Citometria de fluxo

Em um relatório de patologia, a palavra "fluxo" geralmente se refere a um teste de laboratório chamado citometria de fluxo. Este teste é usado para analisar células individuais em uma amostra de sangue, medula óssea, linfonodo, ou outro fluido ou tecido corporal. A citometria de fluxo permite que os patologistas examinem muitas características diferentes das células, como tamanho, formato e as proteínas que expressam, passando-as por uma máquina que utiliza lasers e detectores para analisar cada célula.

A citometria de fluxo é particularmente importante no diagnóstico e monitoramento de cânceres no sangue, incluindo leucemia e linfoma, bem como na avaliação de distúrbios do sistema imunológico, monitoramento de transplantes e certos tipos de infecções.

Por que a citometria de fluxo é realizada?

A citometria de fluxo é uma técnica versátil que fornece informações detalhadas sobre as células de uma amostra. Pode ser utilizada para os seguintes propósitos:

• Contagem e classificação de células – A citometria de fluxo pode medir o número e os tipos de células em uma amostra. Também pode avaliar o tamanho e a complexidade interna das células. No entanto, células imaturas específicas, como blastos, podem exigir interpretação adicional e nem sempre são contadas com precisão usando apenas este método.

• Detecção de biomarcador – O teste identifica proteínas específicas na superfície ou no interior das células. Essas proteínas, conhecidas como marcadores, ajudam a determinar o tipo e a função das células e são essenciais no diagnóstico de muitas doenças.

• Diagnosticando e monitorando doenças – A citometria de fluxo é comumente usada para auxiliar no diagnóstico de leucemia e linfoma, bem como para monitorar recidivas ou resposta ao tratamento. Também pode ser usada na avaliação de imunodeficiências e certas infecções, como o HIV.

• Imunofenotipagem – Refere-se ao uso da citometria de fluxo para determinar a identidade de uma célula com base nas proteínas que ela expressa. Isso é crucial para identificar diferentes tipos de glóbulos brancos, especialmente no diagnóstico e classificação de cânceres sanguíneos.

Como é realizada a citometria de fluxo?

A citometria de fluxo normalmente envolve as seguintes etapas:

1. Preparação da amostra – Uma amostra de células — geralmente de sangue, medula óssea ou tecido — é coletada e processada em uma suspensão líquida. As células são então tratadas com anticorpos fluorescentes, moléculas especiais que se ligam a proteínas específicas dentro ou sobre as células. Esses anticorpos brilham quando expostos a um laser, possibilitando sua detecção.
2. Executando a amostra –  A amostra corada é colocada em uma máquina chamada citômetro de fluxo. A máquina utiliza um sistema de fluido para enviar as células, uma de cada vez, através de um feixe de laser. À medida que cada célula passa, ela interage com o laser.
3. Detecção e análise –  A interação entre o laser e as células faz com que a luz se disperse, e os marcadores fluorescentes emitem luz colorida. Detectores especiais medem essa luz e enviam as informações para um computador. Os dados são então exibidos em tabelas e gráficos (como diagramas de dispersão e histogramas) que mostram os tipos e números de células presentes.

A citometria de fluxo pode analisar milhares a milhões de células em apenas alguns minutos.

Como os resultados são descritos em um relatório de patologia?

Um relatório de citometria de fluxo inclui várias seções que ajudam a explicar as descobertas:

• Informação de amostra – Inclui o tipo de amostra testada (por exemplo, sangue, medula óssea, linfonodo), quando foi coletada e quaisquer detalhes clínicos relevantes.

• Metodologia – Uma breve descrição de como o teste foi realizado, incluindo como as células foram processadas e quais anticorpos ou corantes fluorescentes foram usados.

• Painel de marcadores – Uma lista de proteínas específicas (chamadas marcadores) que foram testadas dentro ou dentro das células. Esses marcadores são identificados com nomes como CD3, CD19 ou CD45 e ajudam a identificar diferentes tipos de células, como células T, células B ou blastos.

• Resultados – Esta seção descreve as populações celulares detectadas e as quantidades de cada uma delas presentes. Os resultados podem ser relatados como porcentagens ou contagens absolutas e incluirão detalhes sobre quais marcadores foram expressos. Por exemplo, o relatório pode indicar que um grupo de células é CD19-positivo, o que sugere que se trata de células B.

• Interpretação – O patologista explica os achados. Isso pode incluir um diagnóstico (como um tipo específico de leucemia ou linfoma), um comentário sobre a existência de evidências de recorrência da doença ou uma recomendação para exames adicionais.

• Gráficos – Alguns relatórios incluem gráficos de dispersão ou histogramas para mostrar a distribuição das células na amostra. Essas imagens ajudam a visualizar como as células foram agrupadas e identificadas.

Por que a citometria de fluxo é importante?

A citometria de fluxo fornece informações que podem não ser visíveis com colorações de rotina, como hematoxilina e eosina (H&E)Permite que patologistas identifiquem tipos de células, classifiquem cânceres com mais precisão e detectem doenças residuais mínimas que podem não ser visíveis com outros métodos. É uma ferramenta essencial no diagnóstico moderno do câncer, especialmente para cânceres hematológicos (do sangue).

Perguntas para fazer ao seu médico

• Por que a citometria de fluxo foi realizada no meu caso?

• Que tipos de células foram encontradas na amostra?

• Os resultados sugerem um diagnóstico específico?

• Precisarei de testes adicionais com base nos resultados?

• Como essas descobertas afetarão meu plano de tratamento?