează îndeaproape distribuția proteinelor în celule. Există trei modele principale: expresia nucleară, expresia citoplasmatică și expresia membranoasă. Fiecare este explicat mai detaliat mai jos.

imunohistochimie

Expresia nucleară

Expresia nucleară (cunoscută și sub denumirea de reactivitate nucleară) se referă la colorarea localizată în nucleu celulei, unde este stocat materialul genetic, cum ar fi ADN-ul. Proteinele găsite în nucleu sunt adesea implicate în reglarea creșterii și comportamentului celular. De exemplu, receptor de estrogen (ER), o proteină importantă în deciziile privind tratamentul cancerului de sân, apare sub formă de colorare nucleară. Identificarea colorării nucleare îi ajută pe medici să diagnosticheze anumite tipuri de cancer și să determine tratamentele adecvate, cum ar fi terapia hormonală.

Expresia citoplasmatică

Expresia citoplasmatică (cunoscută și sub numele de reactivitate citoplasmatică) are loc în citoplasma, zona din jurul celulei nucleu care conține multe structuri și enzime importante. Proteinele găsite aici joacă de obicei un rol în metabolism, oferă suport structural sau facilitează semnalizarea internă. Un exemplu de colorare citoplasmatică este prezența citocheratine—proteine ​​care se găsesc în celulele care căptușesc multe părți ale corpului. Acest tip de colorare ajută la identificarea originii celulelor, la diagnosticarea anumitor tipuri de cancer sau la detectarea infecțiilor.

Expresia membranoasă

Expresia membranoasă (cunoscută și sub numele de reactivitate membranară) evidențiază proteinele situate pe suprafața sau membrana celulei, ceea ce ajută celulele să comunice între ele și cu mediul înconjurător. Un exemplu binecunoscut este HER2 proteină în anumite tipuri de cancer la sân, care se caracterizează printr-un model distinct de colorare membranosă. Identificarea proteinelor membranose este crucială deoarece poate ghida terapii țintite, ajutând medicii să selecteze tratamente adaptate tipului specific de cancer al pacientei.

Înțelegerea acestor modele de expresie îi ajută pe patologi să ofere diagnostice precise, să prezică mai bine modul în care pot evolua bolile și să recomande tratamente eficiente.

A+ A A-