Floresan in situ hibridizasyon (FISH)


Ağustos 29, 2023

Floresan in situ hibridizasyon (FISH), kromozomlar üzerindeki spesifik DNA dizilerinin varlığını veya yokluğunu tespit etmek ve lokalize etmek için patolojide kullanılan bir laboratuvar testidir. Yalnızca kromozomun probla eşleşen veya tamamlayıcı olan kısımlarına bağlanan floresan problar kullanılarak çalışır. Yaygın olarak kanser ve bazı genetik sendromların tanısında kullanılır.

Floresan in situ hibridizasyon nasıl çalışır?

  1. Probun hazırlanması: Bir floresan prob, ilgilenilen spesifik DNA dizisine uyacak şekilde tasarlanmıştır. Bu prob daha sonra bir floresan boya ile etiketlenir. Aynı anda birden fazla hedefi tespit etmek için farklı problar farklı boyalarla etiketlenebilir.
  2. Numune hazırlama: Numunedeki DNA (kan numunesindeki hücreler, biyopsi veya doku kesitleri gibi) denatüre edilir, yani çift iplikli DNA'yı tek iplikçiklere ayırmak için ısıtılır.
  3. Hibridizasyon: Floresan etiketli prob numuneye uygulanır ve burada genom içindeki tamamlayıcı DNA dizisini arar ve ona bağlanır (melezleşir).
  4. Yıkama: Hibridizasyondan sonra örnek, hedef DNA'ya bağlanmamış fazla probu çıkarmak için yıkanır. Bu adım, arka plan sinyalinin azaltılmasına ve tespitin özgüllüğünün geliştirilmesine yardımcı olur.
  5. Tespit: Numune floresan mikroskobu altında incelenir. Spesifik DNA dizilerine bağlanan problar floresan ışık yayacak ve konumları görselleştirilip analiz edilebilecek.

Bu test neden yapılıyor?

Floresan in situ hibridizasyonun hücresel düzeyde kesin genetik bilgi sağlama yeteneği, onu kanserlerin ve genetik hastalıkların tanı ve tedavisinde paha biçilmez bir araç haline getirir.

  • Kromozomal anormalliklerin tespiti: FISH, kanserler de dahil olmak üzere çeşitli genetik hastalıklar ve durumlarla ilişkili spesifik genetik mutasyonları, delesyonları, kopyaları ve translokasyonları tanımlayabilir. Örneğin, kronik miyeloid lösemide (CML), 9 ve 22 numaralı kromozomlar arasındaki spesifik bir translokasyon olan Philadelphia kromozomunu tespit etmek için yaygın olarak kullanılır.
  • Kanser tanısı ve prognozu: FISH, belirli kanser türlerine özgü genetik değişiklikleri tanımlayarak hastalığın teşhisine, prognozunun belirlenmesine ve uygun tedavilerin seçilmesine yardımcı olur. Örneğin, tespit etmek için kullanılır HER2/yeni Meme kanserinde tedavi kararlarını etkileyebilecek amplifikasyon.
  • Genetik hastalıklar: FISH, Down sendromu gibi genetik durumların tanısında, 21. kromozomun fazladan bir kopyasının varlığını tespit ederek kullanılır.
Floresan yerinde hibridizasyon
Floresan yerinde hibridizasyon (FISH). Problar hücrenin mavi çekirdeğinde yeşil ve kırmızı noktalar halinde görülüyor.

Bu makale hakkında

Doktorlar bu makaleyi patoloji raporunuzu okumanıza ve anlamanıza yardımcı olmak için yazdı. Bize ulaşın Bu makale veya patoloji raporunuz hakkında sorularınız varsa. Patoloji raporunuza tam bir giriş için, okuyun Bu makale.

Diğer yardımcı kaynaklar

Patoloji Atlası
A+ A A-