Immunohistokemia (IHC)

Immunohistokemia (IHC) ni uchunguzi wa kimaabara unaotumika sana ambao unahusisha matumizi ya kingamwili ili kugundua antijeni maalum (protini) katika seli ndani ya sehemu za tishu. Wanapatholojia hutumia jaribio hili kuona usambazaji na ujanibishaji wa protini mahususi ndani ya sehemu tofauti za tishu, na hivyo kutoa taarifa muhimu za uchunguzi, ubashiri na ubashiri.

Je, immunohistochemistry inafanya kazi gani?

Kanuni ya immunohistochemistry inategemea uhusiano maalum wa kisheria kati ya antibody na antijeni yake. Kingamwili kimeundwa kulenga na kuunganisha kwa protini maalum ya riba ndani ya sampuli ya tishu. Mara baada ya kufungwa, mwingiliano huu unaonyeshwa kwa kutumia mfumo wa kutambua, na kusababisha mawimbi ya rangi au ya umeme ambayo yanaweza kuonekana kwa darubini.

Hatua zinazohusika katika immunohistochemistry

1. Maandalizi ya sampuli: Vielelezo vya tishu hukusanywa, mara nyingi kupitia biopsy au upasuaji resection, na kisha fasta ili kuhifadhi usanifu wa tishu. Formalin ni kiboreshaji kinachotumiwa sana. Kitambaa kinawekwa kwenye nta ya mafuta ya taa ili kuwezesha kugawanyika.
2. Kutenganisha: Kizuizi cha tishu kilichopachikwa kwenye mafuta ya taa hukatwa katika sehemu nyembamba (kawaida ni unene wa mikromita 4-5) kwa kutumia microtome. Sehemu hizi zimewekwa kwenye slaidi za darubini ili kuchafua.
3. Uondoaji wa parafini na urejeshaji maji mwilini: slaidi hutibiwa ili kuondoa mafuta ya taa na kurejesha maji kwenye tishu, kwa kawaida kwa kutumia zilini (au mbadala) ikifuatiwa na alkoholi za daraja.
4. Urejeshaji wa antijeni: Antijeni nyingi hufunika nyuso wakati wa mchakato wa kurekebisha. Urejeshaji wa antijeni huhusisha kutibu sehemu hizo kwa joto au vimeng'enya ili kufichua tovuti hizi za antijeni, na kuzifanya kufikiwa na kingamwili.
5. Kuzuia: Tovuti zisizo maalum za kuunganisha zimezuiwa kwa kutumia suluhu ya protini ili kuzuia kingamwili ya msingi isijifunge bila mahususi, jambo ambalo linaweza kusababisha matokeo chanya ya uwongo.
6. Ualetishaji wa kingamwili msingi: slaidi inaingizwa na kingamwili msingi ambayo ni mahususi kwa antijeni inayokuvutia. Hatua hii huruhusu kingamwili kujifunga kwa antijeni inayolengwa kwenye tishu.
7. Ugunduzi: Baada ya kuosha kingamwili yoyote ya msingi isiyofungwa, kingamwili ya pili huongezwa. Kingamwili hiki kimeunganishwa na kimeng'enya (kama vile peroxidase ya farasi au phosphatase ya alkali) au lebo ya fluorescent na imeundwa kushikamana na kingamwili msingi. Uwepo wa kingamwili ya sekondari huonyeshwa kwa njia ya mmenyuko wa rangi (katika kesi ya kingamwili zilizounganishwa na enzyme) au fluorescence (katika kesi ya antibodies zilizo na alama za fluorescent). Kwa utambuzi wa rangi, substrate huongezwa kuwa kimeng'enya hubadilika kuwa bidhaa inayoonekana, yenye rangi kwenye tovuti ya mwingiliano wa antijeni-antibody.
8. Kuzuia: Ili kuboresha taswira ya usanifu wa tishu, kikwazo kidogo (kwa mfano, hematoksilini) hutumiwa kwa slaidi, seli inayotia madoa. viini yenye rangi tofauti.
9. Kuweka na kuibua: slaidi inafunikwa na kifuniko, na tishu zilizo na madoa huchunguzwa kwa darubini nyepesi au fluorescent. Ujanibishaji, ukubwa, na muundo wa upakaji madoa hutoa maarifa kuhusu kuwepo na usambazaji wa antijeni ndani ya tishu.

matumizi

Immunohistochemistry ni muhimu katika uchunguzi wa ugonjwa wa kutambua aina na asili ya seli za saratani, kutambua magonjwa ya kuambukiza, na kutofautisha kati ya hali zinazofanana.

Kupitia uwezo wake wa kutambua hasa protini ndani ya usanifu tata wa tishu, immunohistokemia imekuwa chombo cha lazima katika ugonjwa, kuathiri kwa kiasi kikubwa uchunguzi, ubashiri, na maendeleo ya matibabu yaliyolengwa.

