Durchflusszytometrie: Definition

In einem Pathologiebericht wird das Wort "fließen" bezieht sich normalerweise auf einen Labortest namens Durchflusszytometrie. Mit diesem Test werden einzelne Zellen in einer Blut-, Knochenmarks-, Lymphknotenoder andere Körperflüssigkeiten oder Gewebe. Mithilfe der Durchflusszytometrie können Pathologen viele verschiedene Merkmale von Zellen untersuchen, beispielsweise ihre Größe, Form und die von ihnen exprimierten Proteine. Dazu werden die Zellen durch ein Gerät geleitet, das Laser und Detektoren zur Analyse jeder einzelnen Zelle verwendet.

Die Durchflusszytometrie ist besonders wichtig bei der Diagnose und Überwachung von Blutkrebsarten, einschließlich Leukämie und Lymphomen, sowie bei der Beurteilung von Erkrankungen des Immunsystems, der Transplantationsüberwachung und bestimmten Arten von Infektionen.

Warum wird Durchflusszytometrie durchgeführt?

Die Durchflusszytometrie ist ein vielseitiges Verfahren, das detaillierte Informationen über die Zellen einer Probe liefert. Sie kann für folgende Zwecke eingesetzt werden:

• Zellzählung und -klassifizierung – Die Durchflusszytometrie kann die Anzahl und Art der Zellen in einer Probe messen. Sie kann auch die Zellgröße und die innere Komplexität bestimmen. Bestimmte unreife Zellen, wie z. B. Blasten, erfordern jedoch möglicherweise eine zusätzliche Interpretation und werden mit dieser Methode allein nicht immer genau gezählt.

• Biomarker-Erkennung – Der Test identifiziert bestimmte Proteine auf der Oberfläche oder im Inneren von Zellen. Diese Proteine, sogenannte Marker, helfen bei der Bestimmung von Zelltyp und -funktion und sind für die Diagnose vieler Krankheiten von entscheidender Bedeutung.

• Diagnose und Überwachung von Krankheiten Die Durchflusszytometrie wird häufig zur Diagnose von Leukämie und Lymphomen sowie zur Überwachung von Rückfällen oder Behandlungsansprechen eingesetzt. Sie kann auch zur Beurteilung von Immundefekten und bestimmten Infektionen wie HIV eingesetzt werden.

• Immunphänotypisierung – Hierbei handelt es sich um die Verwendung der Durchflusszytometrie zur Bestimmung der Identität einer Zelle anhand der von ihr exprimierten Proteine. Dies ist entscheidend für die Identifizierung verschiedener Arten weißer Blutkörperchen, insbesondere für die Diagnose und Klassifizierung von Blutkrebs.

Wie wird die Durchflusszytometrie durchgeführt?

Die Durchflusszytometrie umfasst typischerweise die folgenden Schritte:

1. Probenvorbereitung – Eine Zellprobe – üblicherweise aus Blut, Knochenmark oder Gewebe – wird entnommen und zu einer flüssigen Suspension verarbeitet. Anschließend werden die Zellen mit fluoreszierenden Antikörpern behandelt. Dabei handelt es sich um spezielle Moleküle, die an bestimmte Proteine auf oder in den Zellen binden. Diese Antikörper leuchten unter Lasereinwirkung und sind somit erkennbar.
2. Ausführen des Beispiels –  Die gefärbte Probe wird in ein Durchflusszytometer gegeben. Das Gerät verwendet ein Flüssigkeitssystem, um die Zellen einzeln durch einen Laserstrahl zu schicken. Beim Durchlaufen interagiert jede Zelle mit dem Laser.
3. Erkennung und Analyse –  Die Wechselwirkung zwischen Laser und Zellen führt zur Lichtstreuung, und die fluoreszierenden Marker emittieren farbiges Licht. Spezielle Detektoren messen dieses Licht und übermitteln die Informationen an einen Computer. Die Daten werden dann in Diagrammen und Grafiken (wie Streudiagrammen und Histogrammen) dargestellt, die die Art und Anzahl der vorhandenen Zellen zeigen.

Mithilfe der Durchflusszytometrie können Tausende bis Millionen von Zellen in nur wenigen Minuten analysiert werden.

Wie werden die Ergebnisse in einem Pathologiebericht beschrieben?

Ein Durchflusszytometriebericht enthält mehrere Abschnitte, die zur Erläuterung der Ergebnisse beitragen:

• Beispielinformationen – Enthält die Art der getesteten Probe (z. B. Blut, Knochenmark, Lymphknoten), den Zeitpunkt der Entnahme und alle relevanten klinischen Details.

• Methodik – Eine kurze Beschreibung der Durchführung des Tests, einschließlich der Art und Weise, wie die Zellen verarbeitet wurden und welche Antikörper oder Fluoreszenzfarbstoffe verwendet wurden.

• Markierungsfeld – Eine Liste der spezifischen Proteine (Marker genannt), die auf oder in den Zellen getestet wurden. Diese Marker tragen Namen wie CD3, CD19 oder CD45 und helfen bei der Identifizierung verschiedener Zelltypen wie T-Zellen, B-Zellen oder Blasten.

• Ergebnisse – Dieser Abschnitt beschreibt die nachgewiesenen Zellpopulationen und deren jeweilige Menge. Die Ergebnisse können als Prozentwerte oder absolute Zahlen angegeben werden und enthalten Angaben zu den exprimierten Markern. Beispielsweise kann der Bericht angeben, dass eine Zellgruppe CD19-positiv ist, was darauf schließen lässt, dass es sich um B-Zellen handelt.

• Dolmetschen – Der Pathologe erläutert die Befunde. Dies kann eine Diagnose (z. B. eine bestimmte Art von Leukämie oder Lymphom), einen Hinweis darauf, ob es Hinweise auf ein Wiederauftreten der Krankheit gibt, oder eine Empfehlung für weitere Untersuchungen umfassen.

• Grafiken – Einige Berichte enthalten Streudiagramme oder Histogramme, um die Zellverteilung in der Probe darzustellen. Diese Bilder helfen zu visualisieren, wie die Zellen gruppiert und identifiziert wurden.

Warum ist die Durchflusszytometrie wichtig?

Die Durchflusszytometrie liefert Informationen, die bei Routinefärbungen möglicherweise nicht sichtbar sind, wie z. B. Hämatoxylin und Eosin (H&E)Pathologen können damit Zelltypen identifizieren, Krebserkrankungen präziser klassifizieren und minimale Resterkrankungen erkennen, die mit anderen Methoden möglicherweise nicht sichtbar sind. Es ist ein wichtiges Instrument in der modernen Krebsdiagnostik, insbesondere bei hämatologischen (Blut-)Krebserkrankungen.

Fragen an Ihren Arzt

• Warum wurde in meinem Fall eine Durchflusszytometrie durchgeführt?

• Welche Zelltypen wurden in der Probe gefunden?

• Legen die Ergebnisse eine spezifische Diagnose nahe?

• Benötige ich aufgrund der Ergebnisse weitere Tests?

• Welchen Einfluss haben diese Ergebnisse auf meinen Behandlungsplan?