Fluorescenčná in situ hybridizácia (FISH)


Augusta 29, 2023

Fluorescenčná in situ hybridizácia (FISH) je laboratórny test používaný v patológii na detekciu a lokalizáciu prítomnosti alebo neprítomnosti špecifických sekvencií DNA na chromozómoch. Funguje tak, že používa fluorescenčné sondy, ktoré sa viažu len na tie časti chromozómu, ktoré sa zhodujú so sondou alebo sú k nej komplementárne. Bežne sa používa pri diagnostike rakoviny a určitých genetických syndrómov.

Ako funguje fluorescenčná in situ hybridizácia?

  1. Príprava sondy: Fluorescenčná sonda je navrhnutá tak, aby zodpovedala špecifickej požadovanej sekvencii DNA. Táto sonda sa potom označí fluorescenčným farbivom. Rôzne sondy môžu byť označené rôznymi farbivami na detekciu viacerých cieľov súčasne.
  2. Príprava vzorky: DNA vo vzorke (ako sú bunky zo vzorky krvi, biopsie alebo tkanivových rezov) je denaturovaná, čo znamená, že sa zahrieva, aby sa dvojvláknová DNA rozdelila na jednotlivé vlákna.
  3. Hybridizácia: Fluorescenčne značená sonda sa aplikuje na vzorku, kde vyhľadá a naviaže (hybridizuje) svoju komplementárnu sekvenciu DNA v rámci genómu.
  4. Premytie: Po hybridizácii sa vzorka premyje, aby sa odstránila nadbytočná sonda, ktorá sa nenaviazala na svoju cieľovú DNA. Tento krok pomáha znížiť signál pozadia a zlepšiť špecifickosť detekcie.
  5. Detekcia: Vzorka sa skúma pod fluorescenčným mikroskopom. Sondy, ktoré sa naviazali na špecifické sekvencie DNA, budú fluoreskovať a ich umiestnenie môže byť vizualizované a analyzované.

Prečo sa tento test vykonáva?

Schopnosť fluorescenčnej in situ hybridizácie poskytovať presné genetické informácie na bunkovej úrovni z nej robí neoceniteľný nástroj v diagnostike a manažmente rakoviny a genetických chorôb.

  • Detekcia chromozomálnych abnormalít: FISH dokáže identifikovať špecifické genetické mutácie, delécie, duplikácie a translokácie spojené s rôznymi genetickými chorobami a stavmi vrátane rakoviny. Napríklad sa široko používa na detekciu chromozómu Philadelphia pri chronickej myeloidnej leukémii (CML), špecifickej translokácii medzi chromozómami 9 a 22.
  • Diagnostika a prognóza rakoviny: Identifikáciou genetických zmien špecifických pre určité typy rakoviny pomáha FISH pri diagnostike choroby, určovaní jej prognózy a výbere vhodných terapií. Používa sa napríklad na detekciu HER2/neu amplifikácie pri rakovine prsníka, čo môže ovplyvniť rozhodnutia o liečbe.
  • Genetické ochorenia: FISH sa používa pri diagnostike genetických stavov, ako je Downov syndróm, detekciou prítomnosti extra kópie chromozómu 21.
Fluorescenčná hybridizácia in situ
Fluorescenčná in situ hybridizácia (FISH). Sondy sú viditeľné ako zelené a červené bodky v modrom jadre bunky.

O tomto článku

Lekári napísali tento článok, aby vám pomohol prečítať a pochopiť vašu správu o patológii. Kontaktujte nás ak máte otázky týkajúce sa tohto článku alebo správy o vašej patológii. Ak chcete získať úplný úvod do správy o vašej patológii, prečítajte si tento článok.

Ďalšie užitočné zdroje

Atlas patológie
A+ A A-