İmmünohistokimya (IHC)


İmmünohistokimya (genellikle IHC olarak kısaltılır) bir laboratuvar testidir patologlar doku örneğindeki hücrelerde antijen olarak da bilinen belirli proteinleri tespit etmek için kullanılır. Bu proteinleri vurgulayarak, patologlar mevcut hücre tipleri, kökenleri ve davranışları hakkında daha iyi bir anlayış kazanabilirler. Bu bilgi, doktorların doğru teşhisler koymasını, bir hastalığın ilerlemesini tahmin etmesini ve en etkili tedavileri seçmesini sağlar.

İmmünhistokimya nasıl çalışır?

İmmünohistokimya, antikor olarak bilinen özel kimyasalları kullanır. Bu antikorlar, doku örneğindeki belirli proteinleri tanıyabilir ve onlara bağlanabilir. Bir antikor hedeflenen proteine ​​bağlandığında, patologlar Bir boya veya floresan işaretleyici ekleyerek mikroskop altında görünür hale getirebilirsiniz. Bu, proteinin hücreler içindeki yerini görselleştirmeyi kolaylaştırır.

İmmünohistokimyada hangi adımlar atılır?

  1. örnek hazırlama: İlk olarak, doku örnekleri bir biyopsi veya cerrahi. Bunları korumak için, örnekler genellikle formalin olan özel bir solüsyonla işlenir ve daha sonra parafin adı verilen mum benzeri bir maddeye gömülür.

  2. kesit: Korunan doku çok ince dilimler halinde (yaklaşık 4-5 mikron kalınlığında) kesilir ve boyama için hazırlandığı cam mikroskop lamlarına yerleştirilir.

  3. Deparafinizasyon ve rehidratasyon: Özel kimyasallar kullanılarak mum (parafin) uzaklaştırılır ve dokuya etkili bir boyama işlemi uygulanır.

  4. Antijen geri kazanımı: Bazen, proteinler (antijenler) doku hazırlığı sırasında gizlenir. Patologlar, bu proteinleri yeniden açığa çıkarmak için dokuyu ısı veya özel enzimlerle tedavi eder ve antikorların bulmasını kolaylaştırır.

  5. bloke etme:Patologlar, antikorların sadece hedeflenen proteinlere bağlanmasını sağlamak için, istenmeyen diğer bağlanma bölgelerini bloke etmek amacıyla özel protein solüsyonları kullanırlar.

  6. Birincil antikor inkübasyonu: Slaytlar, ilgili proteine ​​spesifik olarak bağlanan birincil antikor ile kaplanmıştır.

  7. Bulma: Fazla birincil antikor yıkandıktan sonra, ikincil bir antikor uygulanır. Bu ikinci antikor birincil antikora yapışır ve bir enzim veya floresan işaretleyici taşır. Etkinleştirildiğinde, hedef proteinin tam yerini ortaya çıkaran renk veya floresan ışık üretir.

  8. Zıt boyama: Patologların doku yapısını net bir şekilde görmelerine yardımcı olmak için, hafif bir arka plan boyası (genellikle hücreleri renklendiren hematoksilin) esaslar (mavi) eklendi.

  9. Montaj ve görselleştirme: Son olarak, slaytlar ince bir lamel ile kapatılır ve mikroskop altında incelenir. Patologlar sonuçları yorumlamak için boyama desenlerini, yoğunluğunu ve yerini not eder.

İmmünohistokimya neden önemlidir?

İmmünohistokimya, patologların hastalıkları doğru bir şekilde teşhis etmesine yardımcı olduğu için son derece değerlidir. Farklı kanser hücresi türlerini ayırt edebilir, enfeksiyonları belirleyebilir ve mikroskop altında benzer görünen hastalıkları ayırt edebilir. Ayrıca, doktorlar belirli proteinleri belirleyerek hedefli tedaviler de dahil olmak üzere en etkili tedavi seçeneklerini belirleyebilir.

Farklı boyama desenleri ne anlama geliyor?

Patologlar immünohistokimya slaytlarını incelediklerinde, hücreler içindeki proteinlerin dağılımını yakından incelerler. Üç ana desen vardır: nükleer ifade, sitoplazmik ifade ve membranöz ifade. Her biri aşağıda daha ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

İmmünohistokimya

Nükleer ifade

Nükleer ifade (nükleer reaktiflik olarak da bilinir), nükleer bölgede bulunan boyama anlamına gelir. çekirdek hücrenin, DNA gibi genetik materyalin depolandığı yer. Çekirdekte bulunan proteinler genellikle hücre büyümesini ve davranışını düzenlemede rol oynar. Örneğin, östrojen reseptörü (ER), meme kanseri tedavi kararlarında önemli bir protein, nükleer lekelenme olarak ortaya çıkar. Nükleer lekelenmenin belirlenmesi, doktorların belirli kanserleri teşhis etmesine ve hormon tedavisi gibi uygun tedavileri belirlemesine yardımcı olur.

Sitoplazmik ifade

Sitoplazmik ifade (sitoplazmik reaktivite olarak da bilinir) şu şekilde gerçekleşir: sitoplazma, hücrenin etrafındaki alan çekirdek birçok önemli yapı ve enzim içeren. Burada bulunan proteinler genellikle metabolizmada rol oynar, yapısal destek sağlar veya iç sinyallemeyi kolaylaştırır. Sitoplazmik boyamaya bir örnek, sitokeratinler—vücudun birçok bölümünü kaplayan hücrelerde bulunan proteinler. Bu tür boyama, hücrelerin kökenini belirlemeye, belirli kanser türlerini teşhis etmeye veya enfeksiyonları tespit etmeye yardımcı olur.

Membranöz ifade

Membranöz ifade (membran reaktivitesi olarak da bilinir), hücrelerin birbirleriyle ve çevreleriyle iletişim kurmasına yardımcı olan hücre yüzeyinde veya membranında bulunan proteinleri vurgular. İyi bilinen bir örnek şudur: HER2 Belirli meme kanserlerinde belirgin bir zarlı boyama deseniyle karakterize edilen protein. Zarlı proteinleri tanımlamak, hedefli tedavilere rehberlik edebileceği ve doktorların hastanın belirli kanser türüne göre uyarlanmış tedavileri seçmesine yardımcı olabileceği için önemlidir.

Bu ifade kalıplarını anlamak, patologların doğru tanılar koymasına, hastalıkların nasıl ilerleyebileceğini daha iyi tahmin etmesine ve etkili tedaviler önermesine yardımcı olur.

A+ A A-