Cytométrie en flux

4 mars 2023

En pathologie, « flux » fait souvent référence à la cytométrie en flux, un test de laboratoire utilisé pour analyser les caractéristiques physiques et chimiques des fluides corporels et des tissus tels que le sang et la moelle osseuse. Ce test permet l'analyse simultanée de plusieurs caractéristiques physiques et/ou chimiques de cellules individuelles circulant à travers un appareil de détection optique et/ou électronique. Ce test est couramment utilisé dans le diagnostic et la surveillance des cancers du sang tels que lymphome et la leucémie, bien qu’il puisse également être utilisé pour diverses autres affections.

Pourquoi la cytométrie en flux est-elle pratiquée ?

• Comptage cellulaire : la cytométrie en flux est utilisée pour compter et analyser les caractéristiques physiques des cellules, telles que la taille et la complexité. Certains types de cellules comme explosions ne peut pas être compté à l’aide de ce test.
• Détection de biomarqueurs : la technique identifie et quantifie des biomarqueurs spécifiques à la surface ou à l'intérieur des cellules, ce qui est crucial pour le diagnostic des maladies.
• Diagnostic et surveillance des maladies : il joue un rôle déterminant dans le diagnostic des cancers du sang, des déficits immunitaires et des maladies infectieuses en analysant les propriétés des cellules sanguines. Flow est également utilisé pour surveiller les effets du traitement et rechercher des maladies récurrentes.
• Immunophénotypage : Il s'agit du processus d'identification de la présence et des quantités de certains types de cellules dans un échantillon, essentiel pour diagnostiquer des types spécifiques de leucémie et lymphome, ainsi que la surveillance des maladies infectieuses telles que le VIH.

Comment se déroule la cytométrie en flux ?

1. Préparation de l'échantillon : Un échantillon contenant des cellules, telles que du sang, de la moelle osseuse ou des lysats tissulaires, est préparé en mettant les cellules en suspension dans une solution tampon. Les cellules peuvent être colorées avec des colorants fluorescents ou des anticorps marqués avec des marqueurs fluorescents qui se lient à des composants ou marqueurs cellulaires spécifiques.
2. Analyse de l'échantillon : L'échantillon préparé est placé dans le cytomètre en flux. La machine utilise un système fluidique pour aspirer l’échantillon dans un flux de fluide étroit et hydrodynamiquement concentré. Les cellules sont alignées de manière à traverser le faisceau laser une par une.
3. Détection : lorsque les cellules traversent le laser, elles diffusent la lumière et les marqueurs fluorescents sont excités et émettent de la lumière à différentes longueurs d'onde. Les détecteurs captent cette lumière (fluorescence diffusée et émise) et la convertissent en signaux électriques.
4. Analyse : Les données collectées par le cytomètre en flux sont analysées à l'aide d'un logiciel spécialisé. Les propriétés de chaque cellule peuvent être visualisées sous forme de tracés ou d'histogrammes, permettant l'analyse de milliers, voire de millions de cellules sur une courte période.

Comment les résultats de ce test sont-ils décrits dans un rapport de pathologie ?

Les résultats de la cytométrie en flux dans un rapport de pathologie sont généralement décrits de manière détaillée et structurée, en se concentrant sur les caractéristiques spécifiques et les populations de cellules analysées au cours du test. Le contenu et le format du rapport peuvent varier en fonction de l'objectif du test, du type d'échantillon analysé et de la maladie ou de l'affection spécifique faisant l'objet de l'enquête. Cependant, la plupart des rapports de cytométrie en flux comprendront les éléments clés suivants :

• Informations sur l'échantillon : détails sur l'échantillon testé, y compris le type d'échantillon (par exemple, sang, moelle osseuse, tissu ganglionnaire), la date de prélèvement et toute information pertinente sur le patient.
• Méthodologie : Une brève description de la méthode de cytométrie en flux utilisée, y compris des informations sur la préparation cellulaire, les protocoles de coloration et les types de marqueurs fluorescents (anticorps) appliqués.
• Panel de marqueurs : une liste des marqueurs de surface cellulaire spécifiques (antigènes) et/ou des marqueurs intracellulaires testés, ainsi que les marqueurs fluorescents utilisés. Cette section donne un aperçu des cibles de l’analyse, qui sont essentielles à l’identification de populations cellulaires spécifiques.
• Résultats : Il s’agit de la section principale du rapport, présentant les résultats de l’analyse par cytométrie en flux. Les résultats sont souvent présentés sous forme de pourcentages ou de nombres absolus de cellules exprimant des marqueurs spécifiques, indiquant la présence et la proportion de différents types de cellules dans l'échantillon. Par exemple, dans le contexte d'une leucémie ou d'un lymphome, le rapport détaillerait l'immunophénotype des cellules malignes, telles que CD19+ Cellules B or CD3+ Les cellules T, et leur proportion par rapport à l'ensemble de la population cellulaire analysée.
• Interprétation : Le pathologiste fournit une interprétation des résultats, expliquant leur signification dans le contexte de la présentation clinique du patient et d'autres résultats de laboratoire. Cette section peut inclure un diagnostic (par exemple, l'identification d'un type spécifique de leucémie), des informations pronostiques et des recommandations pour des tests ou un traitement supplémentaires.
• Graphiques : certains rapports peuvent inclure des histogrammes ou des nuages ​​de points qui représentent visuellement les données obtenues à partir de l'analyse par cytométrie en flux. Ces aides visuelles peuvent aider à illustrer la répartition et les caractéristiques des populations cellulaires analysées.

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