இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி (IHC)

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி (IHC) என்பது பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஆய்வக சோதனை ஆகும், இது திசுப் பிரிவுகளுக்குள் உள்ள உயிரணுக்களில் குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்களை (புரதங்கள்) கண்டறிய ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்துகிறது. ஒரு திசுக்களின் வெவ்வேறு பகுதிகளுக்குள் குறிப்பிட்ட புரதங்களின் விநியோகம் மற்றும் உள்ளூர்மயமாக்கலைக் காண நோயியல் வல்லுநர்கள் இந்தப் பரிசோதனையைப் பயன்படுத்துகின்றனர், இதன் மூலம் மதிப்புமிக்க நோயறிதல், முன்கணிப்பு மற்றும் முன்கணிப்புத் தகவல்களை வழங்குகின்றனர்.

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி எப்படி வேலை செய்கிறது?

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியின் பின்னணியில் உள்ள கொள்கையானது ஆன்டிபாடிக்கும் அதன் ஆன்டிஜெனுக்கும் இடையே உள்ள குறிப்பிட்ட பிணைப்புத் தொடர்பை அடிப்படையாகக் கொண்டது. ஆன்டிபாடியானது திசு மாதிரியில் உள்ள ஆர்வமுள்ள ஒரு குறிப்பிட்ட புரதத்தை குறிவைத்து பிணைக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது. பிணைக்கப்பட்டவுடன், இந்த தொடர்பு ஒரு கண்டறிதல் முறையைப் பயன்படுத்தி காட்சிப்படுத்தப்படுகிறது, இதன் விளைவாக ஒரு வண்ண அல்லது ஒளிரும் சமிக்ஞையை நுண்ணோக்கின் கீழ் காணலாம்.

