JAK2: Definizione

JAK2 (Janus chinasi 2) è un gene che fornisce istruzioni per la produzione di una proteina coinvolta nel processo di crescita, divisione e risposta cellulare ai segnali del sistema immunitario. JAK2 fa parte di una famiglia di geni correlati che include anche JAK1, JAK3 e TYK2. Tutti questi geni producono proteine ​​che aiutano le cellule a comunicare attraverso una via nota come JAK-STAT, particolarmente importante per lo sviluppo delle cellule del sangue e per la funzionalità del sistema immunitario.

Cosa fa JAK2?

La proteina prodotta dal gene JAK2 è chiamata tirosin-chinasi, che agisce come un interruttore all'interno delle cellule. Quando segnali specifici (come ormoni o fattori di crescita) si legano ai recettori sulla superficie cellulare, JAK2 contribuisce a inviare tali segnali all'interno della cellula. Questo attiva una catena di eventi che controlla il comportamento della cellula, tra cui la crescita, la sopravvivenza e l'esecuzione delle sue funzioni specifiche. In particolare, JAK2 è fondamentale per la formazione delle cellule del sangue nel midollo osseo.

Dove si trova normalmente JAK2 o dove è attivo?

JAK2 è attivo in molti tipi di cellule in tutto il corpo, in particolare nelle cellule che rispondono ai segnali degli ormoni e delle proteine ​​del sistema immunitario note come citochine. È più attivo nei tessuti ematopoietici come il midollo osseo, dove contribuisce a regolare la produzione di globuli rossi, globuli bianchi e piastrine. Svolge anche un ruolo nel sistema immunitario aiutando le cellule a rispondere a infezioni e infiammazioni.

Perché JAK2 è importante nelle malattie?

Le alterazioni (mutazioni) nel gene JAK2 possono causare l'attivazione permanente della proteina, anche in assenza di segnale. Ciò porta a una crescita cellulare incontrollata, che può causare l'insorgenza di alcuni tipi di tumori del sangue chiamati neoplasie mieloproliferative (MPN). La mutazione più comune è la JAK2 V617F, presente in:

• Oltre il 95% delle persone è affetto da policitemia vera (PV).

• Circa il 50-60% delle persone affette da trombocitemia essenziale (TE) o mielofibrosi primaria (PMF).

Altre mutazioni di JAK2 sono presenti anche nella leucemia eosinofila cronica, nella leucemia mielomonocitica cronica (LMMC), nella leucemia mieloide acuta (LMA) e in alcuni tumori solidi come il tumore al polmone o al seno. Queste mutazioni aiutano i medici a diagnosticare queste malattie e possono influenzare le scelte terapeutiche. Le anomalie di JAK2 possono verificarsi anche in condizioni non tumorali caratterizzate da emocromo anormale o infiammazione.

Come effettuano i patologi il test per JAK2?

I patologi analizzano le alterazioni del gene JAK2 utilizzando tecniche di laboratorio specializzate note come test molecolari. Questi test ricercano mutazioni genetiche (alterazioni nella sequenza del DNA) che possono causare un'attività anomala della proteina JAK2. Il test viene spesso eseguito su un campione di sangue o di midollo osseo. Ecco i metodi di analisi più comuni:

Reazione a catena della polimerasi (PCR)

La PCR è una tecnica altamente sensibile utilizzata per rilevare mutazioni specifiche e note, più comunemente la mutazione JAK2 V617F. In questo test, il DNA del campione viene amplificato, consentendo l'identificazione di piccole quantità di DNA mutato.

• Esempio di risultato: “Mutazione JAK2 V617F rilevata (carico allelico: 35%)”
  Ciò significa che la mutazione è stata riscontrata nel 35% delle cellule analizzate, il che potrebbe riflettere la percentuale di cellule anomale presenti nel campione.

• Se la mutazione non viene rilevata, il referto potrebbe riportare la dicitura: "Mutazione JAK2 V617F non rilevata".

Sequenziamento di nuova generazione (NGS)

L'NGS è un test più ampio che analizza molti geni contemporaneamente, comprese tutte le parti (esoni) del gene JAK2. Può rilevare mutazioni rare o complesse oltre la V617F, come quelle nell'esone 12, importanti per la diagnosi di policitemia vera nei pazienti che risultano negativi al test per la V617F.

• Esempio di risultato: “Mutazione dell'esone 2 di JAK12 rilevata: c.1614_1616del (p.H538_K539delinsL)”
  Ciò significa che è stata riscontrata una delezione e un'inserzione nell'esone 12, che possono essere associate alla policitemia vera.

• Se non vengono rilevate mutazioni nel gene, il rapporto potrebbe riportare la dicitura: "Nessuna variante patogena rilevata in JAK2".

PCR allele-specifica (chiamata anche ASO-PCR o ARMS)

Questa versione altamente sensibile della PCR viene utilizzata per rilevare quantità molto piccole di DNA mutato, ad esempio in pazienti in trattamento o in remissione (malattia residua minima). Viene in genere utilizzata quando la mutazione è già nota.

• Esempio di risultato: “Rilevata mutazione JAK2 V617F di basso livello (carico allelico: 0.5%), al di sotto del limite di rilevamento per la PCR standard.”
  Ciò suggerisce che rimane un piccolo numero di cellule anomale.

Ibridazione in situ fluorescente (FISH)

La FISH utilizza sonde fluorescenti per rilevare alterazioni strutturali nei cromosomi, come riarrangiamenti o traslocazioni di JAK2. Questo è particolarmente utile in alcuni rari tumori del sangue che comportano fusioni geniche (ad esempio, PCM1::JAK2).

• Esempio di risultato: "Riarrangiamento anomalo di JAK2 rilevato mediante FISH utilizzando sonde break-apart".

• Se il risultato è normale: "Nessuna evidenza di riarrangiamento JAK2 tramite FISH".

Test di fusione basati sull'RNA

Questo test cerca i geni di fusione che coinvolgono JAK2 utilizzando l'RNA estratto dal campione. I geni di fusione si verificano quando una parte del gene JAK2 si lega a un altro gene, il che può favorire la crescita del cancro. Questo viene spesso effettuato utilizzando il sequenziamento di nuova generazione basato sull'RNA.

• Esempio di risultato: “Trascrizione di fusione rilevata: PCM1::JAK2”
  Questo risultato potrebbe supportare la diagnosi di una rara neoplasia mieloide o linfoide con un riarrangiamento JAK2.

Insieme, questi test aiutano i patologi a identificare la presenza, il tipo e l'estensione delle mutazioni JAK2, essenziali per formulare una diagnosi accurata, orientare le decisioni terapeutiche e monitorare la progressione della malattia o la risposta alla terapia. Il referto del vostro anatomopatologo potrebbe includere uno o più di questi metodi a seconda della diagnosi e della situazione clinica.

Domande da porre al medico

• Cosa significa il risultato del mio test JAK2?

• Ho una mutazione JAK2? Se sì, quale?

• La mia diagnosi include una neoplasia mieloproliferativa o un altro tipo di malattia del sangue?

• Il test JAK2 potrebbe aiutarmi a orientare il mio trattamento?

• Sono un candidato per una terapia mirata con un inibitore JAK?

• La mia mutazione JAK2 influenzerà la mia prognosi o il rischio di progressione?