Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH)

29 августа 2023

Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) — это лабораторный тест, используемый в патологии для обнаружения и локализации присутствия или отсутствия определенных последовательностей ДНК на хромосомах. Он работает за счет использования флуоресцентных зондов, которые связываются только с теми частями хромосомы, которые соответствуют зонду или дополняют его. Его обычно используют при диагностике рака и некоторых генетических синдромов.

Как работает флуоресцентная гибридизация in situ?

1. Подготовка зонда: флуоресцентный зонд предназначен для соответствия конкретной интересующей последовательности ДНК. Затем этот зонд помечают флуоресцентным красителем. Разные зонды можно пометить разными красителями для одновременного обнаружения нескольких целей.
2. Подготовка образца: ДНК в образце (например, клетках из образца крови, биопсии или срезов тканей) денатурируется, то есть нагревается для разделения двухцепочечной ДНК на одиночные нити.
3. Гибридизация: флуоресцентно-меченный зонд наносится на образец, где он ищет и связывается (гибридизирует) с комплементарной последовательностью ДНК в геноме.
4. Промывка: После гибридизации образец промывают, чтобы удалить излишки зонда, не связавшиеся с целевой ДНК. Этот шаг помогает уменьшить фоновый сигнал и повысить специфичность обнаружения.
5. Обнаружение: Образец исследуют под флуоресцентным микроскопом. Зонды, связавшиеся с определенными последовательностями ДНК, будут флуоресцировать, и их местоположение можно будет визуализировать и проанализировать.

Почему проводится этот тест?

Способность флуоресцентной гибридизации in situ предоставлять точную генетическую информацию на клеточном уровне делает ее бесценным инструментом в диагностике и лечении рака и генетических заболеваний.

• Обнаружение хромосомных аномалий: FISH может идентифицировать специфические генетические мутации, делеции, дупликации и транслокации, связанные с различными генетическими заболеваниями и состояниями, включая рак. Например, его широко используют для обнаружения филадельфийской хромосомы при хроническом миелолейкозе (ХМЛ), специфической транслокации между хромосомами 9 и 22.
• Диагностика и прогноз рака. Выявляя генетические изменения, характерные для определенных типов рака, FISH помогает диагностировать заболевание, определять его прогноз и выбирать подходящее лечение. Например, он используется для обнаружения HER2 / Neu усиление рака молочной железы, что может повлиять на решения о лечении.
• Генетические заболевания: FISH используется для диагностики генетических заболеваний, таких как синдром Дауна, путем обнаружения наличия дополнительной копии хромосомы 21.

Об этой статье

Врачи написали эту статью, чтобы помочь вам прочитать и понять отчет о патологии. Свяжитесь с нами если у вас есть вопросы по поводу этой статьи или отчета о патологии. Полную информацию об отчете о патологии см. этой статье.

Другие полезные ресурсы

Атлас патологии