Flowcytometrie

4 maart 2023

In de pathologie verwijst ‘flow’ vaak naar flowcytometrie, een laboratoriumtest die wordt gebruikt voor het analyseren van de fysische en chemische kenmerken van lichaamsvloeistoffen en weefsels zoals bloed en beenmerg. Deze test maakt de gelijktijdige analyse mogelijk van meerdere fysieke en/of chemische kenmerken van afzonderlijke cellen die door een optisch en/of elektronisch detectieapparaat stromen. Deze test wordt vaak gebruikt bij de diagnose en monitoring van bloedkankers zoals lymfoom en leukemie, hoewel het ook voor een verscheidenheid aan andere aandoeningen kan worden gebruikt.

Waarom wordt flowcytometrie uitgevoerd?

• Celtelling: Flowcytometrie wordt gebruikt voor het tellen en analyseren van de fysieke kenmerken van cellen, zoals grootte en complexiteit. Sommige soorten cellen, zoals ontploffing kunnen met deze test niet worden geteld.
• Detectie van biomarkers: De techniek identificeert en kwantificeert specifieke biomarkers op het oppervlak of in cellen, wat cruciaal is voor het diagnosticeren van ziekten.
• Diagnose en monitoring van ziekten: het speelt een belangrijke rol bij het diagnosticeren van bloedkanker, immuundeficiënties en infectieziekten door de eigenschappen van bloedcellen te analyseren. Flow wordt ook gebruikt om de behandeleffecten te monitoren en te zoeken naar terugkerende ziekten.
• Immunofenotypering: dit is het proces waarbij de aanwezigheid en hoeveelheden van bepaalde celtypen in een monster worden geïdentificeerd, essentieel voor het diagnosticeren van specifieke soorten leukemie en lymfoomen het monitoren van infectieziekten zoals HIV.

Hoe wordt flowcytometrie uitgevoerd?

1. Monstervoorbereiding: Een monster dat cellen bevat, zoals bloed, beenmerg of weefsellysaten, wordt bereid door cellen in een bufferoplossing te suspenderen. Cellen kunnen worden gekleurd met fluorescerende kleurstoffen of antilichamen die zijn gelabeld met fluorescerende markers die binden aan specifieke celcomponenten of markers.
2. Het monster uitvoeren: Het voorbereide monster wordt in de flowcytometer geplaatst. De machine maakt gebruik van een vloeistofsysteem om het monster in een smalle, hydrodynamisch gerichte vloeistofstroom te trekken. Cellen zijn zo uitgelijnd dat ze één voor één door de laserstraal gaan.
3. Detectie: Terwijl cellen door de laser gaan, verstrooien ze licht, en de fluorescerende markeringen worden opgewonden en zenden licht uit op verschillende golflengten. Detectoren vangen dit licht op (zowel verstrooide als uitgezonden fluorescentie) en zetten het om in elektrische signalen.
4. Analyse: De door de flowcytometer verzamelde gegevens worden geanalyseerd met behulp van gespecialiseerde software. De eigenschappen van elke cel kunnen worden gevisualiseerd in grafieken of histogrammen, waardoor duizenden tot miljoenen cellen in korte tijd kunnen worden geanalyseerd.

Hoe worden de resultaten van deze test beschreven in een pathologierapport?

De resultaten van flowcytometrie in een pathologierapport worden doorgaans op een gedetailleerde en gestructureerde manier beschreven, waarbij de nadruk ligt op de specifieke kenmerken en populaties van cellen die tijdens de test zijn geanalyseerd. De inhoud en het formaat van het rapport kunnen variëren afhankelijk van het doel van de test, het geanalyseerde type monster en de specifieke ziekte of aandoening die wordt onderzocht. De meeste flowcytometrierapporten bevatten echter de volgende belangrijke elementen:

• Monsterinformatie: details over het geteste monster, inclusief het type monster (bijvoorbeeld bloed, beenmerg, lymfeklierweefsel), de datum van afname en eventuele relevante patiëntinformatie.
• Methodologie: Een korte beschrijving van de gebruikte flowcytometriemethode, inclusief informatie over celvoorbereiding, kleuringsprotocollen en de toegepaste soorten fluorescerende markers (antilichamen).
• Panel van markers: een lijst van de specifieke celoppervlakmarkers (antigenen) en/of intracellulaire markers die zijn getest, samen met de gebruikte fluorescerende labels. Deze sectie geeft inzicht in de doelstellingen van de analyse, die van cruciaal belang zijn voor het identificeren van specifieke celpopulaties.
• Resultaten: Dit is het kerngedeelte van het rapport, waarin de bevindingen van de flowcytometrieanalyse worden gepresenteerd. Resultaten worden vaak gerapporteerd als percentages of absolute aantallen cellen die specifieke markers tot expressie brengen, wat de aanwezigheid en proportie van verschillende celtypen in het monster aangeeft. In de context van leukemie of lymfoom zou het rapport bijvoorbeeld het immunofenotype van de kwaadaardige cellen gedetailleerd beschrijven, zoals CD19+ B-cellen or CD3+ T-cellen, en hun aandeel ten opzichte van de gehele geanalyseerde celpopulatie.
• Interpretatie: De patholoog geeft een interpretatie van de resultaten en legt uit wat de bevindingen betekenen in de context van de klinische presentatie van de patiënt en andere laboratoriumbevindingen. Deze sectie kan een diagnose bevatten (bijvoorbeeld het identificeren van een specifiek type leukemie), prognostische informatie en aanbevelingen voor verder onderzoek of behandeling.
• Grafieken: Sommige rapporten kunnen histogrammen of spreidingsdiagrammen bevatten die de gegevens die zijn verkregen uit de flowcytometrieanalyse visueel weergeven. Deze visuele hulpmiddelen kunnen de verspreiding en kenmerken van de geanalyseerde celpopulaties helpen illustreren.

Over dit artikel

Artsen hebben dit artikel geschreven om u te helpen uw pathologierapport te lezen en te begrijpen. Algemene inlichtingen als u vragen heeft over dit artikel of uw pathologierapport. Voor een volledige inleiding tot uw pathologierapport kunt u lezen dit artikel.

Andere nuttige bronnen

Atlas van pathologie