immunohistochemistry (มักย่อว่า IHC) คือการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่ นักพยาธิวิทยา ใช้เพื่อตรวจหาโปรตีนบางชนิด หรือที่เรียกว่าแอนติเจน ภายในเซลล์ในตัวอย่างเนื้อเยื่อ โดยการเน้นโปรตีนเหล่านี้ นักพยาธิวิทยาสามารถทำความเข้าใจเกี่ยวกับประเภทของเซลล์ที่มีอยู่ แหล่งที่มา และพฤติกรรมของเซลล์ได้ดีขึ้น ข้อมูลนี้ช่วยให้แพทย์สามารถวินิจฉัยโรคได้อย่างแม่นยำ คาดการณ์ความคืบหน้าของโรค และเลือกวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพสูงสุด
อิมมูโนฮิสโตเคมีทำงานอย่างไร?
อิมมูโนฮิสโตเคมีใช้สารเคมีเฉพาะทางที่เรียกว่าแอนติบอดี แอนติบอดีเหล่านี้สามารถจดจำและจับกับโปรตีนเฉพาะภายในตัวอย่างเนื้อเยื่อได้ เมื่อแอนติบอดีจับกับโปรตีนเป้าหมายแล้ว นักพยาธิวิทยา สามารถทำให้มองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยการเพิ่มสีย้อมหรือเครื่องหมายเรืองแสง ซึ่งจะทำให้มองเห็นตำแหน่งของโปรตีนภายในเซลล์ได้ง่าย
ขั้นตอนในการทำภูมิคุ้มกันเนื้อเยื่อมีอะไรบ้าง?
-
การเตรียมตัวอย่าง:ขั้นแรกให้เก็บตัวอย่างเนื้อเยื่อผ่าน ตรวจชิ้นเนื้อ หรือการผ่าตัด เพื่อรักษาตัวอย่างไว้ ตัวอย่างจะถูกบำบัดด้วยสารละลายพิเศษ ซึ่งโดยทั่วไปคือฟอร์มาลิน จากนั้นจึงฝังไว้ในสารคล้ายขี้ผึ้งที่เรียกว่าพาราฟิน
-
การแบ่งส่วน:เนื้อเยื่อที่เก็บรักษาไว้จะถูกตัดเป็นแผ่นบางๆ (หนาประมาณ 4-5 ไมโครเมตร) แล้ววางบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์แก้ว ซึ่งเตรียมไว้สำหรับการย้อมสี
-
การขจัดพาราฟินและการเติมน้ำกลับคืน:การกำจัดขี้ผึ้ง (พาราฟิน) โดยใช้สารเคมีพิเศษ ช่วยให้สามารถย้อมเนื้อเยื่อได้อย่างมีประสิทธิภาพ
-
การดึงแอนติเจน:บางครั้งโปรตีน (แอนติเจน) จะถูกซ่อนไว้ระหว่างการเตรียมเนื้อเยื่อ นักพยาธิวิทยาจะรักษาเนื้อเยื่อด้วยความร้อนหรือเอนไซม์พิเศษเพื่อเปิดเผยโปรตีนเหล่านี้อีกครั้ง ทำให้แอนติบอดีสามารถค้นหาได้ง่ายขึ้น
-
การปิดกั้น:เพื่อให้แน่ใจว่าแอนติบอดีจะจับกับโปรตีนที่ต้องการเท่านั้น นักพยาธิวิทยาจึงใช้สารละลายโปรตีนชนิดพิเศษเพื่อปิดกั้นตำแหน่งการจับที่ไม่ต้องการอื่นๆ
-
การฟักไข่แอนติบอดีขั้นต้น:สไลด์ถูกปกคลุมด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิที่จับกับโปรตีนที่สนใจโดยเฉพาะ
-
การตรวจพบ:หลังจากล้างแอนติบอดีปฐมภูมิส่วนเกินออกแล้ว แอนติบอดีทุติยภูมิจะถูกนำไปใช้ แอนติบอดีทุติยภูมิตัวที่สองจะเกาะติดกับแอนติบอดีปฐมภูมิและพกพาเอนไซม์หรือเครื่องหมายเรืองแสง เมื่อเปิดใช้งานแล้ว แอนติบอดีจะผลิตแสงสีหรือแสงเรืองแสงเพื่อเปิดเผยตำแหน่งที่แน่นอนของโปรตีนเป้าหมาย
-
การย้อมสี:เพื่อช่วยให้นักพยาธิวิทยาเห็นโครงสร้างเนื้อเยื่อได้ชัดเจน ให้ใช้สีพื้นหลังอ่อนๆ (มักเป็นสีเฮมาทอกซิลิน ซึ่งทำให้เซลล์มีสี) นิวเคลียส เพิ่มสีฟ้า) เข้าไป
-
การติดตั้งและการมองเห็นในที่สุด สไลด์จะถูกปิดด้วยแผ่นปิดบางๆ และตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ นักพยาธิวิทยาจะสังเกตรูปแบบ ความเข้มข้น และตำแหน่งของสีเพื่อตีความผล
เหตุใดภูมิคุ้มกันเนื้อเยื่อจึงมีความสำคัญ?
