Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH)

29. August 2023

Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) ist ein Labortest, der in der Pathologie zum Nachweis und zur Lokalisierung des Vorhandenseins oder Fehlens spezifischer DNA-Sequenzen auf Chromosomen eingesetzt wird. Dabei werden fluoreszierende Sonden verwendet, die nur an die Teile des Chromosoms binden, die mit der Sonde übereinstimmen oder zu dieser komplementär sind. Es wird häufig bei der Diagnose von Krebs und bestimmten genetischen Syndromen eingesetzt.

Wie funktioniert die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung?

1. Sondenvorbereitung: Eine fluoreszierende Sonde wird so konzipiert, dass sie der spezifischen DNA-Sequenz von Interesse entspricht. Diese Sonde wird dann mit einem Fluoreszenzfarbstoff markiert. Verschiedene Sonden können mit unterschiedlichen Farbstoffen markiert werden, um mehrere Ziele gleichzeitig zu erkennen.
2. Probenvorbereitung: Die DNA in der Probe (z. B. Zellen aus einer Blutprobe, einer Biopsie oder Gewebeschnitten) wird denaturiert, das heißt, sie wird erhitzt, um die doppelsträngige DNA in Einzelstränge zu trennen.
3. Hybridisierung: Die fluoreszierend markierte Sonde wird auf die Probe aufgetragen, wo sie nach ihrer komplementären DNA-Sequenz im Genom sucht und diese bindet (hybridisiert).
4. Waschen: Nach der Hybridisierung wird die Probe gewaschen, um überschüssige Sonde zu entfernen, die nicht an ihre Ziel-DNA gebunden hat. Dieser Schritt trägt dazu bei, das Hintergrundsignal zu reduzieren und die Spezifität der Erkennung zu verbessern.
5. Nachweis: Die Probe wird unter einem Fluoreszenzmikroskop untersucht. Die Sonden, die an bestimmte DNA-Sequenzen gebunden haben, fluoreszieren und ihre Position kann sichtbar gemacht und analysiert werden.

Warum wird dieser Test durchgeführt?

Die Fähigkeit der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung, präzise genetische Informationen auf zellulärer Ebene bereitzustellen, macht sie zu einem unschätzbar wertvollen Werkzeug bei der Diagnose und Behandlung von Krebs und genetischen Erkrankungen.

• Erkennung von Chromosomenanomalien: FISH kann spezifische genetische Mutationen, Deletionen, Duplikationen und Translokationen identifizieren, die mit verschiedenen genetischen Krankheiten und Zuständen, einschließlich Krebs, verbunden sind. Beispielsweise wird es häufig zum Nachweis des Philadelphia-Chromosoms bei chronischer myeloischer Leukämie (CML) verwendet, einer spezifischen Translokation zwischen den Chromosomen 9 und 22.
• Krebsdiagnose und -prognose: Durch die Identifizierung genetischer Veränderungen, die für bestimmte Krebsarten spezifisch sind, hilft FISH bei der Diagnose der Krankheit, der Bestimmung ihrer Prognose und der Auswahl geeigneter Therapien. Es wird zum Beispiel zum Erkennen verwendet HER2/neu Verstärkung bei Brustkrebs, die Behandlungsentscheidungen beeinflussen kann.
• Genetische Erkrankungen: FISH wird bei der Diagnose genetischer Erkrankungen wie dem Down-Syndrom eingesetzt, indem das Vorhandensein einer zusätzlichen Kopie von Chromosom 21 nachgewiesen wird.

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