ทีมพจนานุกรมพยาธิวิทยา
April 5, 2023
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิด (ISH) เป็นการทดสอบในห้องปฏิบัติการที่ใช้เพื่อดูสารพันธุกรรม เช่น DNA หรือ RNA ภายในเซลล์หรือเนื้อเยื่อ มักใช้ในทางการแพทย์เพื่อระบุและแสดงภาพของยีนหรือผลิตภัณฑ์ยีนที่เฉพาะเจาะจง และเพื่อตรวจหาสารติดเชื้อ เช่น ไวรัส.
ISH เกี่ยวข้องกับการใช้สารพันธุกรรมชิ้นเล็กๆ ที่มีป้ายชื่อ (หัววัดกรดนิวคลีอิก) ซึ่งเป็นส่วนเสริม (ตรงข้าม) กับสารพันธุกรรมเป้าหมาย หัววัดสามารถใช้ร่วมกับฉลากประเภทต่างๆ เช่น สีย้อมเรืองแสง ไอโซโทปกัมมันตภาพรังสี หรือเอนไซม์ ซึ่งช่วยให้มองเห็นหัววัดภายในเซลล์ได้
ในการดำเนินการ ISH ตัวอย่างเนื้อเยื่อจะได้รับการแก้ไขและผ่านกระบวนการก่อนเพื่อรักษาโครงสร้างและเตรียมสำหรับการผสมพันธุ์ จากนั้นเนื้อเยื่อจะถูกบ่มด้วยโพรบที่ติดฉลาก ซึ่งจะติด (ผสม) กับสารพันธุกรรมเป้าหมายหากมีอยู่ จากนั้นหัววัดที่เหลือจะถูกชะล้างออกไป และชุดค่าผสมของหัววัด-เป้าหมายที่เหลือจะถูกตรวจพบโดยใช้หนึ่งในหลายวิธี
มีเทคนิค ISH หลายประเภท ได้แก่ การผสมพันธุ์เรืองแสงในแหล่งกำเนิด (FISH), การผสมพันธุ์แบบโครโมนิกในแหล่งกำเนิด (CISH) และ RNA ในการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิด (ISH-RNA) FISH และ CISH ใช้ฉลากเรืองแสงหรือโครโมเจนตามลำดับเพื่อให้เห็นภาพตำแหน่งของสารพันธุกรรมเป้าหมาย ในขณะที่ ISH-RNA ตรวจจับโมเลกุล RNA ภายในเซลล์หรือเนื้อเยื่อโดยเฉพาะ