Cytométrie en flux : définition

Dans un rapport de pathologie, le mot "flux" fait généralement référence à un test de laboratoire appelé cytométrie en fluxCe test est utilisé pour analyser des cellules individuelles dans un échantillon de sang, de moelle osseuse, ganglion lymphatiqueou d'autres fluides ou tissus corporels. La cytométrie de flux permet aux pathologistes d'examiner de nombreuses caractéristiques des cellules, telles que leur taille, leur forme et les protéines qu'elles expriment, en les faisant passer dans une machine utilisant des lasers et des détecteurs pour analyser chaque cellule.

La cytométrie de flux est particulièrement importante dans le diagnostic et la surveillance des cancers du sang, notamment la leucémie et le lymphome, ainsi que dans l’évaluation des troubles du système immunitaire, la surveillance des transplantations et certains types d’infections.

Pourquoi la cytométrie en flux est-elle pratiquée ?

La cytométrie de flux est une technique polyvalente qui fournit des informations détaillées sur les cellules d'un échantillon. Elle peut être utilisée aux fins suivantes :

• Comptage et classification des cellules – La cytométrie en flux permet de mesurer le nombre et les types de cellules dans un échantillon. Elle permet également d'évaluer la taille et la complexité interne des cellules. Cependant, certaines cellules immatures, comme les blastes, peuvent nécessiter une interprétation plus approfondie et ne sont pas toujours comptées avec précision par cette seule méthode.

• Détection de biomarqueurs – Ce test identifie des protéines spécifiques à la surface ou à l'intérieur des cellules. Ces protéines, appelées marqueurs, aident à déterminer le type et la fonction des cellules et sont essentielles au diagnostic de nombreuses maladies.

• Diagnostic et suivi des maladies – La cytométrie de flux est couramment utilisée pour aider au diagnostic de la leucémie et du lymphome, ainsi que pour surveiller les rechutes ou la réponse au traitement. Elle peut également être utilisée pour évaluer les déficits immunitaires et certaines infections, comme le VIH.

• Immunophénotypage – Il s'agit de l'utilisation de la cytométrie de flux pour déterminer l'identité d'une cellule en fonction des protéines qu'elle exprime. Cette technique est essentielle pour identifier les différents types de globules blancs, notamment pour le diagnostic et la classification des cancers du sang.

Comment se déroule la cytométrie en flux ?

La cytométrie de flux implique généralement les étapes suivantes :

1. Préparation des échantillons – Un échantillon de cellules, généralement du sang, de la moelle osseuse ou des tissus, est prélevé et transformé en suspension liquide. Les cellules sont ensuite traitées avec des anticorps fluorescents, des molécules spéciales qui se lient à des protéines spécifiques présentes sur ou à l'intérieur des cellules. Ces anticorps brillent lorsqu'ils sont exposés à un laser, ce qui permet de les détecter.
2. Exécution de l'échantillon –  L'échantillon coloré est placé dans un appareil appelé cytomètre de flux. Cet appareil utilise un système fluidique pour envoyer les cellules une par une à travers un faisceau laser. Chaque cellule qui passe à travers le faisceau interagit avec le laser.
3. Détection et analyse –  L'interaction entre le laser et les cellules provoque une diffusion de la lumière, et les marqueurs fluorescents émettent une lumière colorée. Des détecteurs spéciaux mesurent cette lumière et transmettent les informations à un ordinateur. Les données sont ensuite affichées sous forme de graphiques (tels que des nuages de points et des histogrammes) indiquant le type et le nombre de cellules présentes.

La cytométrie de flux peut analyser des milliers, voire des millions de cellules en quelques minutes seulement.

Comment les résultats sont-ils décrits dans un rapport de pathologie ?

Un rapport de cytométrie de flux comprend plusieurs sections qui aident à expliquer les résultats :

• Exemple d'informations – Comprend le type d’échantillon testé (par exemple, sang, moelle osseuse, ganglion lymphatique), la date à laquelle il a été prélevé et tous les détails cliniques pertinents.

• Méthodologie – Une brève description de la manière dont le test a été réalisé, y compris la manière dont les cellules ont été traitées et les anticorps ou colorants fluorescents utilisés.

• Panneau de marqueurs – Une liste des protéines spécifiques (appelées marqueurs) recherchées sur ou à l'intérieur des cellules. Ces marqueurs sont appelés CD3, CD19 ou CD45 et permettent d'identifier différents types de cellules, comme les lymphocytes T, les lymphocytes B ou les blastes.

• Résultats – Cette section décrit les populations cellulaires détectées et leur quantité. Les résultats peuvent être exprimés en pourcentage ou en nombre absolu, et détaillent les marqueurs exprimés. Par exemple, le rapport peut indiquer qu'un groupe de cellules est CD19-positif, ce qui suggère qu'il s'agit de lymphocytes B.

• Interprétation – Le pathologiste explique les résultats. Cela peut inclure un diagnostic (comme un type spécifique de leucémie ou de lymphome), un commentaire sur la présence éventuelle de signes de récidive de la maladie ou une recommandation d'examens complémentaires.

• Les éléments graphiques – Certains rapports incluent des nuages de points ou des histogrammes pour illustrer la répartition des cellules dans l'échantillon. Ces images permettent de visualiser le regroupement et l'identification des cellules.

Pourquoi la cytométrie de flux est-elle importante ?

La cytométrie de flux fournit des informations qui peuvent ne pas être visibles avec des colorations de routine, telles que hématoxyline et éosine (H&E)Il permet aux pathologistes d'identifier les types cellulaires, de classer les cancers plus précisément et de détecter une maladie résiduelle minime, parfois invisible avec d'autres méthodes. Il s'agit d'un outil essentiel dans le diagnostic moderne du cancer, notamment des cancers hématologiques (du sang).

Questions à poser à votre médecin

• Pourquoi une cytométrie de flux a-t-elle été réalisée dans mon cas ?

• Quels types de cellules ont été trouvés dans l’échantillon ?

• Les résultats suggèrent-ils un diagnostic spécifique ?

• Aurai-je besoin de tests supplémentaires en fonction des résultats ?

• Comment ces résultats affecteront-ils mon plan de traitement ?