Prietoková cytometria

March 4, 2023

V patológii sa „prietok“ často vzťahuje na prietokovú cytometriu, laboratórny test používaný na analýzu fyzikálnych a chemických charakteristík telesných tekutín a tkanív, ako je krv a kostná dreň. Tento test umožňuje simultánnu analýzu viacerých fyzikálnych a/alebo chemických charakteristík jednotlivých buniek pretekajúcich cez optický a/alebo elektronický detekčný prístroj. Toto vyšetrenie sa bežne používa pri diagnostike a monitorovaní rakoviny krvi ako napr lymfóm a leukémiu, hoci sa môže použiť aj na rôzne iné stavy.

Prečo sa vykonáva prietoková cytometria?

• Počítanie buniek: Prietoková cytometria sa používa na počítanie a analýzu fyzikálnych vlastností buniek, ako je veľkosť a zložitosť. Niektoré typy buniek ako napr výbuchy nemožno spočítať pomocou tohto testu.
• Detekcia biomarkerov: Táto technika identifikuje a kvantifikuje špecifické biomarkery na povrchu alebo vo vnútri buniek, čo je kľúčové pre diagnostiku chorôb.
• Diagnóza a monitorovanie chorôb: Pomáha pri diagnostike rakoviny krvi, imunitných nedostatočností a infekčných chorôb pomocou analýzy vlastností krvných buniek. Flow sa tiež používa na sledovanie účinkov liečby a na vyhľadávanie opakujúcich sa ochorení.
• Imunofenotypizácia: Ide o proces identifikácie prítomnosti a množstva určitých typov buniek vo vzorke, ktorý je nevyhnutný na diagnostiku špecifických typov leukémie a lymfóm, ako aj monitorovanie infekčných chorôb, ako je HIV.

Ako prebieha prietoková cytometria?

1. Príprava vzorky: Vzorka obsahujúca bunky, ako je krv, kostná dreň alebo tkanivové lyzáty, sa pripraví suspendovaním buniek v tlmivom roztoku. Bunky môžu byť zafarbené fluorescenčnými farbivami alebo protilátkami označenými fluorescenčnými markermi, ktoré sa viažu na špecifické bunkové zložky alebo markery.
2. Spracovanie vzorky: Pripravená vzorka sa umiestni do prietokového cytometra. Stroj využíva fluidný systém na vtiahnutie vzorky do úzkeho, hydrodynamicky zameraného prúdu tekutiny. Bunky sú zarovnané tak, aby prechádzali cez laserový lúč jeden po druhom.
3. Detekcia: Keď bunky prechádzajú laserom, rozptyľujú svetlo a fluorescenčné markery sú excitované a vyžarujú svetlo v rôznych vlnových dĺžkach. Detektory zachytávajú toto svetlo (rozptýlenú aj emitovanú fluorescenciu) a premieňajú ho na elektrické signály.
4. Analýza: Údaje zozbierané prietokovým cytometrom sa analyzujú pomocou špecializovaného softvéru. Vlastnosti každej bunky je možné vizualizovať v grafoch alebo histogramoch, čo umožňuje analýzu tisícok až miliónov buniek v krátkom čase.

Ako sú výsledky tohto testu opísané v správe o patológii?

Výsledky prietokovej cytometrie v správe o patológii sú zvyčajne opísané podrobným a štruktúrovaným spôsobom so zameraním na špecifické charakteristiky a populácie buniek analyzovaných počas testu. Obsah a formát správy sa môže líšiť v závislosti od účelu testu, typu analyzovanej vzorky a konkrétneho vyšetrovaného ochorenia alebo stavu. Väčšina správ prietokovej cytometrie však bude obsahovať nasledujúce kľúčové prvky:

• Informácie o vzorke: Podrobnosti o testovanej vzorke vrátane typu vzorky (napr. krv, kostná dreň, tkanivo lymfatických uzlín), dátum odberu a všetky relevantné informácie o pacientovi.
• Metodika: Stručný popis použitej metódy prietokovej cytometrie vrátane informácií o príprave buniek, protokoloch farbenia a typoch použitých fluorescenčných markerov (protilátok).
• Panel markerov: Zoznam špecifických testovaných markerov bunkového povrchu (antigénov) a/alebo intracelulárnych markerov spolu s použitými fluorescenčnými značkami. Táto časť poskytuje pohľad na ciele analýzy, ktoré sú rozhodujúce pre identifikáciu špecifických bunkových populácií.
• Výsledky: Toto je hlavná časť správy, ktorá prezentuje zistenia z analýzy prietokovej cytometrie. Výsledky sa často uvádzajú ako percentá alebo absolútne počty buniek exprimujúcich špecifické markery, čo naznačuje prítomnosť a podiel rôznych typov buniek vo vzorke. Napríklad v súvislosti s leukémiou alebo lymfómom by sa v správe podrobne uvádzal imunofenotyp malígnych buniek, ako napr. CD19+ B bunky or CD3+ T bunkya ich podiel v pomere k celej analyzovanej bunkovej populácii.
• Interpretácia: Patológ poskytuje interpretáciu výsledkov, vysvetľuje, čo tieto nálezy znamenajú v kontexte klinického obrazu pacienta a iných laboratórnych nálezov. Táto časť môže obsahovať diagnózu (napr. identifikáciu špecifického typu leukémie), prognostické informácie a odporúčania pre ďalšie testovanie alebo liečbu.
• Grafika: Niektoré správy môžu obsahovať histogramy alebo bodové grafy, ktoré vizuálne predstavujú údaje získané z analýzy prietokovej cytometrie. Tieto vizuálne pomôcky môžu pomôcť ilustrovať distribúciu a charakteristiky analyzovaných bunkových populácií.

O tomto článku

Lekári napísali tento článok, aby vám pomohol prečítať a pochopiť vašu správu o patológii. Kontaktujte nás ak máte otázky týkajúce sa tohto článku alebo správy o vašej patológii. Ak chcete získať úplný úvod do správy o vašej patológii, prečítajte si tento článok.

Ďalšie užitočné zdroje

Atlas patológie