Immunoistochimica (IHC)

L'immunoistochimica (spesso abbreviato in IHC) è un test di laboratorio che patologi Utilizzato per rilevare proteine ​​specifiche, note anche come antigeni, all'interno delle cellule in un campione di tessuto. Evidenziando queste proteine, i patologi possono comprendere meglio i tipi di cellule presenti, la loro origine e il loro comportamento. Queste informazioni consentono ai medici di formulare diagnosi accurate, prevedere la progressione di una malattia e selezionare i trattamenti più efficaci.

Come funziona l'immunoistochimica?

L'immunoistochimica utilizza sostanze chimiche specializzate note come anticorpi. Questi anticorpi possono riconoscere e legarsi a proteine ​​specifiche all'interno del campione di tessuto. Una volta che un anticorpo si lega alla proteina bersaglio, patologi È possibile renderla visibile al microscopio aggiungendo un colorante o un marcatore fluorescente. Questo facilita la visualizzazione della posizione della proteina all'interno delle cellule.

Quali sono le fasi dell'immunoistochimica?

1. preparazione del campione:In primo luogo, i campioni di tessuto vengono ottenuti tramite un biopsia o intervento chirurgico. Per conservarli, i campioni vengono trattati con una soluzione speciale, solitamente formalina, e poi inclusi in una sostanza simile alla cera chiamata paraffina.

2. sezionamento:Il tessuto conservato viene tagliato in fette molto sottili (circa 4-5 micrometri di spessore) e posizionato su vetrini da microscopio, dove viene preparato per la colorazione.

3. Deparaffinizzazione e reidratazione:La cera (paraffina) viene rimossa utilizzando speciali sostanze chimiche, consentendo di colorare efficacemente i tessuti.

4. Recupero dell'antigene: A volte, le proteine ​​(antigeni) vengono nascoste durante la preparazione del tessuto. I patologi trattano il tessuto con calore o enzimi speciali per riesporre queste proteine, rendendole più facili da individuare per gli anticorpi.

5. Prodotti di bloccoPer garantire che gli anticorpi si attacchino solo alle proteine ​​desiderate, i patologi utilizzano soluzioni proteiche speciali per bloccare altri siti di legame indesiderati.

6. Incubazione dell'anticorpo primario:I vetrini sono ricoperti da un anticorpo primario che si lega specificamente alla proteina di interesse.

7. rivelazione: Dopo aver rimosso l'anticorpo primario in eccesso, viene applicato un anticorpo secondario. Questo secondo anticorpo si lega all'anticorpo primario e contiene un enzima o un marcatore fluorescente. Una volta attivato, produce una luce colorata o fluorescente, rivelando l'esatta posizione della proteina bersaglio.

8. Controcolorazione: Per aiutare i patologi a vedere chiaramente la struttura del tessuto, una leggera colorazione di fondo (spesso ematossilina, che colora le cellule) nucleo viene aggiunto il blu).

9. Montaggio e visualizzazione: Infine, i vetrini vengono coperti con un sottile coprioggetto ed esaminati al microscopio. I patologi annotano la distribuzione, l'intensità e la posizione della colorazione per interpretare i risultati.

Perché l'immunoistochimica è importante?

L'immunoistochimica è estremamente preziosa perché aiuta i patologi a diagnosticare le malattie in modo accurato. Può distinguere diversi tipi di cellule tumorali, identificare infezioni e differenziare malattie che appaiono simili al microscopio. Inoltre, identificando proteine ​​specifiche, i medici possono determinare le opzioni terapeutiche più efficaci, comprese le terapie mirate.

Cosa significano i diversi modelli di colorazione?

Quando i patologi esaminano i vetrini di immunoistochimica, esaminano attentamente la distribuzione delle proteine ​​all'interno delle cellule. Esistono tre modelli principali: espressione nucleare, espressione citoplasmatica ed espressione membranosa. Ciascuno di essi è spiegato più dettagliatamente di seguito.

Espressione nucleare

L'espressione nucleare (nota anche come reattività nucleare) si riferisce alla colorazione che si trova nel nucleo della cellula, dove è immagazzinato il materiale genetico, come il DNA. Le proteine ​​presenti nel nucleo sono spesso coinvolte nella regolazione della crescita e del comportamento cellulare. Ad esempio, recettore degli estrogeni (ER), una proteina importante nelle decisioni terapeutiche del cancro al seno, si manifesta sotto forma di colorazione nucleare. L'identificazione della colorazione nucleare aiuta i medici a diagnosticare determinati tumori e a determinare i trattamenti appropriati, come la terapia ormonale.

Espressione citoplasmatica

L'espressione citoplasmatica (nota anche come reattività citoplasmatica) si verifica nel citoplasma, l'area attorno alla cellula nucleo che contiene molte strutture ed enzimi importanti. Le proteine ​​presenti qui svolgono tipicamente un ruolo nel metabolismo, forniscono supporto strutturale o facilitano la segnalazione interna. Un esempio di colorazione citoplasmatica è la presenza di citocheratine—proteine ​​presenti nelle cellule che rivestono molte parti del corpo. Questo tipo di colorazione aiuta a identificare l'origine delle cellule, a diagnosticare specifici tipi di cancro o a rilevare infezioni.

Espressione membranosa

L'espressione membranosa (nota anche come reattività di membrana) evidenzia le proteine ​​situate sulla superficie o membrana cellulare, che aiutano le cellule a comunicare tra loro e con l'ambiente circostante. Un esempio ben noto è HER2 Proteina presente in alcuni tumori al seno, caratterizzata da un caratteristico pattern di colorazione membranosa. L'identificazione delle proteine ​​membranose è fondamentale perché può orientare terapie mirate, aiutando i medici a selezionare trattamenti personalizzati per il tipo specifico di tumore della paziente.

La comprensione di questi modelli di espressione aiuta i patologi a fornire diagnosi accurate, a prevedere meglio la progressione delle malattie e a consigliare trattamenti efficaci.