Mifumo ya kujieleza katika immunohistochemistry

Katika immunohistochemistry, mifumo ya kuchafua-nyuklia, cytoplasmic, na membranous-inarejelea ujanibishaji wa antijeni (protini) ndani ya sehemu tofauti za seli. Kila muundo hutoa maarifa muhimu katika kazi ya protini na aina ya seli inayoonyesha protini.

Usemi wa nyuklia

Usemi wa nyuklia hutokea wakati rangi ya IHC inapowekwa kwenye seli kiini, ambapo awali ya DNA na RNA hutokea, na protini nyingi za udhibiti ziko. Mifano ya protini zinazoonyesha usemi wa nyuklia ni pamoja na vipengele vya unukuzi, vipokezi vya nyuklia na protini zinazohusika katika urudufishaji na urekebishaji wa DNA. Kwa mfano, kipokezi cha estrojeni (ER) katika seli za saratani ya matiti huonyesha madoa ya nyuklia kwa sababu hufanya kazi kama kipengele cha manukuu ambacho hudhibiti usemi wa jeni.

Madoa ya nyuklia ni muhimu katika kugundua magonjwa ambayo yanahusisha mabadiliko katika usemi wa jeni au udhibiti wa mzunguko wa seli. Ni muhimu hasa katika saratani ambapo kuwepo au kutokuwepo kwa protini za nyuklia, kama vile vipokezi vya homoni, kunaweza kuongoza maamuzi ya matibabu.

Usemi wa Cytoplasmic

Usemi wa cytoplasmic huzingatiwa wakati uchafu unasambazwa kote saitoplazimu, sehemu ya seli inayozunguka kiini na ina organelles mbalimbali na cytoskeleton.
Mifano ya protini zinazoonyesha usemi wa cytoplasmic ni pamoja na vimeng'enya, protini za miundo, na molekuli fulani za kuashiria. Mfano ni pamoja na cytokeratins, ambayo ni protini za nyuzi za kati zinazopatikana katika saitoplazimu ya seli za epithelial.

Madoa ya cytoplasmic husaidia kutambua seli zinazozalisha protini maalum zinazohusika katika kimetaboliki, ishara, au muundo wa seli. Taarifa hii inaweza kuwa muhimu kwa ajili ya kuchunguza na kuainisha uvimbe, kuelewa magonjwa ya kimetaboliki, na kutambua mawakala wa kuambukiza.

Usemi wa Membranous

Usemi wa utando hurejelea uwekaji madoa ambao umejanibishwa kwenye utando wa seli, mpaka unaotenganisha seli na mazingira yake ya nje na kupatanisha mawasiliano na seli nyingine na tumbo la nje ya seli. Mifano ya protini zinazoonyesha usemi wa utando ni pamoja na vipokezi vya utando, visafirishaji, na molekuli za kushikamana kwa seli. Mfano unaojulikana ni HER2/neu kujieleza kupita kiasi katika baadhi ya saratani za matiti, ambapo protini ya HER2 hugunduliwa kama muundo wa madoa wa utando.

Udoa wa utando ni muhimu sana kwa kutambua seli zinazojibu mawimbi ya nje ya seli au zinazohusika katika mwingiliano wa seli-seli au tumbo la seli. Katika oncology, uwepo wa protini maalum za membrane zinaweza kuonyesha ukali wa tumor na uwezekano wake kwa matibabu yaliyolengwa.

Kuelewa mifumo hii ya kujieleza ni msingi katika matumizi ya immunohistochemistry katika ugonjwa wa uchunguzi. Inawawezesha wanapatholojia kufanya uchunguzi sahihi, kuelewa pathophysiolojia ya magonjwa, na kuwajulisha mikakati ya matibabu. Kwa mfano, kuamua uwepo wa ER (usemi wa nyuklia) na HER2 (usemi wa utando) katika seli za saratani ya matiti ni muhimu kwa kuamua juu ya tiba ya homoni na tiba inayolengwa, mtawalia.

Alama za kawaida za immunohistochemical

CD34

Cytokeratin 7 (CK7)

Cytokeratin 20 (CK20)

Desmin

Kipokezi cha Estrojeni (ER)

GATA-3

Ki-67

MIB-1

p16

p63

p53

p40

Kipokezi cha progesterone (PR)

S100

SOX-10

TTF-1

Kuhusu makala hii

Madaktari waliandika nakala hii ili kukusaidia kusoma na kuelewa ripoti yako ya ugonjwa. Wasiliana nasi ikiwa una maswali kuhusu nakala hii au ripoti yako ya ugonjwa. Kwa utangulizi kamili wa ripoti yako ya ugonjwa, soma makala hii.

Rasilimali nyingine zinazosaidia

Atlas ya patholojia