Проточна цитометрія

Березня 4, 2023

У патології «потік» часто відноситься до проточної цитометрії, лабораторного тесту, який використовується для аналізу фізичних і хімічних характеристик рідин і тканин організму, таких як кров і кістковий мозок. Цей тест дозволяє проводити одночасний аналіз кількох фізичних та/або хімічних характеристик окремих клітин, що проходять через оптичний та/або електронний пристрій виявлення. Цей тест зазвичай використовується для діагностики та моніторингу раку крові, наприклад лімфома і лейкемії, хоча його також можна використовувати для багатьох інших захворювань.

Для чого проводиться проточна цитометрія?

• Підрахунок клітин: проточна цитометрія використовується для підрахунку та аналізу фізичних характеристик клітин, таких як розмір і складність. Деякі типи клітин, такі як вибухи не можна підрахувати за допомогою цього тесту.
• Виявлення біомаркерів: метод ідентифікує та кількісно визначає специфічні біомаркери на поверхні або всередині клітин, що є вирішальним для діагностики захворювань.
• Діагностика та моніторинг захворювань: він важливий для діагностики раку крові, імунодефіциту та інфекційних захворювань шляхом аналізу властивостей клітин крові. Flow також використовується для моніторингу ефектів лікування та виявлення рецидиву хвороби.
• Імунофенотипування: це процес ідентифікації присутності та кількості певних типів клітин у зразку, необхідний для діагностики конкретних типів лейкемії та лімфома, а також моніторинг інфекційних захворювань, таких як ВІЛ.

Як проводиться проточна цитометрія?

1. Підготовка зразка: зразок, що містить клітини, такі як кров, кістковий мозок або тканинні лізати, готують шляхом суспендування клітин у буферному розчині. Клітини можуть бути забарвлені флуоресцентними барвниками або антитілами, поміченими флуоресцентними маркерами, які зв’язуються зі специфічними клітинними компонентами або маркерами.
2. Проведення зразка: підготовлений зразок поміщають у проточний цитометр. Машина використовує рідинну систему для втягування зразка у вузький, гідродинамічно сфокусований потік рідини. Клітини вирівнюються так, що вони проходять через лазерний промінь по черзі.
3. Виявлення: коли клітини проходять через лазер, вони розсіюють світло, а флуоресцентні маркери збуджуються та випромінюють світло на різних довжинах хвиль. Детектори вловлюють це світло (як розсіяне, так і випущену флуоресценцію) і перетворюють його на електричні сигнали.
4. Аналіз: дані, зібрані проточним цитометром, аналізуються за допомогою спеціального програмного забезпечення. Властивості кожної клітинки можна візуалізувати на графіках або гістограмах, що дає змогу аналізувати від тисяч до мільйонів клітинок за короткий проміжок часу.

Як результати цього тесту описуються у звіті про патологію?

Результати проточної цитометрії у звіті про патологію зазвичай описуються детально та структуровано, зосереджуючись на конкретних характеристиках і популяціях клітин, проаналізованих під час тесту. Зміст і формат звіту можуть відрізнятися залежно від мети тесту, типу аналізованого зразка та конкретного захворювання або стану, що досліджується. Однак більшість звітів проточної цитометрії включатимуть такі ключові елементи:

• Інформація про зразок: подробиці про досліджуваний зразок, включаючи тип зразка (наприклад, кров, кістковий мозок, тканина лімфатичних вузлів), дату збору та будь-яку відповідну інформацію про пацієнта.
• Методологія: короткий опис використовуваного методу проточної цитометрії, включаючи інформацію про підготовку клітин, протоколи фарбування та типи застосованих флуоресцентних маркерів (антитіл).
• Панель маркерів: список перевірених специфічних маркерів клітинної поверхні (антигенів) та/або внутрішньоклітинних маркерів разом із використаними флуоресцентними мітками. Цей розділ містить уявлення про цілі аналізу, які є критичними для ідентифікації конкретних популяцій клітин.
• Результати: це основний розділ звіту, який представляє результати аналізу проточної цитометрії. Результати часто подаються у вигляді відсотків або абсолютної кількості клітин, що експресують специфічні маркери, що вказує на присутність і частку різних типів клітин у зразку. Наприклад, у контексті лейкемії чи лімфоми у звіті буде детально описаний імунофенотип злоякісних клітин, як-от CD19+ В-клітини or CD3+ Т-клітини, і їх частка відносно всієї аналізованої популяції клітин.
• Інтерпретація: патологоанатом забезпечує інтерпретацію результатів, пояснюючи, що означають результати в контексті клінічної картини пацієнта та інших лабораторних результатів. Цей розділ може містити діагноз (наприклад, визначення конкретного типу лейкемії), прогностичну інформацію та рекомендації щодо подальшого обстеження або лікування.
• Графіка: деякі звіти можуть містити гістограми або діаграми розсіювання, які візуально представляють дані, отримані в результаті аналізу проточної цитометрії. Ці наочні посібники можуть допомогти проілюструвати розподіл і характеристики проаналізованих популяцій клітин.

Про цю статтю

Лікарі написали цю статтю, щоб допомогти вам прочитати та зрозуміти ваш звіт про патологію. Зв'яжіться з нами якщо у вас є запитання щодо цієї статті або вашого звіту про патологію. Щоб отримати повний вступ до звіту про патологію, прочитайте цю статтю.

Інші корисні ресурси

Атлас патології