การตรวจภูมิคุ้มกันเนื้อเยื่อมีประโยชน์อย่างยิ่งเพราะช่วยให้พยาธิแพทย์วินิจฉัยโรคได้อย่างแม่นยำ สามารถแยกแยะระหว่างเซลล์มะเร็งแต่ละประเภท ระบุการติดเชื้อ และแยกโรคที่มีลักษณะคล้ายกันภายใต้กล้องจุลทรรศน์ นอกจากนี้ แพทย์ยังสามารถกำหนดทางเลือกการรักษาที่มีประสิทธิภาพสูงสุดได้ โดยการระบุโปรตีนเฉพาะ รวมถึงการบำบัดแบบกำหนดเป้าหมาย
รูปแบบการย้อมสีที่แตกต่างกันหมายถึงอะไร?
เมื่อนักพยาธิวิทยาตรวจสไลด์ภูมิคุ้มกันเนื้อเยื่อ พวกเขาจะตรวจสอบการกระจายตัวของโปรตีนภายในเซลล์อย่างใกล้ชิด มีรูปแบบหลัก 3 แบบ ได้แก่ การแสดงออกในนิวเคลียส การแสดงออกในไซโทพลาสซึม และการแสดงออกในเยื่อหุ้มเซลล์ แต่ละรูปแบบจะอธิบายโดยละเอียดเพิ่มเติมด้านล่าง
การแสดงออกทางนิวเคลียร์
การแสดงออกของนิวเคลียส (เรียกอีกอย่างว่าปฏิกิริยานิวเคลียร์) หมายถึงการย้อมสีที่เกิดขึ้นใน ส่วนกลาง ของเซลล์ ซึ่งเป็นที่เก็บสารพันธุกรรม เช่น DNA โปรตีนที่พบในนิวเคลียสมักเกี่ยวข้องกับการควบคุมการเจริญเติบโตและพฤติกรรมของเซลล์ ตัวอย่างเช่น ตัวรับเอสโตรเจน (ER)โปรตีนที่สำคัญในการตัดสินใจการรักษามะเร็งเต้านม ปรากฏอยู่ในรูปของการย้อมสีด้วยนิวเคลียส การระบุการย้อมสีด้วยนิวเคลียสช่วยให้แพทย์วินิจฉัยมะเร็งบางชนิดและกำหนดการรักษาที่เหมาะสม เช่น การบำบัดด้วยฮอร์โมน
การแสดงออกของไซโทพลาสซึม
การแสดงออกของไซโทพลาสซึม (เรียกอีกอย่างว่าปฏิกิริยาไซโทพลาสซึม) เกิดขึ้นใน พลาสซึม, บริเวณรอบ ๆ เซลล์ ส่วนกลาง ซึ่งประกอบด้วยโครงสร้างและเอนไซม์ที่สำคัญมากมาย โปรตีนที่พบในที่นี้โดยทั่วไปมีบทบาทในกระบวนการเผาผลาญ ให้การสนับสนุนโครงสร้าง หรืออำนวยความสะดวกในการส่งสัญญาณภายใน ตัวอย่างของการย้อมสีในไซโทพลาสซึม ได้แก่ การมีอยู่ของ ไซโตเคราติน—โปรตีนที่พบในเซลล์บุผิวหลายส่วนของร่างกาย การย้อมสีประเภทนี้ช่วยระบุแหล่งที่มาของเซลล์ วินิจฉัยมะเร็งชนิดเฉพาะ หรือตรวจจับการติดเชื้อ
การแสดงออกทางเมมเบรน
การแสดงออกผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ (เรียกอีกอย่างว่าปฏิกิริยาของเยื่อหุ้มเซลล์) เน้นโปรตีนที่อยู่บนพื้นผิวหรือเยื่อหุ้มเซลล์ ซึ่งช่วยให้เซลล์สื่อสารกันเองและกับสภาพแวดล้อม ตัวอย่างที่รู้จักกันดีคือ HER2 โปรตีนในมะเร็งเต้านมบางชนิด ซึ่งมีลักษณะเฉพาะคือมีรูปแบบการย้อมเมมเบรนที่ชัดเจน การระบุโปรตีนเมมเบรนเป็นสิ่งสำคัญ เพราะสามารถชี้นำการบำบัดแบบตรงจุดได้ ช่วยให้แพทย์เลือกการบำบัดที่เหมาะกับมะเร็งชนิดเฉพาะของผู้ป่วยได้
การทำความเข้าใจรูปแบบการแสดงออกเหล่านี้ช่วยให้นักพยาธิวิทยาวินิจฉัยได้แม่นยำ คาดการณ์การดำเนินไปของโรคได้ดีขึ้น และแนะนำการรักษาที่มีประสิทธิผล
เรามีความภูมิใจที่ได้เป็นพันธมิตรกับ:
