Hibridizare fluorescentă in situ (FISH)

August 29, 2023

Hibridizarea fluorescentă in situ (FISH) este un test de laborator utilizat în patologie pentru a detecta și localiza prezența sau absența secvențelor specifice de ADN pe cromozomi. Funcționează prin utilizarea sondelor fluorescente care se leagă doar la acele părți ale cromozomului care se potrivesc sau sunt complementare sondei. Este utilizat în mod obișnuit în diagnosticul cancerului și al anumitor sindroame genetice.

Cum funcționează hibridizarea fluorescentă in situ?

1. Pregătirea sondei: O sondă fluorescentă este proiectată pentru a se potrivi cu secvența specifică de ADN de interes. Această sondă este apoi marcată cu un colorant fluorescent. Diferite sonde pot fi etichetate cu diferiți coloranți pentru a detecta mai multe ținte simultan.
2. Pregătirea probei: ADN-ul din probă (cum ar fi celulele dintr-o probă de sânge, o biopsie sau secțiuni de țesut) este denaturat, ceea ce înseamnă că este încălzit pentru a separa ADN-ul dublu catenar în catene simple.
3. Hibridare: Sonda marcată fluorescent este aplicată pe eșantion, unde caută și se leagă (hibridizează) la secvența sa complementară de ADN din genom.
4. Spălare: După hibridizare, proba este spălată pentru a îndepărta orice sondă în exces care nu s-a legat de ADN-ul său țintă. Acest pas ajută la reducerea semnalului de fundal și la îmbunătățirea specificității detectării.
5. Detectare: Proba este examinată la microscop cu fluorescență. Sondele care s-au legat de secvențe specifice de ADN vor avea fluorescență, iar locația lor poate fi vizualizată și analizată.

De ce se face acest test?

Capacitatea hibridizării in situ cu fluorescență de a furniza informații genetice precise la nivel celular o face un instrument de neprețuit în diagnosticarea și gestionarea cancerelor și a bolilor genetice.

• Detectarea anomaliilor cromozomiale: FISH poate identifica mutații genetice specifice, deleții, duplicări și translocații asociate cu diferite boli și afecțiuni genetice, inclusiv cancere. De exemplu, este utilizat pe scară largă pentru a detecta cromozomul Philadelphia în leucemia mieloidă cronică (LMC), o translocare specifică între cromozomii 9 și 22.
• Diagnosticul și prognosticul cancerului: prin identificarea modificărilor genetice specifice anumitor tipuri de cancer, FISH ajută la diagnosticarea bolii, la determinarea prognosticului acesteia și la selectarea terapiilor adecvate. De exemplu, este folosit pentru a detecta HER2/neu amplificare în cancerul de sân, care poate influența deciziile de tratament.
• Boli genetice: FISH este utilizat în diagnosticarea afecțiunilor genetice, cum ar fi sindromul Down, prin detectarea prezenței unei copii suplimentare a cromozomului 21.

Despre acest articol

Medicii au scris acest articol pentru a vă ajuta să citiți și să înțelegeți raportul dumneavoastră de patologie. Contact dacă aveți întrebări despre acest articol sau raportul dumneavoastră de patologie. Pentru o introducere completă a raportului dumneavoastră de patologie, citiți acest articol.

Alte resurse utile

Atlas de patologie