Hibridarea in situ (ISH)

Ce este hibridizarea in situ?

Hibridizarea in situ (ISH) este un test de laborator utilizat pentru a vedea materialul genetic, cum ar fi ADN sau ARN, în celule sau țesuturi. Este folosit în mod obișnuit în medicină pentru a identifica și vizualiza anumite gene sau produse genetice și pentru a detecta agenți infecțioși, cum ar fi viruși.

Cum funcționează hibridizarea in situ?

ISH implică utilizarea unei mici piese etichetate de material genetic (o sondă de acid nucleic) care este complementară (opusă) materialului genetic țintă. Sonda poate fi combinată cu diferite tipuri de etichete, cum ar fi coloranți fluorescenți, izotopi radioactivi sau enzime, care permit sondei să fie văzută în interiorul celulelor.

Pentru a efectua ISH, o probă de țesut este mai întâi fixată și procesată pentru a-și păstra structura și a o pregăti pentru hibridizare. Țesutul este apoi incubat cu sonda marcată, care se atașează (hibridizează) de materialul genetic țintă dacă este prezent. Sonda rămasă este apoi spălată, iar combinațiile rămase sondă-țintă sunt detectate folosind una dintre mai multe metode.

Care sunt diferitele tipuri de hibridizare in situ?

Există mai multe tipuri diferite de tehnici ISH, inclusiv hibridizare fluorescentă in situ (FISH), hibridizare cromogenă in situ (CISH) și hibridizare in situ ARN (ISH-ARN). FISH și CISH folosesc etichete fluorescente sau cromogene, respectiv, pentru a vizualiza locația materialului genetic țintă, în timp ce ISH-ARN detectează în mod specific moleculele de ARN din celule sau țesuturi.