Иммуногистохимия (ИГХ)


Иммуногистохимия (часто сокращенно IHC) — это лабораторный тест, который патологи используется для обнаружения определенных белков, также известных как антигены, в клетках образца ткани. Выделяя эти белки, патологи могут лучше понять типы присутствующих клеток, их происхождение и поведение. Эта информация позволяет врачам ставить точные диагнозы, прогнозировать прогрессирование заболевания и выбирать наиболее эффективные методы лечения.

Как работает иммуногистохимия?

Иммуногистохимия использует специализированные химикаты, известные как антитела. Эти антитела могут распознавать и связываться с определенными белками в образце ткани. Как только антитело связывается с целевым белком, патологи можно сделать его видимым под микроскопом, добавив краситель или флуоресцентный маркер. Это позволяет легко визуализировать расположение белка внутри клеток.

Каковы этапы иммуногистохимии?

  1. Базовые приготовления: Сначала образцы тканей получают с помощью биопсия или хирургия. Для сохранения образцы обрабатывают специальным раствором, обычно формалином, а затем заливают воскоподобным веществом, называемым парафином.

  2. секционирование: Консервированную ткань нарезают на очень тонкие ломтики (толщиной примерно 4–5 микрометров) и помещают на предметные стекла микроскопа, где ее готовят к окрашиванию.

  3. Депарафинизация и регидратация: Воск (парафин) удаляется с помощью специальных химикатов, что позволяет эффективно окрашивать ткани.

  4. Извлечение антигена: Иногда белки (антигены) становятся скрытыми во время подготовки ткани. Патологи обрабатывают ткань теплом или специальными ферментами, чтобы снова раскрыть эти белки, что облегчает их обнаружение антителами.

  5. блокирование: Чтобы гарантировать, что антитела прикрепляются только к нужным им белкам, патологи используют специальные белковые растворы, чтобы блокировать другие нежелательные участки связывания.

  6. Инкубация первичных антител: Слайды покрыты первичным антителом, которое специфически связывается с интересующим белком.

  7. обнаружение: После смывания избытка первичного антитела наносится вторичное антитело. Это второе антитело прилипает к первичному антителу и несет либо фермент, либо флуоресцентный маркер. При активации оно производит цвет или флуоресцентный свет, показывая точное местоположение целевого белка.

  8. Контрастное окрашивание: Чтобы помочь патологам четко увидеть структуру ткани, можно использовать слабое фоновое окрашивание (часто гематоксилином, который окрашивает клетки). ядра синий) добавлен.

  9. Монтаж и визуализация: Наконец, слайды покрываются тонким покровным стеклом и изучаются под микроскопом. Патологи отмечают закономерности, интенсивность и место окрашивания для интерпретации результатов.

Почему иммуногистохимия важна?

Иммуногистохимия чрезвычайно ценна, поскольку она помогает патологам точно диагностировать заболевания. Она может различать различные типы раковых клеток, определять инфекции и дифференцировать заболевания, которые выглядят похожими под микроскопом. Кроме того, идентифицируя определенные белки, врачи могут определять наиболее эффективные варианты лечения, включая целевые терапии.

Что означают различные схемы окрашивания?

Когда патологи изучают иммуногистохимические слайды, они внимательно изучают распределение белков внутри клеток. Существует три основных паттерна: ядерная экспрессия, цитоплазматическая экспрессия и мембранная экспрессия. Каждый из них более подробно описан ниже.

Иммуногистохимия

Ядерное выражение

Ядерная экспрессия (также известная как ядерная реактивность) относится к окрашиванию, которое находится в ядро клетки, где хранится генетический материал, такой как ДНК. Белки, находящиеся в ядре, часто участвуют в регуляции роста и поведения клеток. Например, рецептор эстрогена (ER), белок, важный для принятия решений о лечении рака груди, появляется в виде ядерного окрашивания. Определение ядерного окрашивания помогает врачам диагностировать определенные виды рака и определять соответствующие методы лечения, такие как гормональная терапия.

Цитоплазматическая экспрессия

Цитоплазматическая экспрессия (также известная как цитоплазматическая реактивность) происходит в цитоплазма, область вокруг клетки ядро который содержит много важных структур и ферментов. Белки, которые здесь встречаются, обычно играют роль в метаболизме, обеспечивают структурную поддержку или способствуют внутренней сигнализации. Примером цитоплазматического окрашивания является наличие цитокератины— белки, обнаруженные в клетках, выстилающих многие части тела. Этот тип окрашивания помогает определить происхождение клеток, диагностировать определенные типы рака или обнаружить инфекции.

Мембранозное выражение

Мембранная экспрессия (также известная как мембранная реактивность) выделяет белки, расположенные на поверхности клетки или мембране, что помогает клеткам общаться друг с другом и с окружающей средой. Известным примером является HER2 белок в некоторых видах рака груди, который характеризуется отчетливым мембранным рисунком окрашивания. Идентификация мембранных белков имеет решающее значение, поскольку она может направлять целевую терапию, помогая врачам выбирать лечение, адаптированное к конкретному типу рака у пациента.

Понимание этих моделей проявления помогает патологам ставить точные диагнозы, лучше прогнозировать развитие заболеваний и рекомендовать эффективные методы лечения.

A+ A A-