هیبریداسیون فلورسانس درجا (FISH) یک آزمایش آزمایشگاهی است که در آسیب شناسی برای تشخیص و تعیین محل وجود یا عدم وجود توالی DNA خاص روی کروموزوم ها استفاده می شود. با استفاده از پروبهای فلورسنت که فقط به آن بخشهایی از کروموزوم که با پروب مطابقت دارند یا مکمل هستند، متصل میشوند. معمولاً در تشخیص سرطان و برخی از سندرم های ژنتیکی استفاده می شود.
فلورسانس ترکیبی درجا چگونه کار می کند؟
آماده سازی پروب: یک پروب فلورسنت برای مطابقت با توالی DNA خاص مورد نظر طراحی شده است. سپس این پروب با رنگ فلورسنت برچسب گذاری می شود. کاوشگرهای مختلف را می توان با رنگ های مختلف برای شناسایی چندین هدف به طور همزمان برچسب گذاری کرد.
آمادهسازی نمونه: DNA موجود در نمونه (مانند سلولهای نمونه خون، بیوپسی یا بخشهای بافتی) دناتوره میشود، به این معنی که برای جدا کردن DNA دو رشتهای به رشتههای منفرد حرارت داده میشود.
هیبریداسیون: پروب نشاندار شده با فلورسنت روی نمونه اعمال می شود، جایی که به دنبال توالی DNA مکمل خود در ژنوم می گردد و پیوند می یابد (هیبرید می شود).
شستشو: پس از هیبریداسیون، نمونه شسته می شود تا هر پروب اضافی که به DNA هدف خود متصل نشده است، خارج شود. این مرحله به کاهش سیگنال پسزمینه و بهبود ویژگی تشخیص کمک میکند.
تشخیص: نمونه در زیر میکروسکوپ فلورسانس بررسی می شود. کاوشگرهایی که به توالیهای DNA خاصی متصل شدهاند فلورسانس میشوند و مکان آنها قابل مشاهده و تجزیه و تحلیل است.
چرا این آزمایش انجام می شود؟
توانایی هیبریداسیون درجا فلورسانس برای ارائه اطلاعات ژنتیکی دقیق در سطح سلولی، آن را به ابزاری ارزشمند در تشخیص و مدیریت سرطان ها و بیماری های ژنتیکی تبدیل می کند.
تشخیص ناهنجاری های کروموزومی: FISH می تواند جهش های ژنتیکی خاص، حذف ها، تکرارها و جابه جایی های مرتبط با بیماری ها و شرایط ژنتیکی مختلف، از جمله سرطان ها را شناسایی کند. به عنوان مثال، به طور گسترده ای برای تشخیص کروموزوم فیلادلفیا در لوسمی میلوئیدی مزمن (CML)، یک جابجایی خاص بین کروموزوم های 9 و 22 استفاده می شود.
تشخیص و پیش آگهی سرطان: FISH با شناسایی تغییرات ژنتیکی مختص انواع خاصی از سرطان، به تشخیص بیماری، تعیین پیش آگهی آن و انتخاب درمان های مناسب کمک می کند. به عنوان مثال، برای تشخیص استفاده می شود HER2/neu تقویت در سرطان سینه، که می تواند بر تصمیمات درمانی تأثیر بگذارد.
بیماری های ژنتیکی: FISH در تشخیص بیماری های ژنتیکی مانند سندرم داون با تشخیص وجود یک نسخه اضافی از کروموزوم 21 استفاده می شود.
درباره این مقاله
پزشکان این مقاله را برای کمک به خواندن و درک گزارش آسیب شناسی خود نوشتند. تماس با ما اگر در مورد این مقاله یا گزارش آسیب شناسی خود سؤالی دارید. برای معرفی کامل گزارش آسیب شناسی خود، بخوانید این مقاله.