Проточной цитометрии

4 марта 2023

В патологии термин «поток» часто относится к проточной цитометрии — лабораторному тесту, используемому для анализа физических и химических характеристик жидкостей и тканей организма, таких как кровь и костный мозг. Этот тест позволяет одновременно анализировать множество физических и/или химических характеристик отдельных клеток, проходящих через оптическое и/или электронное устройство обнаружения. Этот тест обычно используется для диагностики и мониторинга рака крови, такого как лимфома и лейкемия, хотя его можно использовать и при ряде других заболеваний.

Для чего проводят проточную цитометрию?

• Подсчет клеток. Проточная цитометрия используется для подсчета и анализа физических характеристик клеток, таких как размер и сложность. Некоторые типы клеток, такие как взрывы не могут быть подсчитаны с помощью этого теста.
• Обнаружение биомаркеров: этот метод идентифицирует и количественно определяет конкретные биомаркеры на поверхности или внутри клеток, что имеет решающее значение для диагностики заболеваний.
• Диагностика и мониторинг заболеваний. Он играет важную роль в диагностике рака крови, иммунодефицита и инфекционных заболеваний путем анализа свойств клеток крови. Поток также используется для мониторинга эффективности лечения и поиска рецидивов заболевания.
• Иммунофенотипирование: это процесс определения наличия и количества определенных типов клеток в образце, необходимый для диагностики конкретных типов лейкемии и лимфома, а также мониторинг инфекционных заболеваний, таких как ВИЧ.

Как проводится проточная цитометрия?

1. Подготовка образца. Образец, содержащий клетки, такие как кровь, костный мозг или лизаты тканей, готовят путем суспендирования клеток в буферном растворе. Клетки можно окрашивать флуоресцентными красителями или антителами, помеченными флуоресцентными маркерами, которые связываются со специфическими клеточными компонентами или маркерами.
2. Запуск образца: Подготовленный образец помещают в проточный цитометр. В машине используется жидкостная система, которая втягивает образец в узкий гидродинамически сфокусированный поток жидкости. Клетки выравниваются так, что они проходят через лазерный луч по одной.
3. Обнаружение: когда клетки проходят через лазер, они рассеивают свет, а флуоресцентные маркеры возбуждаются и излучают свет с различными длинами волн. Детекторы улавливают этот свет (как рассеянный, так и излучаемый флуоресценцией) и преобразуют его в электрические сигналы.
4. Анализ: данные, собранные проточным цитометром, анализируются с использованием специализированного программного обеспечения. Свойства каждой ячейки можно визуализировать в виде графиков или гистограмм, что позволяет анализировать от тысяч до миллионов клеток за короткий период.

Как результаты этого теста описываются в отчете о патологии?

Результаты проточной цитометрии в отчете о патологии обычно описываются подробно и структурировано, уделяя особое внимание конкретным характеристикам и популяциям клеток, проанализированных во время теста. Содержание и формат отчета могут варьироваться в зависимости от цели теста, типа анализируемого образца и конкретного исследуемого заболевания или состояния. Однако большинство отчетов проточной цитометрии будут включать следующие ключевые элементы:

• Информация об образце: Подробная информация об испытанном образце, включая тип образца (например, кровь, костный мозг, ткань лимфатического узла), дату сбора и любую соответствующую информацию о пациенте.
• Методология: краткое описание использованного метода проточной цитометрии, включая информацию о подготовке клеток, протоколах окрашивания и типах применяемых флуоресцентных маркеров (антител).
• Панель маркеров: список протестированных специфических маркеров клеточной поверхности (антигенов) и/или внутриклеточных маркеров, а также использованных флуоресцентных меток. В этом разделе дается представление о целях анализа, которые имеют решающее значение для выявления конкретных популяций клеток.
• Результаты: Это основной раздел отчета, в котором представлены результаты анализа проточной цитометрии. Результаты часто выражаются в процентах или абсолютном количестве клеток, экспрессирующих определенные маркеры, что указывает на присутствие и долю различных типов клеток в образце. Например, в контексте лейкемии или лимфомы в отчете будет подробно описан иммунофенотип злокачественных клеток, таких как CD19+ В-клетки or CD3+ Т-клеткии их долю по отношению ко всей анализируемой популяции клеток.
• Интерпретация: патологоанатом интерпретирует результаты, объясняя, что они означают в контексте клинической картины пациента и других лабораторных данных. Этот раздел может включать диагноз (например, определение конкретного типа лейкемии), прогностическую информацию и рекомендации по дальнейшему обследованию или лечению.
• Графика. Некоторые отчеты могут включать гистограммы или диаграммы рассеяния, которые визуально представляют данные, полученные в результате анализа проточной цитометрии. Эти наглядные пособия могут помочь проиллюстрировать распределение и характеристики анализируемых популяций клеток.

Об этой статье

Врачи написали эту статью, чтобы помочь вам прочитать и понять отчет о патологии. Свяжитесь с нами если у вас есть вопросы по поводу этой статьи или отчета о патологии. Полную информацию об отчете о патологии см. этой статье.

Другие полезные ресурсы

Атлас патологии