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியில் உள்ள படிகள்

1. மாதிரி தயாரிப்பு: திசு மாதிரிகள் பெரும்பாலும் சேகரிக்கப்படுகின்றன பயாப்ஸி அல்லது அறுவை சிகிச்சை பிரித்தல், பின்னர் திசு கட்டமைப்பைப் பாதுகாக்க சரி செய்யப்பட்டது. ஃபார்மலின் என்பது பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் ஃபிக்ஸேடிவ் ஆகும். பிரிவினையை எளிதாக்குவதற்காக திசு பாரஃபின் மெழுகில் பதிக்கப்பட்டுள்ளது.
2. பிரித்தல்: பாரஃபின் உட்பொதிக்கப்பட்ட திசுத் தொகுதியானது மைக்ரோடோமைப் பயன்படுத்தி மெல்லிய பகுதிகளாக (பொதுவாக 4-5 மைக்ரோமீட்டர் தடிமன்) வெட்டப்படுகிறது. இந்த பிரிவுகள் கறை படிவதற்கு நுண்ணோக்கி ஸ்லைடுகளில் வைக்கப்பட்டுள்ளன.
3. டிபாரஃபினைசேஷன் மற்றும் ரீஹைட்ரேஷன்: ஸ்லைடுகள் பாரஃபினை அகற்றி திசுக்களை ரீஹைட்ரேட் செய்ய சிகிச்சையளிக்கப்படுகின்றன, பொதுவாக சைலீன் (அல்லது மாற்றுகள்) தொடர்ந்து தரப்படுத்தப்பட்ட ஆல்கஹால்களைப் பயன்படுத்துகிறது.
4. ஆன்டிஜென் மீட்டெடுப்பு: பல ஆன்டிஜென்கள் சரிசெய்தல் செயல்பாட்டின் போது மறைக்கப்படுகின்றன. ஆன்டிஜென் மீட்டெடுப்பு என்பது இந்த ஆன்டிஜெனிக் தளங்களை அம்பலப்படுத்த வெப்பம் அல்லது என்சைம்கள் மூலம் பிரிவுகளுக்கு சிகிச்சையளிப்பதை உள்ளடக்கியது, அவை ஆன்டிபாடிகளுக்கு அணுகக்கூடியதாக இருக்கும்.
5. தடுப்பது: முதன்மை ஆன்டிபாடியை குறிப்பில்லாமல் பிணைப்பதைத் தடுக்க, புரதக் கரைசலைப் பயன்படுத்தி குறிப்பிட்ட அல்லாத பிணைப்பு தளங்கள் தடுக்கப்படுகின்றன, இது தவறான நேர்மறையான முடிவுகளுக்கு வழிவகுக்கும்.
6. முதன்மை ஆன்டிபாடி அடைகாத்தல்: ஸ்லைடு ஒரு முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் அடைகாக்கப்படுகிறது, இது ஆர்வத்தின் ஆன்டிஜெனுக்கு குறிப்பிட்டது. இந்த படி ஆன்டிபாடியை திசுக்களில் அதன் இலக்கு ஆன்டிஜெனுடன் பிணைக்க அனுமதிக்கிறது.
7. கண்டறிதல்: பிணைக்கப்படாத முதன்மை ஆன்டிபாடியைக் கழுவிய பிறகு, இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி சேர்க்கப்படுகிறது. இந்த ஆன்டிபாடி ஒரு நொதியுடன் (ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸிடேஸ் அல்லது அல்கலைன் பாஸ்பேடேஸ் போன்றவை) அல்லது ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் லேபிளுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் பிணைக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது. இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடியின் இருப்பு பின்னர் வண்ணமயமான எதிர்வினை (என்சைம்-இணைந்த ஆன்டிபாடிகள் விஷயத்தில்) அல்லது ஃப்ளோரசன்ஸ் (ஃப்ளோரசன்ட் லேபிளிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளின் விஷயத்தில்) மூலம் காட்சிப்படுத்தப்படுகிறது. வண்ண அளவியல் கண்டறிதலுக்கு, ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி இடைவினையின் தளத்தில் என்சைம் ஒரு புலப்படும், வண்ணப் பொருளாக மாற்றும் ஒரு அடி மூலக்கூறு சேர்க்கப்படுகிறது.
8. கவுண்டர்ஸ்டைனிங்: திசு கட்டமைப்பின் காட்சிப்படுத்தலை மேம்படுத்த, ஒரு லேசான கவுண்டர்ஸ்டைன் (எ.கா. ஹெமாடாக்சிலின்) பொதுவாக ஸ்லைடு, ஸ்டைனிங் கலத்தில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. கருக்கள் மாறுபட்ட நிறத்துடன்.
9. ஏற்றுதல் மற்றும் காட்சிப்படுத்தல்: ஸ்லைடு ஒரு கவர்ஸ்லிப்பால் மூடப்பட்டிருக்கும், மேலும் கறை படிந்த திசு ஒளி அல்லது ஒளிரும் நுண்ணோக்கியின் கீழ் ஆய்வு செய்யப்படுகிறது. உள்ளூர்மயமாக்கல், தீவிரம் மற்றும் கறை படிந்த முறை ஆகியவை திசுக்களுக்குள் ஆன்டிஜெனின் இருப்பு மற்றும் விநியோகம் பற்றிய நுண்ணறிவை வழங்குகிறது.

பயன்பாடுகள்

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி என்பது புற்றுநோய் உயிரணுக்களின் வகை மற்றும் தோற்றத்தைக் கண்டறிவதற்கும், தொற்று நோய்களைக் கண்டறிவதற்கும், ஒரே மாதிரி தோற்றமளிக்கும் நிலைமைகளை வேறுபடுத்துவதற்கும் நோயறிதல் நோயியலில் கருவியாக உள்ளது.

திசுக்களின் சிக்கலான கட்டமைப்பிற்குள் புரதங்களை குறிப்பாக அடையாளம் காணும் திறனின் மூலம், நோயியலில் இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி ஒரு தவிர்க்க முடியாத கருவியாக மாறியுள்ளது, இது நோயறிதல், முன்கணிப்பு மற்றும் இலக்கு சிகிச்சைகளின் வளர்ச்சியை கணிசமாக பாதிக்கிறது.

