In situ hybridisering (ISH)

Vad är hybridisering in situ?

In situ hybridisering (ISH) är ett laboratorietest som används för att se genetiskt material, såsom DNA eller RNA, i celler eller vävnader. Det används ofta inom medicin för att identifiera och visualisera specifika gener eller genprodukter och för att upptäcka smittämnen som t.ex. virus.

Hur fungerar in situ hybridisering?

ISH innebär att man använder en liten märkt bit genetiskt material (en nukleinsyrasond) som är komplementär (motsatsen) till det genetiska målmaterialet. Sonden kan kombineras med olika typer av märkningar, såsom fluorescerande färgämnen, radioaktiva isotoper eller enzymer, som gör att sonden kan ses inuti celler.

För att utföra ISH fixeras och bearbetas först ett vävnadsprov för att bevara dess struktur och förbereda det för hybridisering. Vävnaden inkuberas sedan med den märkta sonden, som fäster (hybridiserar) till det genetiska målmaterialet om det finns närvarande. Den överblivna sonden tvättas sedan bort och de återstående sond-målkombinationerna detekteras med en av flera metoder.

Vilka är de olika typerna av in situ hybridisering?

Det finns flera olika typer av ISH-tekniker, inklusive fluorescerande in situ hybridisering (FISH)kromogen in situ hybridisering (CISH) och RNA in situ hybridisering (ISH-RNA). FISH och CISH använder fluorescerande respektive kromogena märkningar för att visualisera platsen för det genetiska målmaterialet, medan ISH-RNA specifikt detekterar RNA-molekyler i celler eller vävnader.