Čo je hematoxylín a eozín (H&E)?

Hematoxylín a eozín (H&E) sú dve špeciálne farbivá, ktoré patológov používajú sa na farbenie vzoriek tkaniva, čo umožňuje ich vyšetrenie pod mikroskopom. Keď sa tkanivo odoberie z tela počas biopsie alebo chirurgického zákroku, spracuje sa a umiestni na sklenené podložné sklíčka na mikroskopické vyhodnotenie. Bez farbenia sa však tkanivo javí takmer bezfarebné a detaily buniek a štruktúr je ťažké vidieť.

Farbenie hematoxylínom a eozínom pridáva farbu a kontrast, čo patológovi uľahčuje vizualizáciu organizácie tkaniva a identifikáciu akýchkoľvek príznakov ochorenia. Hematoxylín a eozín sú najbežnejším farbivom používaným v patológii a často sú prvým krokom pri vyšetrení akejkoľvek vzorky tkaniva.

Ako hematoxylín a eozín farbia tkanivo?

Hematoxylín a eozín spolupracujú na farbení rôznych častí buniek dvoma odlišnými farbami, čím vytvárajú kontrast medzi bunkovými štruktúrami:

• Hematoxylín farbí jadro bunky modrú alebo fialovú farbu. Jadro obsahuje bunkovú DNA, ktorá riadi fungovanie a delenie bunky.

• Eozín farbí cytoplazma (časť bunky mimo jadra) a ďalšie podporné tkanivové štruktúry ružovou alebo červenou farbou. Eozín zvýrazňuje bielkoviny, spojivové tkanivo a bunkové membrány.

Kombináciou týchto škvŕn môžu patológovia vidieť veľkosť, tvar a usporiadanie buniek a identifikovať rozdiely medzi normálnym a abnormálnym tkanivom.

Ako patológovia používajú hematoxylín a eozín?

Patológovia používajú farbenie hematoxylínom a eozínom na vyšetrenie vzoriek tkaniva pod mikroskopom a na identifikáciu príznakov ochorenia alebo poranenia. Tieto dve farbivá poskytujú dôležitý kontrast medzi rôznymi časťami bunky, čo uľahčuje hodnotenie ich štruktúry a funkcie.

• Hematoxylín, ktorý farbí jadro modrá alebo fialová, je obzvlášť užitočná na hodnotenie zmien veľkosti, tvaru a farby (chromatín vzor) jadra. Keďže jadro obsahuje genetický materiál bunky (DNA), zmeny jeho vzhľadu môžu patológom poskytnúť dôležité informácie o zdraví bunky vrátane príznakov poškodenia buniek, prekanceróznych zmien, rakoviny alebo vírusových infekcií.

• Eozín, ktorý farbí cytoplazma a okolité štruktúry ružové až červené, pomáha patológom posúdiť tvar, množstvo a textúru cytoplazmy, ako aj zmeny v spojivovom tkanive, svaloch alebo krvných cievach. Eozín je obzvlášť užitočný na identifikáciu oblastí bunkovej smrti, poškodenia tkaniva alebo abnormálneho hromadenia bielkovín.

Hematoxylín a eozín spolu umožňujú patológom vidieť celkovú organizáciu tkaniva, odhaliť abnormálny rast buniek a identifikovať vzorce ochorenia. Farbenie hematoxylínom a eozínom je často prvým a najdôležitejším krokom pri stanovení diagnózy a môžu po ňom nasledovať ďalšie testy pre podrobnejšie informácie.

Aké ďalšie testy sa používajú s hematoxylínom a eozínom?

Hoci hematoxylín a eozín poskytujú cenné informácie, niektoré stavy vyžadujú podrobnejšiu analýzu. V takýchto prípadoch môžu patológovia použiť ďalšie testy, ktoré pomôžu pri diagnostike alebo informujú o liečbe.

Imunohistochémia (IHC)

IHC používa protilátky, ktoré sa viažu na špecifické proteíny v tkanive. Tieto protilátky sú viazané na farbivá, ktoré umožňujú viditeľnosť určitých buniek alebo proteínov pod mikroskopom.

IHC sa bežne používa na:

• Identifikujte typ rakoviny (napríklad, či vznikla v pľúcach alebo prsníku).

• Zistite prítomnosť alebo neprítomnosť hormonálnych receptorov alebo nádorových markerov.

• Zistite, či sa rakovinové bunky rozšírili do lymfatické uzliny alebo iných orgánov.

Špeciálne škvrny

Tieto škvrny zvýrazňujú špecifické znaky, ktoré nie sú viditeľné len pri H&E.

Príklady zahŕňajú:

• Gramovo farbenie – používa sa na identifikáciu baktérií.

• PAS (kyselina jodistá – Schiff) – zvýrazňuje sacharidy, huby a hlien.

• GMS (Grocottov methenamín strieborný) – farbí huby na čierno.

• Ziehl-Neelsenovo farbenie – používa sa na detekciu tuberkulózy a iných acidorezistentných baktérií.

Molekulárne testy

Tieto testy skúmajú genetický materiál (DNA alebo RNA) v tkanive.

Molekulárne testovanie môže:

• Identifikujte špecifické mutácie, ktoré spôsobujú rakovinu.

• Detekcia preskupení alebo amplifikácií génov.

• Pomôcť pri výbere cielených terapií pre určité typy rakoviny.

Molekulárne testovanie sa často používa pri rakovine, ako je rakovina pľúc, rakovina štítnej žľazy a lymfóm, kde rozhodnutia o liečbe závisia od genetických nálezov.

Prečo je farbenie hematoxylínom a eozínom dôležité?

Farbenie H&E je základom patológie. Umožňuje patológom hodnotiť tkanivo spôsobom, ktorý je spoľahlivý, reprodukovateľný a nákladovo efektívny. Bez neho by bolo takmer nemožné vidieť dôležité detaily vo vzorke tkaniva. Hoci existujú novšie a pokročilejšie testy, takmer vždy vychádzajú zo zistení z pôvodného preparátu zafarbeného H&E.

Otázky, na ktoré sa opýtajte svojho lekára

• Čo ukázalo farbenie H&E vo vzorke môjho tkaniva?

• Boli po farbení H&E vykonané nejaké ďalšie testy?

• Potrebujem ďalšie vyšetrenia na potvrdenie diagnózy?

• Čo znamenajú výsledky pre moju liečbu?