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியில் வெளிப்பாட்டின் வடிவங்கள்

இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியில், கறை படிதல்-அணு, சைட்டோபிளாஸ்மிக் மற்றும் சவ்வு-செல்லின் வெவ்வேறு பெட்டிகளுக்குள் ஆன்டிஜெனின் (புரதம்) உள்ளூர்மயமாக்கலைக் குறிக்கிறது. ஒவ்வொரு வடிவமும் புரதத்தின் செயல்பாடு மற்றும் புரதத்தை வெளிப்படுத்தும் செல் வகை பற்றிய மதிப்புமிக்க நுண்ணறிவுகளை வழங்குகிறது.

அணு வெளிப்பாடு

அணுக்கரு வெளிப்பாடு IHC ஸ்டைனிங் கலத்தில் உள்ளமைக்கப்படும் போது ஏற்படுகிறது கருடிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ தொகுப்பு நிகழ்கிறது, மேலும் பல ஒழுங்குமுறை புரதங்கள் அமைந்துள்ளன. அணுக்கரு வெளிப்பாட்டைக் காட்டும் புரதங்களின் எடுத்துக்காட்டுகளில் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகள், அணுக்கரு ஏற்பிகள் மற்றும் டிஎன்ஏ பிரதி மற்றும் பழுதுபார்ப்பில் ஈடுபட்டுள்ள புரதங்கள் ஆகியவை அடங்கும். உதாரணமாக, மார்பக புற்றுநோய் உயிரணுக்களில் உள்ள ஈஸ்ட்ரோஜன் ஏற்பி (ER) அணுக்கரு கறையை காட்டுகிறது, ஏனெனில் இது மரபணு வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்தும் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணியாக செயல்படுகிறது.

மரபணு வெளிப்பாடு அல்லது செல் சுழற்சி ஒழுங்குமுறையில் ஏற்படும் மாற்றங்களை உள்ளடக்கிய நோய்களைக் கண்டறிவதில் அணுக் கறை குறிப்பிடத்தக்கது. புற்றுநோய்களில் இது மிகவும் முக்கியமானது, அங்கு ஹார்மோன் ஏற்பிகள் போன்ற அணு புரதங்களின் இருப்பு அல்லது இல்லாமை சிகிச்சை முடிவுகளை வழிநடத்தும்.

சைட்டோபிளாஸ்மிக் வெளிப்பாடு

கறை முழுவதும் விநியோகிக்கப்படும் போது சைட்டோபிளாஸ்மிக் வெளிப்பாடு காணப்படுகிறது குழியவுருவுக்கு, கலத்தைச் சுற்றியுள்ள பகுதி கரு மற்றும் பல்வேறு உறுப்புகள் மற்றும் சைட்டோஸ்கெலட்டன் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது.
சைட்டோபிளாஸ்மிக் வெளிப்பாட்டைக் காட்டும் புரதங்களின் எடுத்துக்காட்டுகளில் என்சைம்கள், கட்டமைப்பு புரதங்கள் மற்றும் சில சமிக்ஞை மூலக்கூறுகள் ஆகியவை அடங்கும். ஒரு உதாரணம் அடங்கும் சைட்டோகெராட்டின்கள், இவை எபிடெலியல் செல்களின் சைட்டோபிளாஸில் காணப்படும் இடைநிலை இழை புரதங்கள்.

வளர்சிதை மாற்றம், சிக்னலிங் அல்லது செல்லுலார் கட்டமைப்பில் ஈடுபட்டுள்ள குறிப்பிட்ட புரதங்களை உற்பத்தி செய்யும் செல்களை அடையாளம் காண சைட்டோபிளாஸ்மிக் கறை உதவுகிறது. கட்டிகளைக் கண்டறிவதற்கும் வகைப்படுத்துவதற்கும், வளர்சிதை மாற்ற நோய்களைப் புரிந்துகொள்வதற்கும், தொற்று முகவர்களைக் கண்டறிவதற்கும் இந்தத் தகவல் முக்கியமானதாக இருக்கும்.

