Durchflusszytometrie: Definition

In einem Pathologiebericht bezeichnet der Begriff „Durchfluss“ üblicherweise eine Laboruntersuchung namens Durchflusszytometrie . Mit dieser Untersuchung werden einzelne Zellen in einer Probe von Blut, Knochenmark, Lymphknoten oder anderen Körperflüssigkeiten oder Geweben analysiert. Die Durchflusszytometrie ermöglicht es Pathologen, verschiedene Zellmerkmale wie Größe, Form und die von ihnen exprimierten Proteine ​​zu untersuchen, indem die Zellen durch ein Gerät geleitet werden, das mithilfe von Lasern und Detektoren jede einzelne Zelle analysiert.

Die Durchflusszytometrie ist besonders wichtig bei der Diagnose und Überwachung von Blutkrebsarten, einschließlich Leukämie und Lymphomen, sowie bei der Beurteilung von Erkrankungen des Immunsystems, der Transplantationsüberwachung und bestimmten Arten von Infektionen.

Warum wird Durchflusszytometrie durchgeführt?

Die Durchflusszytometrie ist ein vielseitiges Verfahren, das detaillierte Informationen über die Zellen einer Probe liefert. Sie kann für folgende Zwecke eingesetzt werden:

• Zellzählung und -klassifizierung – Mithilfe der Durchflusszytometrie lassen sich Anzahl und Art der Zellen in einer Probe bestimmen. Auch Zellgröße und innere Komplexität können erfasst werden. Bestimmte unreife Zellen, wie z. B. Blasten, erfordern jedoch unter Umständen eine zusätzliche Interpretation und werden mit dieser Methode allein nicht immer präzise gezählt.

• Biomarker-Nachweis – Der Test identifiziert spezifische Proteine ​​auf der Oberfläche oder im Inneren von Zellen. Diese Proteine, sogenannte Marker, helfen, den Zelltyp und die Funktion der Zellen zu bestimmen und sind für die Diagnose vieler Krankheiten unerlässlich.

• Krankheitsdiagnostik und -überwachung – Die Durchflusszytometrie wird häufig zur Diagnose von Leukämie und Lymphomen sowie zur Überwachung von Rückfällen oder des Therapieansprechens eingesetzt. Sie kann auch zur Beurteilung von Immundefekten und bestimmten Infektionen wie HIV verwendet werden.

• Immunphänotypisierung – Hierbei wird die Durchflusszytometrie eingesetzt, um die Identität einer Zelle anhand der von ihr exprimierten Proteine ​​zu bestimmen. Dies ist entscheidend für die Identifizierung verschiedener Arten von weißen Blutkörperchen, insbesondere bei der Diagnose und Klassifizierung von Blutkrebs.

Wie wird die Durchflusszytometrie durchgeführt?

Die Durchflusszytometrie umfasst typischerweise die folgenden Schritte:

1. Probenvorbereitung – Eine Zellprobe – üblicherweise aus Blut, Knochenmark oder Gewebe – wird entnommen und zu einer flüssigen Suspension verarbeitet. Anschließend werden die Zellen mit fluoreszierenden Antikörpern behandelt. Dabei handelt es sich um spezielle Moleküle, die an bestimmte Proteine auf oder in den Zellen binden. Diese Antikörper leuchten unter Lasereinwirkung und sind somit erkennbar.
2. Ausführen des Beispiels –  Die gefärbte Probe wird in ein Durchflusszytometer gegeben. Das Gerät verwendet ein Flüssigkeitssystem, um die Zellen einzeln durch einen Laserstrahl zu schicken. Beim Durchlaufen interagiert jede Zelle mit dem Laser.
3. Erkennung und Analyse –  Die Wechselwirkung zwischen Laser und Zellen führt zur Lichtstreuung, und die fluoreszierenden Marker emittieren farbiges Licht. Spezielle Detektoren messen dieses Licht und übermitteln die Informationen an einen Computer. Die Daten werden dann in Diagrammen und Grafiken (wie Streudiagrammen und Histogrammen) dargestellt, die die Art und Anzahl der vorhandenen Zellen zeigen.

Mithilfe der Durchflusszytometrie können Tausende bis Millionen von Zellen in nur wenigen Minuten analysiert werden.

Wie werden die Ergebnisse in einem Pathologiebericht beschrieben?

Ein Durchflusszytometriebericht enthält mehrere Abschnitte, die zur Erläuterung der Ergebnisse beitragen:

• Probeninformationen – Dazu gehören die Art der untersuchten Probe (z. B. Blut, Knochenmark, Lymphknoten), der Zeitpunkt der Probenentnahme und alle relevanten klinischen Details.

• Methodik – Eine kurze Beschreibung, wie der Test durchgeführt wurde, einschließlich der Zellverarbeitung und der verwendeten Antikörper oder Fluoreszenzfarbstoffe.

• Markerpanel – Eine Liste der spezifischen Proteine ​​(Marker genannt), die auf oder in den Zellen untersucht wurden. Diese Marker sind mit Namen wie CD3, CD19 oder CD45 gekennzeichnet und helfen bei der Identifizierung verschiedener Zelltypen, z. B. T-Zellen, B-Zellen oder Blasten.

• Ergebnisse – Dieser Abschnitt beschreibt die nachgewiesenen Zellpopulationen und deren jeweilige Anzahl. Die Ergebnisse werden als Prozentsätze oder absolute Zellzahlen angegeben und enthalten Angaben zu den exprimierten Markern. Beispielsweise kann im Bericht vermerkt sein, dass eine Zellgruppe CD19-positiv ist, was auf B-Zellen hindeutet.

• Interpretation – Der Pathologe erläutert die Befunde. Dies kann eine Diagnose (z. B. eine bestimmte Art von Leukämie oder Lymphom), eine Anmerkung zu möglichen Anzeichen eines Krankheitsrezidivs oder eine Empfehlung für weitere Untersuchungen umfassen.

• Grafiken – Einige Berichte enthalten Streudiagramme oder Histogramme, um die Verteilung der Zellen in der Probe darzustellen. Diese Abbildungen helfen dabei, zu visualisieren, wie die Zellen gruppiert und identifiziert wurden.

Warum ist die Durchflusszytometrie wichtig?

Die Durchflusszytometrie liefert Informationen, die mit herkömmlichen Färbemethoden wie Hämatoxylin und Eosin (H&E) nicht sichtbar sind . Sie ermöglicht Pathologen die Identifizierung von Zelltypen, die präzisere Klassifizierung von Tumoren und den Nachweis minimaler Resterkrankungen, die mit anderen Methoden möglicherweise nicht erkennbar sind. Sie ist ein unverzichtbares Instrument in der modernen Krebsdiagnostik, insbesondere bei hämatologischen (Blut-)Tumoren.

Fragen an Ihren Arzt

• Warum wurde in meinem Fall eine Durchflusszytometrie durchgeführt?

• Welche Zelltypen wurden in der Probe gefunden?

• Legen die Ergebnisse eine spezifische Diagnose nahe?

• Benötige ich aufgrund der Ergebnisse weitere Tests?

• Welchen Einfluss haben diese Ergebnisse auf meinen Behandlungsplan?