免疫組織化學 (IHC)



免疫組織化學 (IHC) 是一種廣泛使用的實驗室測試,涉及使用抗體檢測組織切片內細胞中的特定抗原(蛋白質)。病理學家使用此測試來查看特定蛋白質在組織不同部分內的分佈和定位,從而提供有價值的診斷、預後和預測資訊。

免疫組化如何工作?

免疫組織化學背後的原理是基於抗體與其抗原之間的特異性結合親和力。該抗體旨在靶向並結合組織樣本中感興趣的特定蛋白質。一旦結合,這種相互作用就可以使用檢測系統進行可視化,從而產生可以在顯微鏡下看到的彩色或螢光訊號。

免疫組織化學涉及的步驟

  1. 樣本製備:收集組織標本,通常透過 活檢 或手術 切除,然後固定以保留組織結構。福馬林是常用的固定劑。將組織包埋在石蠟中以方便切片。
  2. 切片:使用切片機將石蠟包埋的組織塊切成薄片(通常4-5微米厚)。將這些切片放置在顯微鏡載玻片上進行染色。
  3. 脫蠟和再水化:對玻片進行處理以去除石蠟並使組織再水化,通常使用二甲苯(或替代品),然後使用分級酒精。
  4. 抗原修復:許多抗原在固定過程中被掩蓋。抗原修復涉及用熱或酶處理切片以暴露這些抗原位點,使它們能夠接觸到抗體。
  5. 封閉:使用蛋白質溶液封閉非特異性結合位點,以防止一抗非特異性結合,這可能導致假陽性結果。
  6. 一抗孵育:玻片與目標抗原特異性的一抗一起孵育。此步驟允許抗體與其組織中的目標抗原結合。
  7. 檢測:洗去任何未結合的一抗後,添加二抗體。此抗體與酵素(如辣根過氧化物酶或鹼性磷酸酶)或螢光標記綴合,旨在與一抗結合。然後透過比色反應(在酵素連結抗體的情況下)或螢光(在螢光標記的抗體的情況下)觀察二抗體的存在。對於比色檢測,添加底物,酶在抗原-抗體相互作用位點將其轉化為可見的有色產物。
  8. 複染:為了增強組織結構的可視化,通常將溫和的複染劑(例如蘇木精)應用於玻片,對細胞進行染色 原子核 具有對比色。
  9. 安裝和可視化:用蓋玻片覆蓋載玻片,並在光學或螢光顯微鏡下檢查染色的組織。染色的定位、強度和模式可以深入了解組織內抗原的存在和分佈。

應用

免疫組織化學在診斷病理學中有助於識別癌細胞的類型和起源、診斷傳染病以及區分相似的病症。

免疫組織化學能夠特異性辨識組織複雜結構中的蛋白質,因此已成為病理學中不可或缺的工具,顯著影響診斷、預後和標靶治療的開發。

免疫組織化學中的表現模式

在免疫組織化學中,染色模式(細胞核、細胞質和膜)是指抗原(蛋白質)在細胞不同區室的定位。每種模式都為了解蛋白質的功能和表達蛋白質的細胞類型提供了寶貴的見解。

核表達

當 IHC 染色定位於細胞時發生核表達 ,DNA 和 RNA 合成發生的地方,也是許多調節蛋白的所在地。顯示核表達的蛋白質的例子包括轉錄因子、核受體和參與 DNA 複製和修復的蛋白質。例如,乳癌細胞中的雌激素受體(ER)顯示核染色,因為它充當調節基因表現的轉錄因子。

免疫組織化學核表達

核染色對於診斷涉及基因表現或細胞週期調節改變的疾病具有重要意義。這對於癌症尤其重要,因為核蛋白(例如荷爾蒙受體)的存在或不存在可以指導治療決策。

細胞質表達

當染色分佈在整個細胞中時,可觀察到細胞質表達 細胞質,細胞周圍的部分 並含有各種細胞器和細胞骨架。
顯示細胞質表現的蛋白質的例子包括酵素、結構蛋白和某些訊號分子。一個例子包括 細胞角蛋白,它們是在上皮細胞的細胞質中發現的中間絲蛋白。

免疫組化細胞質表達

細胞質染色有助於識別產生參與代謝、信號傳導或細胞結構的特定蛋白質的細胞。這些資訊對於腫瘤的診斷和分類、了解代謝性疾病和識別傳染源至關重要。

膜表達

膜表達是指位於細胞膜的染色,細胞膜是將細胞與其外部環境分開並介導與其他細胞和細胞外基質的通訊的邊界。顯示膜表達的蛋白質的例子包括膜受體、轉運蛋白和細胞黏附分子。一個眾所周知的例子是 HER2/neu 在某些乳癌中過度表達,其中 HER2 蛋白被檢測為膜染色模式。

免疫組化膜表達

膜染色對於識別響應細胞外信號或參與細胞-細胞或細胞-基質相互作用的細胞特別重要。在腫瘤學中,特定膜蛋白的存在可以顯示腫瘤的侵襲性及其對標靶治療的敏感性。

了解這些表現模式對於免疫組織化學在診斷病理學中的應用至關重要。它使病理學家能夠做出精確的診斷、了解疾病的病理生理學並為治療策略提供資訊。例如,確定是否存在 ER (核表達)和 赫2 乳癌細胞中的(膜表達)對於決定荷爾蒙治療和標靶治療分別至關重要。

常見的免疫組化標記物

CD34
細胞角蛋白 7 (CK7)
細胞角蛋白 20 (CK20)
脫敏
雌激素受體 (ER)
CAT-3
基-67
MIB-1
p16
p63
p53
p40
孕激素受體 (PR)
S100
SOX-10
TTF-1

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