சவ்வு வெளிப்பாடு

சவ்வு வெளிப்பாடு என்பது செல் சவ்வுக்கு உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்ட கறையைக் குறிக்கிறது, இது கலத்தை அதன் வெளிப்புற சூழலில் இருந்து பிரிக்கும் மற்றும் பிற செல்கள் மற்றும் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் மேட்ரிக்ஸுடன் தொடர்பு கொள்ள மத்தியஸ்தம் செய்யும் எல்லை. சவ்வு வெளிப்பாட்டைக் காட்டும் புரதங்களின் எடுத்துக்காட்டுகளில் சவ்வு ஏற்பிகள், டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள் மற்றும் செல் ஒட்டுதல் மூலக்கூறுகள் அடங்கும். நன்கு அறியப்பட்ட உதாரணம் HER2/neu சில மார்பக புற்றுநோய்களில் அதிகப்படியான வெளிப்பாடு, HER2 புரதம் ஒரு சவ்வு படிந்த வடிவமாக கண்டறியப்படுகிறது.

செல்-செல் அல்லது செல்-மேட்ரிக்ஸ் இடைவினைகளில் ஈடுபடும் அல்லது புற-செல்லுலார் சிக்னல்களுக்கு பதிலளிக்கும் செல்களை அடையாளம் காண சவ்வு படிதல் மிகவும் முக்கியமானது. ஆன்காலஜியில், குறிப்பிட்ட சவ்வு புரதங்களின் இருப்பு, கட்டியின் ஆக்கிரமிப்புத்தன்மை மற்றும் இலக்கு வைத்திய சிகிச்சைகளுக்கு அதன் உணர்திறனைக் குறிக்கும்.

நோயறிதல் நோயியலில் இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியின் பயன்பாட்டில் இந்த வெளிப்பாட்டின் வடிவங்களைப் புரிந்துகொள்வது அடிப்படையாகும். துல்லியமான நோயறிதலைச் செய்ய, நோய்களின் நோயியல் இயற்பியலைப் புரிந்துகொள்வதற்கு மற்றும் சிகிச்சை உத்திகளைத் தெரிவிக்க இது நோயியல் நிபுணர்களுக்கு உதவுகிறது. உதாரணமாக, இருப்பதை தீர்மானித்தல் ER (அணு வெளிப்பாடு) மற்றும் HER2 மார்பக புற்றுநோய் உயிரணுக்களில் உள்ள (சவ்வு வெளிப்பாடு) முறையே ஹார்மோன் சிகிச்சை மற்றும் இலக்கு சிகிச்சையை முடிவு செய்வதற்கு முக்கியமானது.

பொதுவான இம்யூனோஹிஸ்டோகெமிக்கல் குறிப்பான்கள்

CD34

சைட்டோகெராடின் 7 (CK7)

சைட்டோகெராடின் 20 (CK20)

டெஸ்மின்

ஈஸ்ட்ரோஜன் ஏற்பி (ER)

GATA-3

கி-67

எம்ஐபி-1

p16

p63

p53

p40

புரோஜெஸ்ட்டிரோன் ஏற்பி (PR)

S100

SOX-10

TTF-1

இந்த கட்டுரை பற்றி

உங்கள் நோய்க்குறியியல் அறிக்கையைப் படித்துப் புரிந்துகொள்ள உதவும் வகையில் மருத்துவர்கள் இந்தக் கட்டுரையை எழுதியுள்ளனர். எங்களைத் தொடர்புகொள்ளவும் இந்த கட்டுரை அல்லது உங்கள் நோய்க்குறியியல் அறிக்கை பற்றி உங்களுக்கு கேள்விகள் இருந்தால். உங்கள் நோயியல் அறிக்கையின் முழுமையான அறிமுகத்திற்கு, படிக்கவும் இந்த கட்டுரை.

பிற பயனுள்ள ஆதாரங்கள்

நோய்க்குறியியல் அட்லஸ்